麻酔ラットにおける脳波および局所電位記録の同時実施

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麻酔をかけたラットを頭蓋骨を露出させた定位固定フレームに固定します。

ラットの頭蓋骨には硬膜が突き刺されたバーホールがあり、首を切開し、ひげパッドに刺激電極が取り付けられています。

電性ペーストを塗った脳波(EEG)スパイダー電極を頭蓋骨に固定し、バリ穴をきれいに保ちます。

クモ電極は表面脳波を測定し、その下の皮質領域からの全体的なニューロン活動を反映します。

線形マルチチャンネル微小電極をマイクロマニピュレーターに取り付けます。

微小電極をバリ穴から大脳皮質に1500マイクロメートルの深さまで挿入します。

微小電極は、皮質ニューロンの活動を反映する局所電界電位(LFP)を測定します。

EEGおよびLFP参照電極を首の切開の内側に配置します。

記録電極と基準電極を、データ収集ユニットにリンクされたプリアンプに接続します。

ウィスカーパッドに電気刺激を加え、微小電極の深さを調整して、誘発されたLFP振幅を最大化します。共局在したEEG信号とLFP信号を記録します。

この手順では、綿棒を使用してバリ穴の周囲の頭蓋骨をきれいにし、乾燥させます。導電性EEGペーストをEEGスパイダー電極の平らな面に慎重に塗布します。スパイダー電極にEEGペーストのない小さな穴を残して、ペーストとスパイダー電極に接触せずに多層微小電極が穴を通過できるようにします。

スパイダー電極を頭蓋骨のバリ穴に合わせ、脳波ペーストを頭蓋骨に向けます。スパイダー電極を頭蓋骨に慎重に押し付け、EEG ペーストを介して頭蓋骨にしっかりと接触させます。

シリンジの針を使用してバリ穴を覆い隠しているペーストを取り除き、スパイダー電極の周囲を超えて過剰なEEGペーストを取り除くことで、スパイダー電極と頭蓋骨の間の接触が空間的に電極のサイズに制限されます。次に、EEGの参照電極にEEGペーストを塗り、ラットの首の後ろの切開部の内側にしっかりと置きます。

次に、低インピーダンス信号用のパッシブ信号スプリッターを介してEEG電極をプリアンプに接続します。この段階で、EEG プローブの抵抗をテストして、5 キロオーム未満であることを確認します。そうでない場合は、脳波ペーストを追加し、スパイダー電極が頭蓋骨にしっかりと接触していることを確認してください。

いて、マイクロマニピュレーターアームを定位フレームに取り付けます。線形16チャンネル微小電極を、マイクロマニピュレーターアームにしっかりとクリップされた16チャンネルの急性ヘッドステージに接続します。次に、微小電極の参照電極に脳波ペーストを塗り、脳波の参照電極の隣の切開部内にしっかりと配置します。マイクロマニピュレーターアームの角度を調整して、微小電極が皮質表面に対して垂直になるようにします。

次に、微小電極の先端がバリ穴の底にある小さな開口部に向けられるように、最上部の電極が皮質表面を貫通するまで、顕微鏡下で微小電極を下げます。微小電極を硬膜の表面に押し付けると電極が破損するため、

注意が必要です。

微小電極を皮質表面の深さ1500マイクロメートルに挿入します。ひげパッドに一連の刺激を加え、PCモニターで16チャンネルの誘発LFPを観察することにより、深さを微調整します。誘発されたLFPの最高振幅が発生するまで、マイクロマニピュレーターのz軸ノブを慎重に回します。

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最終更新:1 8月 2026