2014年6月29日
我々は、小さな金属クリップを用いて上行大動脈の狭窄によってWistarラットにおける圧負荷及び左心室肥大を作成するための段階的な手順を記載している。このモデルは、広範囲に心肥大中にリモデリングの変化を研究するためのそのような変更の退行ための戦略を同定および評価するために使用される。
こんにちは、私はインドバイオテクノロジーセンターの心血管疾患生物学部門ラージガンジーのアジクマールGsです。私はプロセスカルタの指導の下で働いており、このビデオでは、ラットでI OTE構造を上昇させるための段階的な手順を示します。当研究室では、この年間モデルを用いて、心肥大や進行性心不全の病態生理とその分子メカニズムについて研究しています。
また、このモデルを使用して、左往症から心不全に関連する肺高血圧症を研究します。それでは始めましょう そして、動物を美化し、仰臥位に保ちます。気管内挿管は、2つの気管リングの間に半分切開を行い、気管カニューレを挿入して、げっ歯類の人工呼吸器に接続する
ことで行います。次に、左胸部の第2肋骨と第3肋骨の間の約2センチメートルの皮膚切開を行い、筋肉層を分離します。イオタの上行部分のイオタ収縮を視覚化するには、アプリケーター付きの小型チタンクリップを使用して、肋骨に対抗し、筋肉層と皮膚を中断パターンで縫合します。気管内チューブを抜去した後、気管の筋肉、層、皮膚を閉じ、動物が回復するのを待ちます。
手続きは、施設の動物倫理委員会の承認を得た後に行われました。手術前に、手術野を70%アルコールで消毒し、加熱パッドを無菌的に保管してください。げっ歯類の人工呼吸器と麻酔ユニットを手術の準備をしてください。
オートクレーブで手術器具を滅菌します。上行耳狭窄のための主要な手術用具は、滅菌手袋、親指鉗子、はさみ、手術用ブレード、出血の場合にガーゼ付きの小型チタンクリップとアプリケーター動脈鉗子、ニードルホルダープロリン縫合材料、編組シルク縫合糸、針です。ラットを抗生物質の傘の下に24時間保持し、3%ISOフッ素と100%酸素を混合した誘導チャンバーでラットを審美化します。
ラットのネックラインと左胸部から毛皮を取り除き、動物を上に保ちます。加熱パッド。1.5%ISOフッ化物チェックペダル反射で麻酔を維持し、麻酔が成功したことを確認します。
ポビドンヨード溶液で手術部位を消毒し、続いて70%アルコールで消毒します。この手順を3回繰り返します。手術部位のみを露出させるように、動物に滅菌ドレープを置きます。
気管と平行に皮膚を切開し、下にある組織を分離します。気管を露出させるために。気管の下に絹糸のネクタイを敷き、ゆっくりと上に上げます。
2つの軟骨リングの間に半分切開し、気管カニューレを挿入します。気管カニューレをげっ歯類の人工呼吸器に接続します。人工呼吸器は、毎分50回の呼吸数に設定する必要があります。
潮汐量1.7ml、吸気時間0.6秒。左胸部の第2肋骨と第3肋骨の間の領域を切開します。肋間筋は層ごとに分離されます。
肋骨を切開する際に肺を傷つけないように注意する必要があります。肋骨を引っ込めた後、脂肪組織を優しく操作して、イオタの上向き部分を慎重に配置します。矢印はイオタの昇順部分を示しています。
アプリケーターの助けを借りて、上昇するイオタの周りに小さなサイズのチタンクリップを配置し、それによりイオタを元の直径の50〜60%に収縮させます。耳の狭窄に続いて、心臓の位置を変え、プロリン縫合糸で肋骨を近似します 同時に、肺を再膨らませるために人工呼吸器を約2〜4秒間一時停止します。筋肉をプロリンで層状に配置した後、中断された縫合パターンで絹の縫合糸で皮膚を貼り付けます。
人工呼吸器に設定された呼吸数を徐々に減らし、動物の自発呼吸を観察します。自発的で定期的な呼吸が再確立されたら、気管カニューレを取り外してください。現在、麻酔はノーズコーンを通じて維持されています。
プロリン縫合糸で気管リング間の開口部を閉じます。筋肉層と皮膚をそれぞれプロリンとシルクの縫合糸で閉じます。術後鎮痛注射として手術領域にポビドンヨウ素溶液を塗布します。
トレマドール腹腔内生理食塩水は腹腔内に投与することができる。脱水症状の兆候が徐々に下がる場合は、動物が回復した後、麻酔をオフの位置に戻し、ケージに移し、飲料水と混合したアモキシシリンを経口投与します 7日間。上昇するイオタの狭窄によって生じる圧力過負荷の強度は、二次元心エコー検査によって耳の狭窄部位を横切る圧力勾配を観察することによって決定できます。
図の左パネルは、水銀柱の圧力勾配が63mmの大動脈くびれラットのドップラーエコーを示しています。そして、右側のパネルは、イオタ全体に大きな圧力勾配がない偽の制御ラットを表しています。上のパネルは、手術後8週間のラットの左心室のMモード心エコー検査を示し、下のパネルは偽制御を示しており、心室中隔の厚さと左心室後壁の厚さは有意に増加し、左心室の内径はI耳狭窄を受けたラットで有意に減少しました。
偽操作の対照群と比較して、8週間の手術後に上行耳狭窄を受けたラットでは、偽の操作された対照群と比較して、有意な心肥大が観察されます。.こんにちは、私はラージです。ここでは、ラットの上行イオタの狭窄の手順を説明します。
このモデルの主な利点は、心肥大と心不全が徐々に進行することです。この母親の慢性高血圧症の臨床状況と同様に、イオタの狭窄のためのタイタニック号クリップの適用でケアを行う必要があります。最も重要なことは、タイタニック号のクリップの適用は、左20プラスのストレスのための重大なイオタの狭窄を生成するのに十分であるべきであるが、急性の電子不全や肺水腫を引き起こすほど深刻ではなく、肋骨の間に切開を行う際に肺への損傷を避けるためにも注意を払わなければならないということです。
人工呼吸器は、肺を再膨張させるために、肋骨を反対側に置きながら3〜4秒間配置する必要があります。このビデオをご覧いただき、ありがとうございました。
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本記事では、上行大動脈縮窄によるWistarラットの圧負荷および左室肥大の誘導に関する段階的な手順について説明します。このモデルは、心肥大の研究および潜在的な退縮戦略の評価に広く利用されています。
ラットにおける上行大動脈狭窄は、圧負荷誘発性心肥大の強力な前臨床モデルであり、心血管系薬剤開発におけるメカニズムの検証(デリスキング)およびターゲットのバリデーションを可能にします。このモデルは、慢性高血圧で観察される心肥大と心不全の緩徐な発症を再現することで、トランスレーショナルリサーチにおける予測精度を向上させます。その再現性と定量的なアウトプットにより、ポートフォリオの選別や初期段階の治療仮説の検証において有用です。
このモデルは、初期のメカニズム研究と心血管系候補薬のトランスレーショナルバリデーションを橋渡しし、創薬から前臨床試験に至る一連のプロセスに組み込まれます。