An Isolated Semi-intact Preparation of the Mouse Vestibular Sensory Epithelium for Electrophysiology and High-resolution Two-photon Microscopy

Victoria W. K. Tung; Stefano Di Marco; Rebecca Lim; Alan M. Brichta; Aaron J. Camp

doi:10.3791/50471

JoVE Journal
Neuroscience

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JoVE Journal Neuroscience

An Isolated Semi-intact Preparation of the Mouse Vestibular Sensory Epithelium for Electrophysiology and High-resolution Two-photon Microscopy

電気生理学および高分解能二光子顕微鏡用マウス前庭感覚上皮の切り抜き半無傷準備

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11:52 min

June 13, 2013

DOI: 10.3791/50471-v

Victoria W. K. Tung¹, Stefano Di Marco¹, Rebecca Lim², Alan M. Brichta², Aaron J. Camp¹

¹Discipline of Biomedical Science, School of Medical Sciences, Sydney Medical School,University of Sydney, ²School of Biomedical Sciences and Pharmacy,University of Newcastle

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

前庭有毛細胞機能の解析は頭蓋骨の最も困難な部分の奥深くの位置、側頭骨錐体によって複雑になる。最も機能有毛細胞研究は、急性単離された有毛細胞を使用している。ここでは、電気生理学的および二光子顕微鏡研究のためのマウス前庭上皮の半無傷の準備について説明します。

この手順の全体的な目標は、マウス前庭感覚上皮のほぼ正常な調製を得ることであり、これは前庭有毛細胞の基本的な細胞および細胞内プロセスを研究するために使用することができます。これは、最初に骨の前庭迷路を頭蓋冠から分離することによって達成されます。2番目のステップは、細い鉗子で骨の迷路を慎重に引っ掻き取り、骨のケーシングから完全に取り除く前に、下にある膜状の迷路を露出させることです。

次に、細い虹彩ハサミを使用して上にある膜を切り取ることにより、前庭感覚上皮を露出させます。最後のステップは、半無傷の感覚上皮調製物をガラス底のチャンバーに取り付け、加重ナイロンネットで安定させることです。最終的に、パッチクランプ電気生理学と2光子顕微鏡を使用して、前庭の毛髪、細胞、およびまたは一次アリンの各タイプの内因性膜特性とカルシウムシグナル伝達プロファイルをそれぞれ特徴付けます。

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