デグロンを使用した生細胞におけるユビキチン·プロテアソーム活性のモニタリング(DGN)·不安定化緑色蛍光タンパク質(GFP)ベースのレポータータンパク質

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2012年11月10日

10.3791/3327-v

2012年11月10日

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生きた細胞内でユビキチン - プロテアソーム活性をモニターするための方法が記載されている。デグロン - 不安定化のGFP(GFP-DGN)と安定したGFP-dgnFS融合タンパク質が生成され、レンチウイルス発現ベクターを用いて細胞内に伝達される。この手法は、ユビキチン - プロテアソーム活性を容易に落射蛍光またはフローサイトメトリーを用いて評価することができる安定したGFP-dgn/GFP-dgnFS発現する細胞株を生成することができます。

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GFP Dgnレポーター

Chapters in this video

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タイトル

1:21

ウイルスの作製

4:11

ウイルスのタイター測定

6:13

ヒト二倍体線維芽細胞の導入

7:19

FACS実験

8:50

in vivoにおけるプロテアソーム活性

10:04

結論

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