マウスモデルにおける生弱毒スポロゾイトによる皮内免疫

マ

ネーションをかけたマウスを実体顕微鏡下で観察し、マウスの耳の下側を粘着テープでステージに固定します。

目は乾燥を防ぐために軟膏でコーティングされています。

マラリア原虫であるマラリア原虫の胞子体期を装填した注射器を持参してください。生きたスポロゾイトは、非感染性にするために放射線減衰化されています。

実体顕微鏡を使用して、耳の上面に注入し、最も外側の表皮層を貫通し、スポロゾイトを真皮に放出します。

針を取り外す前に、注入された懸濁液の逆流を防ぐために、針を短時間所定の位置に置いてください。

丘疹と呼ばれる注射部位の目に見える腫れは、注射の成功を確認します。

同じ耳に複数回注射します。

注入した耳を解放し、もう一方の耳への注射を繰り返します。

注射後、マウスを回復させます。

注入されたスポロゾイトは免疫応答を引き起こし、寄生虫に対する免疫系をプライミングします。

スポロゾイトを注入する前に、つま先をつまんで実験動物の適切な鎮静レベルを確認し、角膜の乾燥を防ぐために眼軟膏を塗布します。次に、すばやく作業し、透明なテープを使用して耳耳介の腹側を実体顕微鏡下でそっと固定し、0.6マイクロリットルの再懸濁寄生虫を含む35ゲージの針を備えた10マイクロリットルの注射器を装填します。

次に、針を面取り面を上にして耳の背側の表皮の下に慎重に挿入し、0.15マイクロリットルのスポロゾイトをその部位に注入します。注射部位に特徴的な丘疹が観察されます。先ほど示したように真皮にさらに3回注射した後、テープを慎重に剥がし、完全に回復するまでマウスを監視します。