揮発性臭気物質に応答したショウジョウバエSensillaの電気生理学的記録

生きたショウジョウバエを頭を露出させ、触角を粘着テープに貼り付け、保持棒で固定したチューブに取り付けます。

乾燥を防ぐために、加湿空気の一定の流れの下に調製剤を保管してください。

参照電極を口器を保護する支持構造であるクリペウスに挿入し、循環器系に到達します。

記録電極を昆虫の感覚器官である感覚器の近くに置きます。

感器のベースに電極を挿入します。

特定のスパイクで信号を記録して、嗅覚受容体ニューロンの近くの正しい電極位置を確認します。

試験臭気剤の入ったカートリッジをデリバリーチューブに接続します。

ハエのアンテナに向けてチューブを配置し、電極からの高さと距離を調整します。

ソフトウェアを使用して、臭気の流量と投与量を設定し、臭気剤を放出します。

次に、電気信号を記録して、匂い物質に対するハエのニューロン反応を捉えます。

記録を取るには、参照電極を迅速かつスムーズな動きでクリペウスに挿入します。血リンパと接触するキューティクルのすぐ下に置きます。次に、記録電極がターゲット感覚と同じ視野面に入るまでゆっくりと下げます。次に、記録電極を感覚器ベースに挿入します。

続行する前に、信号対雑音比が高く、at4Aおよびat4Cニューロンから識別可能なスパイクがあることを確認してください。at4Aニューロンは20ヘルツ以下の速度で発火する必要があります。

次に、カートリッジを臭気剤デリバリーチューブに接続します。この場合、パルミトレイン酸カートリッジが取り付けられています。次に、マイクロマニピュレーターを使用して、カートリッジをヘッドに向けて準備に向かって操作します。カートリッジの先端を約4ミリメートルの距離からアンテナに直接向けるように配置します。カートリッジもスライドから約1ミリメートル上にある必要があります。

カートリッジは、電極とスライドで密接に接している場合があります。理想的には、どちらかの電極から少なくとも 4 ミリメートル離れている必要があります。刺激には、臭気フローコントローラーを500ミリ秒のバーストに設定し、毎分500ミリリットルの流量を使用します。刺激がバーストするたびに、電気的活動を 10 秒間記録します。