JoVE 実験百科事典
神経科学
0 回視聴 • 2:58 分 • July 8th, 2025
覚醒したマウスを定位フレームに固定し、硬膜に銀線を挿入し、聴覚刺激を処理する脳領域を露出させる開口
部を開けます。タングステン電極を取り付けたマルチバレルガラスピペットに薬液を充填し、定位フレームホルダーに取り付けます。
コーティングされていない銀線をバレルに挿入し、一方の端が溶液に接触し、もう一方の端が薬物放出を制御するデバイスに接続されるようにします。
記録線のプラス端子とアース端子を、それぞれ硬膜に接触するタングステン電極と銀線に接続します。
マルチバレル電極を脳表面に置き、聴覚刺激を加えます。
ニューロンの活動を記録します。
次に、正の電流を流して薬剤を放出します。
この薬は脳に入り、特定の受容体を遮断し、抑制性神経伝達物質の結合を防ぎ、神経細胞の興奮性を高めます。
最後に、聴覚刺激を再度適用し、薬物治療後のニューロン反応の増加を特定します。
この手順では、動物の体を特注のフォームクッション付き拘束具に入れます。ヘッドポストを定位固定フレームに取り付けられたホルダーに固定します。これは動物に液体の報酬を与える良い機会です。次に、動物の体を綿の毛布で覆い、プラスチック製の半円筒と粘着テープを使用してゆるく固定します。
先端が柔軟な注射器を使用して、選択した薬剤をバレルに充填します。マイクロマニピュレーターを使用して、マルチバレル電極をホルダーに置きます。次に、コーティングされていない銀線を各バレルの内側に置き、一方の端が溶液に接触し、もう一方の端がアクセスできるようにします。次に、それらの端をマイクロイオン導入装置に接続します。
その後、プラス端子をタングステン電極の端に接続し、アース端子を硬膜に接触する銀線に接続します。続いて、先端が脳の表面に接触するまでマルチバレル電極を動かします。脳組織の乾燥を防ぐために、温かい滅菌生理食塩水を塗布します。その時点で、保持電流を印加して、バレルの先端からの薬剤の漏れを防ぎ、単一ユニットの活性を探します。ガバジンの神経活動とイオン導入の適用を記録します。