リモートハイスループット表現型解析のためのマウスの目の摘出
2011年11月19日
解剖手法は、ハイスループットスクリーニングで表現型解析を実行するための組織固定のマウス眼球摘出を示しています。
このビデオでは、マウスの目と核形成、または眼窩からの眼球の除去について説明します。眼球は下まぶたの縁で囲まれています。これが内側または鼻の眼角です。
後ろには側頭または外側の眼角があります。上が上まぶたのマージンです。これが外科用標本です。
針は透明な角膜を指しています。レンズが虹彩を少し突き抜けているのが見えます。虹彩は茶色で、レンズを覆っています。
最も重要な外科的ランドマークはこの白い線です、またはリンバスはそのすぐ後ろに穿刺創を作ることになります。地球の後ろ半分は辺縁部の後ろにあり、筋肉の挿入を指しています。ここでは、球体に横たわっている筋肉と、軌道を埋めてアリウス腺を含む結合組織を見ることができます。
そして最後に、これは鈍的解剖からの視神経の白い長いストリップです。鋭い先端でカスタマイズされた湾曲したドレッシング鉗子を使用して、まぶたを引き離すことから始めます。これは、目をトーストして遠ざけるのを支える傾向があります。
鉗子を慎重に使用して眼窩に入り、眼球の後ろに行き、眼球を絞らずに軽く圧縮して前方に引っ張ります。眼球ではなく、結合組織をつかむことができたはずです。眼球を横に向けると、白い視神経と一緒に眼窩組織を見ることができます。
これは、再び眼窩から入り、眼球の後ろの鉗子を押し、結合組織をつかみ、眼球自体を圧迫することなく前方に引っ張ることを示すための2回目の解剖です。ここでも、白い視神経の長い帯に結合組織を見ることができます。穿刺傷を作るには、筋肉の挿入で眼球をつかみ、目を保持している場所のすぐ隣の輪部の後ろに針を挿入して安定させます。
これにより、固定剤が目に入るようになります。目を押さえている場所から遠く離れた場所で穿刺をすると、眼球が非常に不安定になり、目を圧迫したり、過度の圧力をかけたりしない限り、その傷を作るのが難しくなります。また、眼球自体のすぐ後ろにあるすべての結合組織をつかむこともできます。
一部の固定剤は穿刺傷を必要としません。一般的には、少なくとも3ccの固定剤が入った5ccのシンチレーションバイアルに目を入れて、目が水没していることを確認します。豊富な固定動物の場合、鋭い解剖が必要です。
湾曲した口径の鉗子と湾曲したウェスコットハサミを使用しています。キャリバーズレで下蓋をつかみます。ハサミを眼窩骨に挿入し、結合組織の切断を開始します。
目玉から離れてカーブを使用し、サイジングには避けます。どの目も、片方の眼瞼からもう片方の眼瞼まで、下まぶたの縁に沿ってずっと働きます。ある時点で、結合組織のほとんどが取り除かれ、はさみを地球儀の後ろにスライドさせて引き離すことができます。
ここでも別の例を挙げると、ハサミを眼窩に挿入しますが、眼球ではなく眼窩骨に当てて、結合組織を切り取るというものです。これにより、バスケットの中のバスケットボールのような眼球が解放され始めます。鉗子を使ってまぶたを引っ込め、眼球の周りに穏やかなショートカットを作ります。
ここでは、コリブラで結合組織または筋肉の挿入をつかみ、眼窩結合組織から眼球を切り取ります。眼球が適切に固定された後、輸送が必要な場合は、パラフィルムを貼り付けます。私たちはsationバイアルの周り。
パッケージは、大学および政府の規制に準拠している必要があります。通常、これらを綿の入った容器に入れます 液体を捕まえるには、この容器を非常にしっかりと密封する必要があります。この輸送用コンテナは、プチプチ袋に入れられます。
これは、ドキュメントと一緒に液体ラボの輸送パックに入れられます。
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概要
このビデオは、高スループット表現型スクリーニングにおける組織固定に不可欠な、マウスの目の核抜きの技術を説明しています。この手順には、解剖学的ランドマークを明確にするために眼球をその窩から取り除くことが含まれます。
主要な研究要素
科学の分野
- 神経科学
- 生物学
背景
- 核抜きは様々な生物学的研究において重要な技術です。
- 目の解剖学を理解することで、正確な手術手順が可能になります。
- この方法は高スループットスクリーニング応用に不可欠です。
- 正確な表現型解析には適切な組織固定が必要です。
研究の目的
- 教育目的で核抜き技術を実演すること。
- 同様の手順を行う研究者のための視覚的ガイドを提供すること。
- 手術中の解剖学的ランドマークの理解を深めること。
使用された方法
- 核抜きプロセスのビデオ実演。
- マウスの目の主要な解剖学的特徴の識別。
- 手順を実行するための段階的ガイダンス。
- 学習と応用をサポートするための視覚的補助。
主要な結果
- 核抜き技術の明確な視覚化。
- 内側と外側の眼角の識別。
- 核抜き後の外科標本のデモンストレーション。
- 高スループットスクリーニング手順の理解の向上。
結論
- このビデオは研究者にとって効果的な教育ツールとなります。
- 核抜きプロセスの理解は、成功した組織固定にとって重要です。
- 適切な技術は表現型研究の結果を改善することができます。
よくある質問
Executive Industry Relevance
Remote high-throughput phenotyping of mouse eyes enables distributed genetic resource utilization and accelerates discovery of genotype-phenotype correlations in ophthalmic disease models. Standardized enucleation and tissue transfer protocols reduce geographic and operational barriers, supporting scalable, multi-site preclinical research. This approach enhances portfolio-wide access to rare or geographically dispersed transgenic lines for early-stage target validation and phenotypic screening.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Facilitates systematic collection of ocular tissues from diverse genetic backgrounds for hypothesis-driven studies.
- Enables functional validation of candidate genes implicated in ocular development and disease.
- Supports predictive confidence in linking genetic perturbations to phenotypic outcomes.
Screening & Assay Development
- Provides standardized, fixed tissue samples suitable for downstream molecular and morphological assays.
- Improves reproducibility and comparability across multi-site phenotyping screens.
- Enables scalable preparation of samples for high-throughput screening platforms.
Translational & Preclinical Research
- Aligns mouse phenotyping with translational biomarker discovery for human ophthalmic diseases.
- Supports continuity from genetic discovery to preclinical validation of disease mechanisms.
- Reduces logistical barriers to accessing rare or geographically distributed mouse models.
Pipeline & Workflow Integration
This remote enucleation and tissue transfer protocol integrates into the early discovery and preclinical continuum, bridging genetic model generation with centralized phenotyping and analysis.
- Discovery Biology: Enables hypothesis testing and mechanistic de-risking by providing access to diverse genetic models.
- Screening: Standardizes sample preparation for reproducible, quantitative phenotyping assays.
- Analytics: Supports acquisition of morphological and molecular readouts for comparative analysis.
- Translational Research: Facilitates alignment of mouse phenotypes with human disease biomarkers.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable protocol for distributed tissue acquisition across research networks.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in genotype-phenotype associations and target validation.
- Operational Value: Streamlines logistics, standardizes procedures, and enables multi-site scalability.
- Strategic Value: Enhances go/no-go decision-making by broadening access to phenotypic data from rare models.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of genetic targets and disease models.
Implementation Considerations
- Requires surgical proficiency in mouse eye enucleation and tissue handling.
- Needs access to fixation reagents, validated shipping containers, and compliance with shipping regulations.
- Demands cross-site standardization of collection and documentation protocols.
- Adaptable to both unfixed and perfusion-fixed tissue workflows as supported by the protocol.
- Dependent on institutional and governmental guidelines for biological sample transport.
