マウスモデルにおけるBCGによる鼻腔内免疫

麻酔をかけたマウスから始めて、病気の原因となる能力が低下したウシ菌の弱毒生BCG株をマウスの鼻から投与します。

注射された細菌は、肺組織と近くのリンパ節の免疫応答を刺激します。

これにより、マウスの循環に入るエフェクターT細胞とB細胞が生成されます。

エフェクターB細胞はマイコバクテリアに対する抗体を産生します。

一方、エフェクターT細胞は常駐メモリーT細胞またはT_RM細胞として肺組織に定着し、長期的な免疫を提供します。

予防接種の有効性を評価するには、マウスの鼻から病気を引き起こす能力を持つ生きた病原性抗酸菌を投与します。

これにより、肺組織内の T_RM 細胞の活性化が引き起

こされます。

活性化された T_RM 細胞はサイトカインを放出し、エフェクター B 細胞を含む他の免疫細胞を引き付けます。

これらの B 細胞は抗酸菌に結合する抗体を分泌し、好中球によるクリアランスを高め、免疫の成功を示します。

鼻腔内投与の場合は、マイクロピペットに20マイクロリットルのBCG懸濁液をロードし、麻酔したマウスをフード内の仰臥位に置きます。20マイクロリットルの体積全体が沈着するまで、2つの鼻孔の間に接種物を滴下し、マウスが懸濁液を吸入できるように滴の間に時間を残します。次に、マイクロピペットにさらに20マイクロリットルの細菌をリロードし、投与を繰り返します。

H37Rv結核菌株による鼻腔内チャレンジの場合、ワクチン接種後の適切な実験時点で、先ほど示したように、40マイクロリットルのH37Rv細菌懸濁液の鼻腔内投与を動物に接種します。