Name: ラット脊髄損傷後の急性および慢性の触覚官能検査 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: 学ぶラットの脊髄損傷後の急性・慢性期における触覚感覚検査法。Von Fryモノフィラメントを用いた2つの検査手法で、触覚閾値の変化を定量化し、アロディニアの評価に有効です。

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NIH NS43798（DMB）、NIH F31 NS058138（MRD）P30-NS045758（CBSCR）、およびアメリカの麻痺退役軍人＃2451（DMB）と＃2707（MRD）。

<ol><li>Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+symptom+profiles+in+persons+with+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Med%22%5BJournal%5D)">Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury.</a> Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).</li>
<li>Hulsebosch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+discovery+to+clinical+trials%3A+treatment+strategies+for+central+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Pharm.+Des%22%5BJournal%5D)">From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury.</a> Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).</li>
<li>Kloos, A. D., Fisher, L. C., Detloff, M. R., Hassenzahl, D. L., Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stepwise+motor+and+all-or-none+sensory+recovery+is+associated+with+nonlinear+sparing+after+incremental+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).</li>
<li>Detloff, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+activation+of+microglia+and+pro-inflammatory+cytokines+predict+the+onset+and+severity+of+below-level+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Remote activation of microglia and pro-inflammatory cytokines predict the onset and severity of below-level neuropathic pain after spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 212, 337-347 (2008).</li>
<li>Detloff, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+acute+and+chronic+tactile+sensory+testing+after+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Validity of acute and chronic tactile sensory testing after spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 225, 366-376 (2010).</li>
<li>Hutchinson, K. J., Gomez-Pinilla, F., Crowe, M. J., Ying, Z., Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+exercise+paradigms+differentially+improve+sensory+recovery+after+spinal+cord+contusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Three exercise paradigms differentially improve sensory recovery after spinal cord contusion in rats.</a> Brain. 127, 1403-1414 (2004).</li>
<li>Carlton, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+and+central+sensitization+in+remote+spinal+cord+regions+contribute+to+central+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral and central sensitization in remote spinal cord regions contribute to central neuropathic pain after spinal cord injury.</a> Pain. 147, 265-276 (2009).</li>
<li>Lindsey, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+changes+in+sensory+thresholds+to+mild+tactile+and+cold+stimuli+after+experimental+spinal+cord+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurorehabil.+Neural+Repair%22%5BJournal%5D)">An analysis of changes in sensory thresholds to mild tactile and cold stimuli after experimental spinal cord injury in the rat.</a> Neurorehabil. Neural Repair. 14, 287-300 (2000).</li>
<li>Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+testing+after+spinal+cord+injury%3A+congruities%2C+complexities%2C+and+controversies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Behavioral testing after spinal cord injury: congruities, complexities, and controversies.</a> J. Neurotrauma. 21, 395-404 (2004).</li>
<li>Langford, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312, 1967-1970 (2006).</li>
</ol>

著者らは、開示することは何もありません。

VFH試験方法は、機密およびラットSCIモデルで使用するために有効な2つのテストのパラダイムを表してここに発表した。重要なのは、背VFH試験はラットは、その後半部に立つことができないときに急性半ば胸部SCI後の後肢の触覚の回復の評価のために作成されました。ラットは自分の体重をサポートし、子宮頸部SCI後の後肢のためにする能力を取り戻すときに、このテストのパラダイムを使用することもできます。 2つのパラダイムは、ここでそれぞれの後足の触覚閾値を決定するためにキャリブレーションVFHを利用して実証した。他の方法は、通常は無害または正常に有害な刺激のいずれにも撤退の周波数を決定します。我々は以前触覚閾値の小さな改良は、慢性神経因性疼痛と正常な触感の存在の違いを表すことができることが示されている。したがって、痛みのしきい値05、FAを導出する実験的な試験方法を活用潜在的な治療介入の診療所への変換をcilitate。 すべての行動試験と同様に、行動試験9の結果に影響を与える可能性があり、テスト環境内の交絡因子の...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント </td></tr><tr><td>セムズ - ワインスタインモノフィラメント</td><td> CoをStoelting </td><td> 58011 </td><td></td></tr><tr><td>魚のブリーダーボックス</td><td>アクアリウム用品店</td><td></td><td>穀物の配信のために側にドリル穴</td></tr><tr><td>上昇した金網（1/4 &quot;X 1/4&quot;グリッド） </td><td>金物店</td><td></td><td></td></tr><tr><td>代わりに、魚のブリーダーボックスを保持する弾性</td><td>クラフトショップ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>砂糖穀物</td><td>食料品店</td><td></td><td></td></tr><tr><td>手術ハックタオル16 &quot;×23&quot; </td><td>メディカルサプライストア</td><td></td><td></td></tr></tbody></table><pクラス= &quot;jove_content&quot;&gt;

ラット脊髄損傷後の急性および慢性の触覚官能検査

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

脊髄損傷（SCI）は、異痛症1-8を引き起こす感覚系を損なう。異痛症の細胞および分子の原因を識別するために、ラットSCIモデルの高感度かつ有効な官能検査が必要になります。しかし、最近まで、単一のテストのアプローチは、標準化されたメソッドがラボ全体に実装されていないように、SCIに検証されていなかった。また、使用可能な試験方法は、急性実装することができませんでしたか、重度の運動障害が存在する場合には、SCI-誘発アロディニア3の開発の研究を防ぐことができます。ここでは、SCI 4月5日後の触覚感覚閾値の変化を定量化·フォン·フレイヘア（VFH）モノフィラメントを使用して、2つの検証官能検査の方法を提示します。つのテストでは、慢性的に5をテストして別のSCIの重大度にわたって高い感度と特異性を示して定評のあるアップダウンテストです。他のテストでは、SCI後の急性適用することができる新開発の背VFHテストですllodyniaは、モータの回復4-5〜の前に、開発しています。それは曲がるまで後肢の皮膚に触れたとき、各VFHモノフィラメントは、キャリブレーション力を適用します。アップダウン方式では、上位または下位の力の交互VFHsは屈筋の撤退のしきい値を区切るために足底の皮膚分節L5で使用されます。連続的により高い軍は撤退が発生するまで撤退が終了するまで、下位の力VFHsが使用されて適用されます。触覚の閾値は、刺激の50％に撤退を引き出すために必要な力を反映しています。ラットは、審査官によってサポートされていながら、新しいテストでは、各VFHは足背L5皮膚分節に適用されます。 VFH刺激は与えられた力で少なくとも2 3のアプリケーションまで、力の昇順で発生した足の撤退を生成します。触覚感覚閾値は時間の撤退66％を引き出すための最低の力である。順化、テストおよびスコアリング手順が説明されています。再検査と典型的な臨床試験を必要とする異常な試験が定義されています。動物の使用ワットとしてオハイオ州立大学動物のケアおよび使用委員会によって承認されました。

我々は、ラットの脊髄損傷の急性または慢性期には2つの触覚感覚のテスト方法について説明します。これらの検証の手順は、異痛症のような感覚の開発と保守を検出することができます。

脊髄損傷（SCI）は感覚系に障害を及ぼし、アロディニア（異痛症）を引き起こします1-8。アロディニアの細胞および分子レベルでの原因を特定するためには、感度が高く妥当な感覚……

本手順の全体的な目的は、2つの異なるVon Fryテスト法を用いて、脊髄損傷後の急性期および慢性期における触覚の変化を定量化することである。具体的には、まず、アップダウン法によるvon fryテスト用のプレキシグラス製チャンバーおよび、背側von fryテスト用のタオルでの固定にラットを順化させる。次に、von Fryモノフィラメントを用いて、後肢の足底または背側のいずれかに触覚刺激を与える。ラットがモノフィラメントから足を素早く上に跳ね上げた場合に、陽性反応とみなします。本手順の最終ステップは、適用した各荷重に対する陽性反応または足の逃避反射の回数を定量化し、後肢の触覚閾値を決定することです。最終的に、up、down、およびdorsalのいずれのvon fry試験法においても、中等度から重度の脊髄損傷後に生じる触覚閾値の低下を検出できることが示されます。本日は、脊髄損傷したラットの足裏における触覚感覚を評価するための2つの手法を実演します。これらの手法は、衰弱を伴う痛みや脊髄損傷を持つ人々に対する今後の治療法を決定するのに役立ちます。脊髄損傷者の少なくとも3分の2が、その後、深刻で衰弱を伴う神経障害性疼痛を発症します。研究者にとって、将来的な治療法のための細胞および分子メカニズムを特定するためには、正確で感度が高く、妥当性のある行動試験手法を用いることが重要です。本手法は、中胸髄挫傷後の感覚回復に関する知見を提供できるだけでなく、触覚に影響を及ぼす他の種類の病理や損傷にも有用です。感覚の評価はラットの足底逃避反応の解釈に依存するため、本試験を視覚的に提示することが極めて重要となります。新しいユーザーにとって、反応が固有受容性または視覚的な手がかりではなく、実際に触覚刺激によるものであるかどうかを判断することは困難な場合があります。このビデオを視聴することで、動物をテスト環境に慣らし、穏やかに扱うことができるようになります。von fryモノフィラメントを後肢の背側または足底面に適用し、正の足退避反応を判定します。最後に、動物の触覚感覚閾値を測定します。まず、ラットが食物報酬を認識し、それを求めるように、ホームケージ内でフルーツシリアルを提示します。ラットがホームケージ内でシリアルを食べることに慣れたら、さらに3個のフルーツシリアルを入れた試験チャンバーにラットを入れます。フルーツシリアルが食べられたら、適宜追加して提供してください。テスト準備が整ったおとなしいラットは、10分間ほぼ絶え間なく食べ続け、金網の床の下での手の動きや、足裏への閾値下モノフィラメント刺激によって気を散らすことはありません。おとなしいラットを、2〜3個のフルーツシリアルと共にテストチャンバーに入れてください。サイコロを振り、どちらの後肢から検査を開始するかを決定します。偶数は右前肢、

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