外傷性脳損傷のマウスモデルにおける鼻腔内間葉系幹細胞送達

外傷性脳損傷を負った麻酔をかけたマウスから始めます。

損傷部位では、軸索の脱髄とニューロンの損傷が炎症誘発性サイトカインの放出を引き起こします。

マウスを固定し、タンパク質分解酵素を鼻腔内に送達します。

次に、マウスを上向きにして短時間置き、酵素送達を繰り返します。

タンパク質分解酵素は、鼻上皮の細胞外マトリックスを分解し、細胞透過性を高めます。

次に、標識間葉系幹細胞、またはMSC溶液を鼻腔内投与します。

早期の排液を防ぎ、MSCが鼻組織に吸収されるようにします。

MSC 配信プロセスを繰り返します。

マウスが回復するまで待ちます。

炎症誘発性サイトカインの走化性シグナルは、MSCを鼻腔から脳損傷部位に移動するように指示します。

損傷部位では、MSC は再ミエリン化を促進する神経栄養因子を分泌します。これは、MSC のニューロン修復に対する神経治療の可能性を浮き彫りにしています。

細胞送達の場合は、つま先をつまんでも反応がないことを確認後、頭蓋骨を固定しながらマウスを首筋にします。PBSのマイクロリットルあたり4単位のヒアルロニダーゼを含むピペットの先端をマウスのネアの近くに45度の角度で置き、3マイクロリットルのヒアルロニダーゼ懸濁液を各鼻孔に投与します。動物を清潔なパッドの上に5分間上向きにしてから、合計100単位のヒアルロニダーゼ治療のために4回治療を繰り返します。

最後の治療後、先ほど示したように、マウスを拘束する前に、マウスをパッドに30分間戻します。頭を固定した状態で、溶液送達ごとに3秒間、3マイクロリットルの間葉系幹細胞懸濁液を各鼻孔に投与し、サンプル滴が完全に消えるまでマウスを30秒間所定の位置に保持します。2分後、間葉系幹細胞の全量が送達されるまで、送達を最大3回繰り返します。次に、完全に横になるまで監視しながらマウスをケージに戻します。