マウスモデルにおける細菌免疫調節タンパク質の抗腫瘍効果の評価

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臥位の麻酔をかけた雌マウスで、膀胱上皮に尿路上皮腫瘍を患っていることから始めます。

後ろ足を固定し、尿道口の位置を特定し、マウスの膀胱にカテーテルを挿入します。膀胱を洗って尿を取り除きます。

ヘリコバクター・ピロリ好中球活性化タンパク質(HP-NAP)を注射します - 免疫調節細菌タンパク質。

腫瘍微小環境では、HP-NAP は好中球上の Toll 様受容体と相互作用し、シグナル伝達カスケードを開始し、炎症誘発性サイトカイン発現を増加させます。

サイトカインは、naIve T リンパ球をインターフェロンガンマを産生する 1 型 T ヘルパー (Th1) および 1 型細胞傷害性リンパ球 (Tc1) リンパ球に分化させます。

インターフェロンガンマは新しい血管の形成を阻害し、腫瘍への栄養素と酸素の利用可能性を制限します。

さらに、腫瘍細胞上の腫瘍抗原提示MHC分子をアップレギュレートし、Tc1細胞との相互作用を促進します。

この相互作用により、腫瘍細胞死を誘導する細胞傷害性分子が放出され、HP-NAP の抗腫瘍効果が実証されます。

MB-49細胞を注射してから少なくとも3日後、動物を麻酔した後、先ほど示したようにカテーテルを挿入し、200〜300マイクロリットルの滅菌PBSを含む1ミリリットルの注射器を使用して、膀胱から残留尿を洗浄し、すべての液体を吸引します。

PBS 150 マイクロリットルあたり 50 マイクログラムのヘリコバクター ピロリ好中球活性化タンパク質 (HPNAP) を膀胱に注入し、漏れを避けるためにシリンジをカテーテルに取り付けたままにします。1時間後、尿道からカテーテルをそっと取り外し、マウスが目覚めるまで加熱ランプの下のケージに入れます。