1.3: 濃度と容量測定法

溶液濃度の背後にある概念を理解することと、ラボでの容量を測定することは、ほぼすべての実験の2つの重要な側面です。

溶液は、溶質を溶媒に溶解して均質な混合物を生成するために構成されています。

溶液は、通常、その成分と対応する濃度によって識別されます。

正しい溶液濃度を正しく得るためには、体積測定に利用できるさまざまな容器に精通している必要があります。

容量測定の技術が不十分だと、濃度が不正確になり、実験の成功と失敗の分かれ目となります。

実験を行う際には、使用する溶液の正確な濃度を知ることが不可欠です。

濃度は、最も一般的にはモル濃度として表されます。1モル溶液には、溶液(B + C)1リットルあたり1モルの溶質が含まれています。ラボで溶液を作るとき、溶質のモルは、分子の測定された質量とその分子量から決定できます。

溶液は、溶媒の単位体積あたりの溶質の重量からパーセント濃度として調製および定量化することもできます(パーセント重量-体積溶液と呼ばれます)。

溶質は液体の形をしていることがあることに注意してください。この場合、濃度パーセントは、溶媒の単位体積あたりの液体溶質の体積として表すことができ、体積-体積溶液の割合と呼ばれます。

頻繁に使用する場合は、ストック溶液と呼ばれる安定な化合物の濃縮溶液を調製できます。ストック溶液は、最終作業溶液中の濃度の倍数としてラベル付けできます。ここでは、10Xのソリューションをご紹介します。

これらのストック溶液は、必要に応じて溶媒で希釈して、目的の濃度にすることができます。

あるいは、平行希釈を使用して、より濃縮された溶液から希釈液を調製することもできます。この簡単な計算を使用して、既知の濃度のストック溶液から、所望の濃度と所望の体積の溶液を調製できます。得られた容量を溶液の総容量に希釈して、所望の濃度を達成することができます。

ただし、状況によっては、希釈に必要な原液の最終体積を体積で割ったものに等しい希釈係数が大きすぎる場合があります。これにより、ストック溶液の必要量が小さすぎて正確に測定できないため、並行希釈は実用的ではありません。

段階希釈法では、原液を使用して希薄な溶液を作り、それをさらに希釈してより希薄な溶液を作ることができます。

ラボで容量を測定すると、液体を保持できる多くの容器に出くわします。ただし、これらの容器のすべてが体積を正確に測定するように設計されているわけではないことを認識することが重要です。

ビーカーや三角フラスコなどの非容積式容器は、溶液の混合と保存用に設計されており、一般的に校正されていません。代わりに、側面の測定値 (目盛り) は、液体容量の近似値を表します。

一方、容積式ラボウェアは、液体物質の正確な量を測定するように設計されています。ボリュメトリックラボウェアは、保持するようにキャリブレーションされた容量と、TCまたはTDの文字で示されます。

TCは「contain」の略です。また、一般的には、正確な量の液体を保持するように校正されたメスフラスコやメスシリンダーに使用されています。

TDは「提供する」という意味です。また、通常、ピペットやシリンジなど、液体を分注するように設計された測定装置に見られます。

メスフラスコは、通常、特定の濃度の溶液を調製するために使用されます。溶質を溶解した後、総体積が目盛り線に達するまで溶媒をフラスコに加えます。「quantity sufficient」を追加しますか?このボリュームに到達することは、Q.S.として知られていますか?ソリューションを使用します。

Q.S.はいつ?溶液を注入すると、液体の上部がフラスコと出会う場所で湾曲します。これは半月板と呼ばれ、表面張力によって引き起こされます。水溶液中では、メニスカスは凹面であり、曲線の最も低い点で読み取る必要があります。

特定の量の液体を測定して供給するように設計された容器がいくつかあります。ボリュメトリックラボウェアを選択するときは、常に目的のボリュームに対応する最小のデバイスを選択して、最高の精度を達成してください。

50 mLを超える液体の量を測定する場合は、メスシリンダーが適切な選択です。

セロロジカルピペットは、通常、0.1〜50mLの範囲の容量を測定し、送達するために使用されます。

0.2マイクロリットルから5mLの容量の場合は、マイクロピペッターを使用する必要があります。

プラスチック製のピペットチップが測定対象の液体と互換性がない場合、ガラス製のハミルトンシリンジは、マイクロリットル範囲の体積を正確に測定するための代替手段となります。

ソリューションの使用の基本について説明したので、これらの概念の一部が研究にどのように適用されるかについて説明します。

DNAゲル電気泳動は、アガロースで作られたゲルマトリックスを介して負に帯電した分子を移動させる電場を印加することにより、DNA断片の混合集団を分離し、そのサイズを推定するために使用される技術です。海藻由来の炭水化物

ゲルマトリックスの調製では、重量/体積のパーセント溶液を使用して、1%の重量/体積のアガロースゲルを作製するのが一般的です。

一般に、電気泳動には大量のランニングバッファーが必要です。これらのバッファーは頻繁に使用され、量が多いため、通常、より濃縮された10倍ストック溶液から希釈されます。

所望の1xバッファーを達成するために、1単位容量のストック溶液を9単位容量の精製水で希釈します。

マイクロプレートリーダーの実験では、未知のタンパク質サンプルの濃度は、多くの場合、標準と呼ばれる既知の濃度のサンプルのセットに基づいて決定されます。

段階希釈は、漸進的に高濃度の標準液を生成するためによく使用され、最終的には標準曲線を生成し、未知のサンプルの濃度を決定することができます。

JoVEの濃度の理解と体積測定の紹介をご覧になりました。このビデオでは、濃度の計算、希釈の実行、さまざまな種類の実験器具を使用して体積を測定する方法など、いくつかの基本的な概念を確認しました。このビデオで紹介したいくつかの概念の応用についても、分子生物学と生化学で議論しました。

見てくれてありがとう、そしてボリュームを測定するときは常に精度と精度を使用することを忘れないでください。