2013年10月16日
過去数年間、新世代内視鏡は、ネズミ大腸炎および結腸直腸腫瘍を評価するための重要な診断研究助剤として浮上している。私たちはここに、マウスにおける炎症と大腸腫瘍の内視鏡的な評価だけでなく、大腸炎および大腸腫瘍の内視鏡的重症度を記録するために小数の識別子を使用して新たなスコアリングシステムのための詳細なプロトコルを提示する。
こんにちは、任天堂大学東京の客員pHの可児智弘です。そして、ウェスタンリザーブ大学医学部の消化器健康研究センターの所長であるファビオ・エリです。このビデオでは、マウスで大腸内視鏡検査を行う方法について説明します。正常な内視鏡の解剖学的構造に精通することの重要性を強調します。
内視鏡検査中の問題を効果的にトラブルシューティングして、外傷や画像のアーチファクトを最小限に抑える方法を説明する。そして最後に、大腸炎および大腸炎関連がんのミューアイモデルにおける腸の炎症の評価のためのスコアリングシステムについて説明してください。ご清聴ありがとうございました。
まず、スコープをビデオシステムセンターと光源に取り付けて内視鏡システムを設定します。スコープを滅菌し、空気注入用のシリンジを取り付けます。次に、システムの電源を入れて調整します ホワイトバランス 動物と。
適切に麻酔をかけ、拘束すると、内視鏡検査が開始されます。必要に応じて生検サンプルを採取することができます。スコーピング後、最後に回復用のライトでマウスを温めます。
大腸炎症および大腸関連大腸がんの評価のための採点システムについて説明する。内視鏡システムのセットアップ。内視鏡システムには、ビデオシステムセンター、キセノン光源、ビデオレコーダーが含まれます。
マウスの大腸内視鏡検査にはヒト尿管鏡を使用します。当社のスコープURFVは、CCDセンサーを使用したフレキシブルなビデオスコープです。挿入管の外径は3.3ミリ、遠位端の直径は2.8ミリです。
まず、スコープをビデオシステムの中心と光源に取り付けます。次に、スコープとレンズ表面を70%エタノールで滅菌します。次に、3mmシリンジを作業チャネルに取り付けます。
これは、気腹または誤嚥を伴う管腔内空気の量を調整するために使用されます。メインスイッチをONにし、ホワイトバランスを設定します。また、マウスを麻酔して、NBIモード2に設定することを忘れないでください。
まず、吸入麻酔の実演を行います イソフッ素を使用して、4〜5%のイソフッ素を誘導に使用します。マウスが動きを止めた後、濃度を1〜2%の維持量に下げます。尾と下肢をテープで留めて、マウスをテーブルに拘束します。.テールテーピングは、スコーピング中にマウスを静止させるために特に重要です。
また、トリブロモの腹腔内注射。麻酔にはエタノールを使用することができます。3。内視鏡検査 肛門周囲病変は内視鏡評価の一部ではありませんが、重要な所見であり、挿入前に観察する必要があり、外傷性出血と混同しないでください。
挿入する前に、スコープに外科用潤滑剤をコーティングし、CCDセンサーをコーティングしないように注意してください。スコープを肛門に挿入します。この最初の挿入は、盲目の挿入が結腸結腸粘膜を損傷する可能性があるため、できるだけ穏やかにする必要があります。
ライトをつけて録音を開始します。エアシリンジをゆっくりと慎重に押して、視野を確保します。空気の注入が多すぎると、口が死ぬ可能性があります。
自然出血の存在は、内視鏡を直腸または結腸の角度に挿入したときに判断する必要があります。ハンドリングはビューを垂直に調整し、トルク制御は水平調整用です。これら 2 つのコントロール間の調整は非常に重要です。
透明度を観察します。正常な結腸では、壁は透明な状態で正常な血管性を持ち、厚さはありません。透明性は、血管または壁外臓器の経壁的可視性として定義されます。
挿入と引き抜きの繰り返しの動きは、正常な結腸での評価に役立ちます。検査中は、小さな血管と大きな血管の両方を見ることができます。必要に応じて、写真を撮ったり、サンプルを生検したりできます。
接触出血の有無を確認してください。内視鏡を抜くとき、意図的に粘膜をこすり落とす必要はありません。狭帯域イメージングモードは、粘膜内の血管の微細構造を強調します。
直腸は筋肉に囲まれていますが、結腸は周囲の組織によって固定されていません。この解剖学的な違いのため、直腸には壁外内臓は見えません。糞便ペレット 肛門の近くに存在することがあります。
それらは空気送気で除去することができますが、時には持続して内視鏡の視界を遮ることがあります。このような場合、便を洗い流すために最大1ミルのPBS浣腸を使用します。糞便は通常、数分後に排泄されます。
レンズに汚れがあることによって引き起こされるぼやけたビューも、特に大腸炎や出血の場合に一般的な問題です。この状況では、空気を通気してレンズを掃除しようとしました。この手順は、スコープを抜かずにレンズをクリアするのに成功する可能性があります。
蠕動運動は、腸の正常な生理学的活動の1つです。空気送気は蠕動運動中に内腔を拡張するのに成功していないため、蠕動波が通過するまで待つ必要があります。その4、生検生検標本は、柔軟な生検カップ鉗子を使用して得られます。
カップはハンドルで開閉します。鉗子を作業チャネルに挿入します。腸に穴を開けないように注意してください。
カップを適切なサイズに開き、先端を関心のある領域に置きます。カップをそっと閉じてしっかりと引っ張ります。適切な溶液で洗い流して試料を取り出します。
その5、回復。検査後、マウスが回復するまで温めます。結腸の炎症に対する6スコアを温めるために電灯を使用します。
私たちのスコアリングシステムは、肛門周囲病変1つ、結腸壁の透明性2つ、腸管出血3つ、および4つの焦点病変の4つのパラメーターで構成されています。各パラメータは、0から3までスコアリングできます。最大合計スコアは12です。
さらに、特定の内視鏡所見を強調するために使用できる小数のスケールが含まれています。各パラメータの詳細な説明は、添付の原稿に記載されています。これがまとめの1、肛門周囲病変です。
この所見は、スコープを直腸に導入する前に観察する必要があります。これにより、外傷性出血との混同を避けることができます。スコアが 0 は正常です。
スコア2は血の排出です。スコア3は肉芽組織または直腸脱出症です。これは、結腸壁の血管と周囲の内臓を視覚化する能力を表します。
スコアが 0 の場合は、血管がはっきりと見えることを示します。1点を獲得します。小さな血管は部分的に見えませんが、大きな血管は見えます。
スコアは2です。小さな容器は一般的に見えず、大きな容器でさえはっきりしません。スコア3はスコア2と同じで、結腸の外観が厚くなります。3。
出血、自然出血は接触出血と区別する必要があります。それに応じて判断してください。スコア1は、穏やかな標準的なスコーピング手順によって接触出血が誘発されることを示します。
結腸に入ると自然出血が通知されます。その4、限局性病変。これらの知見は、炎症にしばしば伴う局所的な状態を反映しています。
1点を獲得します。プラークは、一見正常な粘膜に覆われた平らな隆起です。スコアは2です。
赤端部の侵食は3点です。フィブリンのような材料で覆われた潰瘍形成侵食。NBIは、この点を認識するのに役立ちます。
10 進数記述子。3 つのパラメータを追加し、10 進数の scores.0.1 を付けました。狭窄スコアの場合、腸の裂傷または穿孔のスコア0.2、腫瘍性病変の症例提示ケース1の場合、0.5。
クロストリジウム・ディフィシル感染症のマウス。それは通常の透明度を持っていますが、早期に侵食されます。小さな侵食が見られますが、背景の粘膜は正常です。
よく観察すると、この病変の周囲にわずかな浮腫が現れます。また。他の部分では、炎症の存在を示す所見はありません。ケース2。
高脂肪食でDSS誘発性大腸炎のマウス。この場合、不透明、自然出血、狭窄が見られます。最初は出血が見られます。
それは自然発生的です。ここに制限があります。空気の注入によって拡張することはなく、内視鏡は通過できません。
背景の粘膜は赤くなり、肥厚しています。また、あちこちで接触叩きが発生します。それは結腸の場合の脆弱性を示しています。3。
慢性DSS大腸炎、不透明、壁の厚さ、腫瘍様の突起が見られるマウス。一般的に白い襟付きの壁の厚さが見られ、壁は透明ではありません。これは、脾屈筋の突起が顕著である周囲の潰瘍形成です。
ケース4。アゾキシメタンとDSSによって誘発される癌に関連する大腸炎のマウス。複数の腫瘍と潰瘍があります。
右側の壁には大きな扁平型の突出病変があり、少し近位の領域では別の下部の扁平型の病変が見られます。表面の構造は、正常な粘膜とは明らかに異なります。NBIは、このような病変の検出と診断に役立ちます。
直腸には繊維状物質で覆われた地理的な大きな潰瘍があります。ご視聴いただきありがとうございました。
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本記事では、腸管炎症および大腸腫瘍の評価に重点を置いた、マウスにおける大腸内視鏡検査の詳細なプロトコルを提示します。著者らは、小数点以下の識別子を用いて大腸炎および腫瘍の重症度を記録するための、新しいスコアリングシステムを導入しています。
マウスモデルにおけるバリデーション済みの内視鏡スコアリングにより、大腸炎および大腸腫瘍の重症度を再現性のある定量的な方法で評価することが可能となり、胃腸疾患研究におけるターゲットの検証やメカニズムのデリスク化を直接的にサポートします。単一のワークフロー内で炎症と腫瘍の評価を統合することで、初期探索から前臨床試験に至るまでの予測精度とトランスレーショナルな連続性が向上します。標準化されたスコアリングシステムは、研究間の比較可能性を高め、バイオファーマのR&Dにおけるポートフォリオレベルの意思決定を促進します。
この検証済み内視鏡スコアリングシステムは、発見から前臨床段階に至る連続的なプロセスに位置付けられ、胃腸疾患研究における仮説検証、リード評価、およびトランスレーショナルモデルの最適化を可能にします。