2013年1月10日
プローブベースの共焦点レーザーendomicroscopyは、細胞レベルの解像度でこのような膀胱癌などの病理学的状態の動的な生体内イメージングを提供し、膀胱鏡検査中に人間の尿路のリアルタイム顕微鏡検査が可能になります。 Endomicroscopyは、標準的な白色光内視鏡検査の診断精度を補強し、外科的切除を改善するために術中画像ガイダンスを提供することがあります。
次の実験の目的は、膀胱腫瘍の経尿道的切除を受けている患者において、プローブベースの共焦点レーザー内視鏡法を使用したin vivo顕微鏡法を実証することです。これは、最初に白色光膀胱鏡検査を使用して膀胱の尿路上皮全体を視覚化し、異常または疑わしい粘膜病変に注意することによって達成されます。第2のステップとして、造影剤を仲間内に注入し、共焦点レーザー内視鏡による視覚化に必要な蛍光コントラストを提供します。第3のステップでは、関心のある各領域のin vivo顕微鏡検査が行われ、組織の細胞、マイクロアーキテクチャ、および血管の特徴が注目されます。
最終的に、in vivo顕微鏡所見は、関心領域の生検の組織病理学的分析と比較することができます。手順を実演するのは、泌尿器科外科医のジョセフ・レアル博士で、手術室での尿路のプローブベースの共焦点レーザー内視鏡検査のアプリケーションを開発した人物です。被験者が結石切開位置になったら、まず、標準的な白色光膀胱鏡検査を使用して尿道から硬性膀胱鏡を挿入し、白色光の下で膀胱の領域を監視します。
共焦点レーザー内視鏡の関心領域を切除ループでマークします。蛍光膀胱鏡検査や狭帯域イメージングなどの他の巨視的光学イメージングモダリティは、このステップで追加の疑い領域を特定するために使用でき、60ミリリットルのカテーテルを使用して膀胱に滅菌尿道カテーテルを挿入します。先端シリンジ、重力によって希釈された造影剤を注入します。
次に、造影剤を住居に保持するために尿道カテーテルをクランプします。5分後、膀胱から薬剤を排出します。次に、240〜300ミリリットルの生理食塩水を60ミリリットルの注射器に注ぎ、膀胱から残っている造影剤を洗い流して、フルオレセインの静脈内注射を行います。
1ミリリットルのフルオレセインを注射器に引き込みます。シリンジを静脈内アクセスポイントに取り付け、0.5〜1ミリリットルのフルオレセインをボーラスとして静脈内注射し、ラインを通常の生理食塩水で洗い流します。.造影剤を注入した後、滅菌共焦点レーザー内視鏡イメージングプローブをパッケージから取り出し、レーザースキャンユニットに接続します。
次に、製造元の指示に従ってイメージングプローブをウォームアップして校正し、レンズがゼロ度の硬性膀胱鏡を膀胱に再挿入します。次に、共焦点内視鏡イメージングプローブを膀胱鏡の作業チャネルに沿って進め、先端を白色光の下で膀胱鏡のすぐ後ろに置きます。イメージングプローブが関心領域をスキャンするときに、以前にマークされた関心領域を見つけます。
将来の分析のために画像を記録します。次に、オペレーターの手を使用して、共焦点内視鏡イメージングを操作します。関心領域の光学セクショニングのための関心領域の直接高速接触のためのプローブ。
直接接触を維持しながら、イメージングプローブへの圧力を穏やかに増減します 内部膀胱に位置する腫瘍に到達します。標準的なALエルボーとブリッジを使用して、イメージングプローブのたわみを促進し、関心領域と直接接触します。必要に応じて、共焦点レーザー内視鏡検査によってスキャンされた任意の対応する関心領域からコールドカット生検を取得します。
イメージングが完了したら、共焦点内視鏡イメージングプローブを作業チャネルから取り外します。この手順を試みるときは、イメージングする前に膀胱内から過剰なフルオレセインを洗い流し、プローブと粘膜表面との間に90度の接触を維持することを覚えておくことが重要です。この最初の画像は、血管内染色された乳頭状腫瘍を伴う代表的な白色光膀胱鏡検査からのものです。
画像の下部に見える 2.6 mm のイメージング プローブに注目してください。これらの 2 つの画像は、膀胱内および静脈内フルオレセインをそれぞれ使用して 2 つの異なる膀胱腫瘍から得られた代表的な共焦点レーザー内視鏡画像です。イメージングプローブが異なるタイプの膀胱鏡共焦点レーザー間で交換される可能性があることを考えると、内視鏡検査は他の新しいイメージングモダリティと組み合わせることができ、ここに示すような蛍光膀胱鏡検査やここに示すような狭帯域イメージングなど、いずれかの技術自体の診断精度を向上させる可能性があります。
したがって、この方法は膀胱がんへの洞察を提供する可能性があります。これは、上部尿路上皮がんなど、生検で診断するのが難しい可能性のある他のシステムにも適用できます。
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本研究では、膀胱鏡検査中のヒト尿路のリアルタイムイメージングにおいて、プローブベースの共焦点レーザー内視鏡を用いた手法を実証します。この技術により、膀胱腫瘍を細胞レベルの解像度でダイナミックに可視化することが可能となり、診断精度の向上や手術ガイダンスの強化が期待されます。
プローブベースの共焦点レーザー内視鏡(pCLE)により、膀胱鏡検査中に尿路組織のリアルタイムで高解像度なイメージングが可能となり、膀胱がんの早期発見や外科的切除のガイダンスに寄与します。この技術は、組織病理学的解析を補完する細胞レベルの可視化を提供することで、病変の特性評価における不確実性を低減し、診断の信頼性を高めます。標準的な内視鏡ワークフローへの統合は、尿路上皮癌管理におけるリスク層別化を改善するためのトランスレーショナルな経路を提供します。
この手法は、イメージングに基づく表現型リードアウトを提供することにより、初期の標的仮説検証からリード化合物の同定、および前臨床検証に至る創薬研究の連続的なプロセスに統合されます。