経皮的精巣上体精子の吸引とプロセシングの技術

0 閲覧数6:41 • January 15th, 2026

精液に男性の配偶子または精子が欠けている状態である無精子症の男性患者から始めます。

生殖器領域を消毒し、ドレープで覆い、精子を生成する睾丸を収容する器官である陰嚢のみを露出させます。

その領域を照らし、精子の成熟と貯蔵を担う構造である精巣上体を特定します。

配偶子専用の培養液を含む注射器を精巣上体組織に挿入します。

組織に穴を開けながら負圧を加え、精子を含む精巣上体液を抽出します。

精子の生存率を維持するために、採取した液体を培養液の入った皿に移します。

顕微鏡を使用して、運動性を示す成熟した健康な精子を数えます。

溶液をチューブに移し、遠心分離して精子を分離し、上清を除去します。

細胞を新鮮な培養液に再懸濁します。

分離

された精子は、不妊治療手順に使用する準備が整いました。

まず、手術器具のパッケージ、注射器 2 本、消毒液、滅菌ゴム手袋、粘着包帯を集めます。高圧蒸気滅菌を施した手術器具パッケージの損傷を調べます。パッケージを器具テーブルに置き、外層を開きます。次に、アンドロロジストに滅菌ゴム手袋を着用してもらいます。

手術器具パッケージの内層を開け、滅菌インジケーターテープが適切に滅菌されているかどうかを確認してください。次に、麻酔と手術用に 0.7 ミリリットルの針を備えた 5 ミリリットルの注射器を 2 本用意します。リドカイン注射を含む膨大部を開きます。5ミリリットルの滅菌注射器を使用してリドカイン溶液を吸引し、注射器から気泡を取り除きます。

次に、準備した患者を手術台に砕石姿勢で置きます。ズボンを脱いだ後、上着をおへその上を固定し、おへその下の会陰と下腹部を完全に露出させます。次に、影のないランプの角度を調整して、患者の陰嚢を照らします。

楕円形の鉗子を使用して、滅菌ガーゼボールをつかみます。ガーゼボールを消毒液に完全に浸します。そして、下腹部から始めて、太ももの前部と内側、会陰部、陰茎、陰嚢に向かって皮膚を消毒します。次に、患者のお尻の下に滅菌した四角いタオルを置きます。滅菌ホールドタオルを手術部位の周りに広げ、陰嚢全体を完全に露出させます。

滅菌パスツールピペットを使用して、約2ミリリットルのG-MPOS-PLUS培養液を培養皿に移します。ふたを閉めた後、転写窓から手術室の看護師に皿を届けます。次に、培養皿を器具テーブルの滅菌タオルの上に置き、蓋を開けます。

さらに5ミリリットルのシリンジを使用して、約0.2ミリリットルのG-MPOS-PLUS培養液を吸引し、気泡を取り除きます。次に、左手で患者の陰嚢を持ち、穿刺が必要な精巣上体を固定します。右手で精巣上体を触診し、外科的穿刺位置を確認します。

次に、G-MPOS-PLUS培養液を含む5ミリリットルの注射器を右手に持って、精巣上体組織に皮膚に対して垂直に穿刺します。陰圧を維持しながら、精巣上体組織に繰り返し穴を開けて体液が針に入るようにしてから、穿刺針を引き抜きます。

抽出した精巣上体液を培養皿に注入します。その後、近くのG-MPOS-PLUS培養液を吸引してシリンジをすすぎ、収集された精巣上体液の量を最大化します。次に、G-MPOS-PLUS培養液と精巣上体液を含む培養皿を移送窓から胚検査技師に移します。

培養皿を倒立光学顕微鏡のステージに置き、固定します。顕微鏡の電源スイッチをオンにし、光の強さを適切に調整します。次に、倒立光学顕微鏡のコンバーターを回転させます。10倍対物レンズを選択し、粗焦点スパイラルと細焦点スパイラルを回転させて焦点距離を調整します。

精巣上体精子を見つけたら、40倍の倍率で観察し、その数と質を評価します。滅菌パスツールピペットを使用して、十分な活性精子を観察した後、培養皿から液体を15ミリリットルの遠心分離管に移します。遠心分離管をバランストレイに置き、滅菌水を入れた同じ仕様の遠心分離管を使用して水平にします。

次に、遠心分離機のドアを開けます。チューブをカードスロットに左右対称に置き、ドアを閉めます。[開始]ボタンを押して、遠心分離プロセスを開始します。プロセスが完了したら、精巣上体液が入ったチューブを遠心分離機から取り出します。次に、滅菌パスツールピペットで上清を穏やかに吸引し、引き出した上清を廃棄します。

滅菌パスツールピペットを使用して、沈殿物を遠心分離管の底から約2ミリリットルのG-IVF Plus培養液を含む新しい遠心分離管に移します。溶液をそっとピペットで移動させ、沈殿物を完全に再懸濁させます。約0.5ミリリットルのG-IVF Plus培養液を遠心分離管に移します。精巣上体の精子を下部にそっと吹き飛ばして完全に浮遊させ、ICSIの施術に使用します。