Name: カラー染料を使用して単一絨毛膜性の胎盤における血管吻合の正確かつ簡単に評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-09-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 52 s
Description: 学ぶ カラー染料注入法による単一絨毛膜性胎盤の血管吻合評価。TTTSやTAPSなどの双胎間輸血症候群の病態理解と臨床評価プロトコルの確立に有用です。

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1。出産時の胎盤の準備<ol><li>もの（長子の場合）または2（セカンド生まれ用）クランプを持つ双子のへその緒にラベルを付けます。 </li><li>完全性や混乱のための胎盤の母体と胎児の表面を点検。 </li><li>コー​​ドの挿入（、中央の偏心、限界や卵膜）、臍帯の血管の数（通常は1静脈と時には2動脈、唯一の動脈）との両方胎盤株式の間に色差のタイプ：次のデータを記録する。割っ膜のセクションは、chorionicityの種類を確認するために病理に送信することができます。 </li><li>胎盤は、プラスチック製のボウルに入れて最終試験（最高の一週間以内）と色の染料を注入するまで冷蔵することができます。 </li><li>胎盤は、（ホルマリンは使用しないでください）​​凍結または固定されてはならない。 </li></ol> 2。臍血管のカテーテル<ol><li>暖かい水または生理食塩水で胎盤を洗ってください。 </li><li>末梢膜をトリミング、amnions（血管吻合と胎盤の写真のより良い品質の良い視覚化のための）オフ間ツイン割っ膜と皮を取り除く。 </li><li>コー​​ドの挿入から約5 cmの距離でそれぞれのへその緒を横に切断する。 </li><li>ゆっくりと臍帯血管と胎盤の血管から血の塊を絞り出す。 </li><li>臍静脈は2つの臍動脈のより小さい直径に比べて、その大きな直径のために識別するために、通常は簡単です。 </li><li>適切なサイズのカテーテルと臍静脈のカニューレを挿入する。偽の通路を避けてください。 </li><li>小さなカテーテルを使用すると、ワン臍動脈をカニューレを挿入する。臍動脈の内腔を広げるためにピンセットを使用してください。偽の通路を避けてください。わずか2臍動脈の一つが吻合ので、カテーテルを挿入する必要がある（ヒルトルの）コードの挿入近くに2動脈を接続します。 </li><li>他の臍帯のための手順の両方を繰り返します。 </li><li>カテーテルの配置は、臍帯血管の穏やか前後にマッサージによって促進することができます。カテーテルの任意のタイプは、この手順のために使用することができます。我々は（とリサイクル）新生児の臍カテーテル挿入のための私達の新生児病棟で使用されるカテーテルを使用することを選択。 </li><li>色素注入中に着色された染料の流れをバック避けるために、両方のコードの周りにテープの一部を接続します。 </li></ol> 3。色の染料と注入<ol><li>それぞれのカテーテルへの着色された染料を充填した20 mlの注射器を接続してください。 </li><li>任意の粘性色染料は血管アーキテクチャ胎盤を視覚化するために使用することができます。吻合（動脈のための暗い色、静脈のための明るい色）の良好な可視化を可能にするために対照的な色を使用してください。 </li><li>アシスタントが優しくも、すべて胎盤血管、最小のものを埋めるために色の染料を可能にするために染料を押している間は静かに（低気圧による）静脈の色の色素を注入する。 </li><li>血管の赤道近くにある小さな血管（血管赤道のいずれかツインの吻合が相互に接続する場所です）に特に注意してください。 </li><li>動脈に着色された染料を注入する前の手順を繰り返します。注目すべきは：動脈はより多くの忍耐を注入し、必要とするより難しいかもしれません。 </li><li>他の臍帯のための手順の両方を繰り返します。 </li></ol> 4。着色された染料の注入後の胎盤の評価および文書<ol><li>慎重に血管赤道を調査し、吻合の数と種類を記録。 </li><li>デジタル画像上で直径と胎盤株式を測定するため胎盤に巻き尺を置きます。 </li><li>高解像度のデジタルカメラを使用し、注入された胎盤の写真を撮る。写真は胎盤に垂直に取られていることを確認します。 </li></ol> 5。代表的な結果： 単一絨毛膜性の双子の血管アーキテクチャ胎盤は、単一絨毛膜性の双胎妊娠の種類によって異なります。注入の研究では、AA、AVおよびVV吻合がそれぞれ80％、95％、合併症のない単一絨毛膜性の双子妊娠1（図1）の20％に存在することを明らかにした。 AAの吻合は、TTTSとTAPS 6の開発から保護するために考えられている。注射の研究では、AAの吻合がTTTS胎盤のわずか20％とTAPS胎盤1,2,7（図2）の10％で発生することが示されている。 fetoscopicレーザー手術で治療TTTSの胎盤では、血管吻合のレーザーの凝固によって引き起こされる傷跡は胎盤表面（図3および4）で見ることができます。 TAPSの胎盤は、わずか数極小のAVの吻合2（図5）の存在によって特徴付けられる。ドナーの胎盤シェアは（図6）を淡であるのに対し、TAPSの受信者の胎盤シェアは、しばしば多血です。出生時体重の不一致による単一絨毛膜性の双子妊娠、成長制限された胎児の多くの場合、被膜のコードの挿入とはるかに小さい胎盤シェア（図7）があります。 AAの吻合は、出生時体重の不一致8の双生児から単一絨毛膜性の胎盤でしばしば存在する。単一絨毛膜性の- monoamniotic胎盤は、両方のコードの挿入（図8）との間の短い距離で特徴的な血管のアーキテクチャを持っている。 monoamniotic -単一絨毛膜性の胎盤におけるAA吻合の発生率はほぼ100％であるとmonoamniotic双子9 TTTSの発症を予防する。この記事の図では、色の染料で私達の中心に注入された単一絨毛膜性の胎盤の特徴的所見を示す。我々は日常的に動脈と静脈のための明るい色（黄色、ピンクまたはオレンジ色）のために暗い色（青または緑）を使用してください。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図1"> 図1。青動脈から黄色の静脈への緑の動脈からピンク静脈（白い星）にいくつかのAV吻合を示す通常の、合併症を伴わない単一絨毛膜性の双胎妊娠から単一絨毛膜性の胎盤、いくつかのVA吻合（緑の星）とで識別される1大規模なAA吻合（青と​​緑の色素の混合、ブルースター）。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図2"> AAの吻合なしだけのAV（白い星）とVA（緑の星）吻合の存在を示すシリアルamnioreductionで治療TTTSの妊娠で2単一絨毛膜性の胎盤図 。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図3"> 小さ ​​な残留吻合が誤って特許（ホワイトスター）残された選択的なレーザー技術を使用して血管吻合のfetoscopicレーザー凝固後の図3。TTTS胎盤を。選択的レーザー技術で、血管吻合は、最初に同定され、その後、一つずつを凝固されています。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図4"> 図4。TTTS胎盤、個々吻合の同定と凝固した後、完全な血管の赤道は、片方の胎盤マージンから凝固されているソロモンの技法を使用してfetoscopicレーザー凝固の後に。 <img alt="図5" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig5.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図5"> 図5。わずか、ほんのわずかなVAの吻合（白い星）は血管の赤道に沿って表示されているTAPS胎盤。 <img alt="図6" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig6.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図6"> 図6。TAPS胎盤の母体側（図5に示すように）両方胎盤株式の間に特徴的な色の違いを示しています。 <img alt="図7" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig7.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図7"> 図7。ツインサイズの選択的子宮内発育制限と双胎妊娠の単一絨毛膜性の胎盤。成長制限された胎児は、被膜のコードの挿入とはるかに小さい胎盤を共有しています。白い星は、AA吻合を示している。 <img alt="図8" src="/files/ftp_upload/3208/3208fig8.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="図8"> 図8 Monoamniotic胎盤：様々なAV（グリーンスター）、VA（ブルースター）と2 AA吻合（白い星）、および両方のコードの挿入との間の短い距離に注意してください。

<ol><li>Lopriore, E., Middeldorp, J. M., Sueters, M., Vandenbussche, F. P., Walther, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twin-to-twin+transfusion+syndrome%3A+from+placental+anastomoses+to+long-term+neurodevelopmental+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Pediatr.+Rev%22%5BJournal%5D)">Twin-to-twin transfusion syndrome: from placental anastomoses to long-term neurodevelopmental outcome.</a> Curr. Pediatr. Rev. 1, 191-203 (2005).</li>
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</ol>

利害の衝突は宣言されません。

TTTSとTAPSは、単一絨毛膜性の双子で発生することができる2つの深刻な疾患である。両疾患は、アンバランスintertwinの血流を引き起こすAV吻合によるものです。最後の20年間で、fetoscopicレーザー手術が可能となり、TTTS 10の治療のための最善の方法であることが示された。 fetoscopicレーザー治療の目的は、胎盤表面の血管吻合の凝固を通じて相互双子の循環を中断することです。しかし、TTTSに対するレーザー治療は完璧にはほど遠いです。レーザーによる治療は、子宮内胎児死亡、TTTSおよびTAPSの1,4の再発を含むいくつかの合併症につながる可能性があります。これらの合併症は、誤ってレーザー手術4の間に特許を左残留吻合に起因することができます。詳細な出生後の注入の研究では、レーザー手術にもかかわらず、胎盤の最大33％が一つ以上の残留吻合3,5を持っていることが示されている。ほとんどの残余吻合が（直径&lt;1 mm）の極めて小さいバスは、このように胎児鏡検査中に見逃されることがある。問題に対する可能な解決策...

<table border="1"><tbody><tr><th>試薬の名前</th><th>会社</th><th>カタログ番号</th><th>コメント</th></tr><tr><td>臍カテーテル（様々な大きさ、長さ40センチ） </td><td> Vygon </td><td> 1270.08（8 F）1270.08（5 F）1270.04（4 F）1270.03（3.5 F）1270.02（2.5 F） </td><td>カテーテルの任意のタイプを使用することができます。 </td></tr><tr><td> 20ミリリットル注射器</td><td> BD Plastipak </td><td> 300613 </td><td></td></tr><tr><td>色染料（異なる色） </td><td>ロイヤルTalens Schoolverf </td><td> 36716010（青）36715010（緑）36712350（黄）36713570（ピンク） </td><td>任意の粘性カラー染料を使用することができます。 </td></tr></tbody></table>

カラー染料を使用して単一絨毛膜性の胎盤における血管吻合の正確かつ簡単に評価

Accurate and Simple Evaluation of Vascular Anastomoses in Monochorionic Placenta using Colored Dye

胎盤血管吻合の存在は、conditio必須条件双胎児間輸血症候群（TTTS）と双子の貧血の赤血球増加症のシーケンス（TAPS）1,2の開発のためです。双子の胎盤の注入の研究では、このような吻合がdichorionic双子1でほとんど常に単一絨毛膜性の双子に存在すると極めて稀であることが示されている。吻合の3つのタイプが文書化されています：動脈から動脈に、静脈から静脈へと動脈から静脈へ。動静脈（AV）吻合は単方向であり、動静脈（AA）と静脈静脈（VV）吻合が双方向であると呼ばれるのに対し、彼らは、共有胎盤葉を進めますので、&quot;深い&quot;吻合と呼ばれています彼らは絨毛膜板上にあるので、として、&quot;表面的&quot;。 TTTSおよびTAPSの両方がAV吻合による双子の間に血流の正味の不均衡によって引き起こされます。ツイン（ドナー）からの血液は、共有胎盤葉に動脈を通ってポンプで、その後他の双子（受信者）の循環に静脈を通じて排出される。血液が逆向きの深いAV吻合を介して、または表面の吻合を介して受信者からドナーに戻って励起されていない限り、血液量の不均衡は徐々にTTTSまたはTAPSの開発につながる、発生します。 AAの吻合の存在は、単方向のAV吻合の1,2によって引き起こされる循環の不均衡を補償することによってTTTSとTAPSの開発から保護することが示されている。単一絨毛膜性の胎盤の注射は、生後間もなく単一絨毛膜性の双子の様々な（血液学）合併症の病因を理解するために有用な平均値であり、TAPS 2の診断に到達するために必要なテストです。さらに、fetoscopicレーザー手術で治療TTTSの胎盤の注入が可能残留吻合3-5の識別が可能になります。この追加情報は、TTTSやTAPSを持つ単一絨毛膜性の双子の管理とケアに関わるすべてのperinatologistsのための極めて重要である。いくつかの胎盤注射の技術は、現在使用されています。我々は、正確に着色された染料の注入を使用して（残留）血管吻合の存在を評価するための単純なプロトコルを提供します。

双胎児間輸血症候群とツイン貧血の赤血球増加症のシーケンスは、周産期医療の2つの潜在的に壊滅的な問題です。両疾患は、単一絨毛膜性の双子や胎盤の血管吻合を介して不平衡血流からの結果で発生する。我々は正確に出産後の胎盤血管の色の色素注入を用いた血管吻合の存在を評価するための単純なプロトコルを提供します。

胎盤血管吻合の存在は、双胎間輸血症候群（TTTS）および双胎間貧血の発生における必須条件（conditio sine qua non）であり...

本実験の目的は、血管吻合部へのカラー染料注入を用いて、一絨毛膜胎盤の血管構造を解析することである。採取後、まず胎盤の洗浄とトリミングを行い、次に臍帯血管にカテーテルを挿入する。次に、血管吻合の数、形態、およびサイズを実証するために、カテーテルを通じて次色の染料を注入します。最終的に、単絨毛膜胎盤に見られるさまざまな血管吻合パターンをDY血管内で特定することができます。この手法により、双胎間輸血症候群（TTTS）に関する知見を得ることが可能です。また、双胎間輸血症候群（TAPS）、双胎間貧血、多血症配列、あるいは選択的子宮内発育制限などの、その他の単絨毛膜双胎胎盤に関する重要な情報を提供することも可能です。一般的に、この手法に不慣れな方は、臍帯血管へのカテーテル挿入に専門的な技術と一定の習熟期間を要するため、苦労されるかと思います。ここでは、当センターの胎児治療専門の同僚と共に、この手順を実演します。胎盤の母体面および胎児面を観察し、欠損や破綻がないかを確認します。分界膜の一部を病理検査に提出することがあります。絨毛膜下血腫のタイプを確認するため、胎盤をプラスチック容器に入れ、最終検査まで最大1週間冷蔵保存することが可能です。その後、染色剤を注入し、胎盤を温水で洗浄します。次に、末梢の膜を切り揃えます。相互に絡み合った分界面を取り除き、羊膜を剥がします。次に、臍帯の挿入部位から約5cmのところで、それぞれの臍帯を切断します。臍帯および胎盤血管から血凝塊をそっと絞り出し、その後、臍静脈を特定します。カニュレーションとその後のD注入はこの手順の中で最も困難な工程です。正確な注入には、注意と忍耐が必要です。乱暴な取り扱いは、特にカテーテル挿入時に、血管外への染料の漏出を招く可能性があります。染料の拡散を促進するため、1人が注入を行い、もう1人が染料を血管内へ優しくマッサージするように押し込むことを推奨します。ピンセットを使用して偽腔の形成を避けながら、適切なサイズのカテーテルで臍静脈にカニュレーションを行います。その後、動脈の内腔を広げます。同様に、偽腔への挿入を避けてください。次に、より細いカテーテルを用いて一方の臍動脈にカニュレーションを行います。もう一方の臍帯についても、これら両方のカニュレーションの手順を繰り返します。臍帯血管を優しく前後にマッサージして、カテーテルの挿入を容易にします。次に、色素注入時の逆流を防ぐため、両方の臍帯にテープを巻き付けます。開始前に、対照的な色の色素を満たした20 milliliterシリンジを2本用意します。次に、1本の臍帯の臍静脈カテーテルに1本のシリンジを、臍動脈カテーテルに別の1本のシリンジを装着します。その後、低圧で染料を臍静脈にゆっくりと注入し、同時に助手にも静脈内へ染料をゆっくりと押し込んでもらいます。染料をすべて

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出産後の単一絨毛膜性の（MC）ツイン胎盤の血管マッピングは、双子の循環の間に血管の接続の詳細なデモンストレーションのための手段を提供します。これらの接続の不均衡は、双胎児間輸血症候群を含むMC双晶の合併症の発症に極めて重要な役割を果たすと考えられている。...

単一絨毛膜性のツイン胎盤の血管のマッピングのためのガイドワイヤ補助カテーテルと有色色素注入

げっ歯類の脳の解剖学的構造の分析は、実験的な脳卒中の研究に重要な役割を果たしている。この文脈において、着色ラテックスと血管内血流は数年のための標準ツールとして考えられてきた。しかし、この技術は、その再現性を弱体化させる明確な技術的な限界を意味しています。ここでは、再現可能な方法で脳の血管を可視化するための簡単​​な方法を説明します。高コントラストの可視化と脳血管の適切な充填における左心室の心筋の結果を介して2つの市販のカーボンブラックインクの混合物の注入。我々は、正常に異なる遺伝的背景をもつマウスの脳血管地域間吻合のポイントを識別するためにこの手法を適用している。マウスでの梗塞体積を観察し、分析するための広く使用されているツール -...

カーボンブラックインクの血管内灌流は脳血管の信頼性の高い可視化を可能に

このプロトコルは、マウスの妊娠中の母体血管系の変化を評価する技術を説明しています。立体法を用いて脱落膜螺旋動脈のリモデリングを定量的に評価し、その結果を免疫組織化学を用いて定性的に確認する。...

マウス子宮内妊娠中の母体の血管リモデリングの評価

このプロトコルは、脈管構造を視覚化し、 Xenopus tropicalisにおけるその複雑性を定量化する蛍光ベースの方法を実証する。インビボでの心臓血管発達を研究するために、遺伝的および/または薬理学的操作の後、胚の拍動する心臓に蛍光色素を注入した後、数分後に血管を撮像することができる。...

の胚性血管新生の可視化と定量分析<em&gt;ツメガエル</em

我々は、期間中にインビボでヒト胎盤生理学を研究するための詳細な方法を提示する。本方法は、胎盤の母体側および胎児側の入ってくる血管および出る血管から採取した血液採取と、体積血流および胎盤組織サンプリングの超音波測定とを組み合わせる。...

ヒト胎盤生理学の統合研究への4容器サンプリングアプローチ<em&gt;インビボ</em

生体内でイメージ投射 Sprague-dawley ラットの霊長類脊髄損傷脊髄血管変化を追跡する 2...

In Vivoデュオ カラー霊長類脊髄損傷血管動態のイメージング手法

本研究は、リバーシブルの組織免疫染色、3 D レンダリングやひと胎盤絨毛サンプル 1-2...

三次元レンダリングとカルビンディン抗体、解析人間の胎盤絨毛血管のネットワークを明らかにしました。

リアルなモデルでの吻合は今みなされるこのプロシージャに関連付けられた急な学習曲線を克服するために経験の少ない外科医を助けることができる monochorionic...

リアルなシミュレータを使用した Monochorionic Diamniotic ツイン胎盤の胎児レーザー光凝固でモデル手術トレーニング: スキルの習得

げっ歯類胎盤の Ex 生体灌流

我々は、フルオレセイン系蛍光ビデオ血管造影(FVA)を用いて、ラットおよびウサギにおける側壁動脈瘤の動脈瘤灌流および血管透過性を効率的に評価するためのプロトコルを提示する。92.6%の肯定的な予測値によって、それは特別な装置が必要としないで、簡単だが非常に有効で経済的な方法である。...

ラットおよびウサギ動脈瘤モデルにおける動脈瘤灌流および親動脈の知覚の評価のための蛍光血管造影

学ぶ カラー染料注入法による単一絨毛膜性胎盤の血管吻合評価。TTTSやTAPSなどの双胎間輸血症候群の病態理解と臨床評価プロトコルの確立に有用です。

カラー染料を使用して単一絨毛膜性の胎盤における血管吻合の正確かつ簡単に評価

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