Name: 代償四肢使用および虚血性脳卒中のマウスモデルにおける感覚皮質損傷後の運動技能の学習の行動評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 1 s
Description: 学ぼう、マウス虚血性脳卒中モデルにおけるパスタマトリックス到達課題を用いた代償四肢使用と運動技能の行動評価法。この手法は、感覚皮質損傷後の機能回復とリハビリテーション戦略の理解に貢献する。

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著者は、テレサ・ジョーンズ博士がリーチングタスクをマウスに適応させるための指導と支援に感謝したいと思います。この原稿で提示されたデータは、NIH-NINDS(TAJへのNS64586とALKへのNS076275)からの助成金と、KANTへの博士課程前NRSAからの助成金(F31AG034032)によってサポートされました。 NIHは、この原稿で提示された研究デザインや分析のいかなる側面にも、この原稿の構成にも関与していません。

以下のメソッドは、テキサス大学オースティン校とイリノイウェズリアン動物管理使用委員会によって承認されたプロトコルに準拠しています。これは、研究者が手袋を着用するか、いずれかの実験動物で行動訓練に従事した場合に適切な予防措置（前後に手を洗う）を取るのどちらかことをお勧めします。手術のためのとの間に備えて、動物を取り扱う際には手袋を着用しなければならない。 1。慣れ食品制限 NOTE：PMRTは欲求タスクであるように、それが到達応答を動機付けし、トレーニングセッション中に満腹感を防ぐために、従来の訓練の開始に供給するの量およびタイミングを制限することが有益である。 <ol><li>前のタスクの訓練の開始に少なくとも1週間に開始制限給餌スケジュールにマウスを置きます。自由摂食量を確立する前に食物制限の開始に各マウスを計量し、目のように決定される制限給餌の初日に各動物のEの重み。 <ol><li> （ 例えば 、ケージ内に収容された4匹のマウスが存在する場合、ケージは毎日の食事の10グラムを受信します）一日あたりのげっ歯類用の標準食の各マウスの受信〜2.5グラムで、一日一回マウスを養う。給餌は毎日同じ時間に発生したことを確認し、好ましくは同時に、毎日のトレーニングセッションを締結することが期待されている。 </li><li>まだマウスは、それらの自由給餌重量の10％以上を失っていないことを保証するために定期的に動物を秤量する。注：適切な体重維持を促進するためにそれに応じて毎日の食事量を調整します。彼らが成熟するようにしたマウスは、通常、一定の食事制限マウスはPMRT訓練/評価の期間中、食事制限に残っていてもして、体重が増える。 </li></ol></li><li>ホームケージ内のパスタの小さな断片（1.6 cmのカット）に動物をさらす新しいもの嫌いの応答を克服するために事前の訓練を数回。注：通常の露出の5-10日は、マウスproviあたり約4個で十分である各給餌でDED。 </li><li>カミソリの刃を使用して、サイ​​ズ（3.2センチメートル）にパスタの部分をカット。注：これは、パスタ片の過剰前日のトレーニングや密閉容器に格納されている未使用の部分を始めにカットされることをお勧めします。カッペリーニパスタは、行列を埋めるために使用されている。パスタの異なるブランドが行列やパスタを破るマウスのために必要な力の量のパスタの安定性に影響を与える可能性がある、食感、直径が異なるように、DeCeccoブランドのパスタは、トレーニングとテスト全体で使用することをお勧めします。 </li><li>マトリックス（ 図1A）で使用可能なすべての穴を埋める、パスタマトリックスに未調理カッペリーニパスタピースを置きます。 </li><li>前に置かれた完全なパスタマトリックス（ 図1A）と試験室の底に食べるパスタのいくつかの部分を検査室にマウスを慣らす。 5〜10分の3セッションのためにマウスを慣らす。注：マウスはhabitua中にパスタのために達することを奨励すべきではありませんTiONからトレーニング。マウスには、通常開口部を通ってそれを盗聴によって到達室の外に位置パスタに興味を示し始める。それは、必要に応じて、単一のチャンバ内の2ケージの仲間を慣らすことは可能であるが、マウスは個々に成形され、訓練を受けなければならない。各動物の行動装置内に配置される前と後のすべての表面を70％エタノールまたは類似の、安全な消毒液で洗浄する必要があります。 </li></ol> 2。シェーピングリーチ<ol><li> 3-5一日一回の成形試験を介してリーチを成形することにより、各動物の優先手足を決定します。最初に発生する10分または10時間の合計のために達するために、マウスを許可します。 <ol><li>馴化訓練（ 図1A）のように、チャンバの前で完全なパスタマトリックスと検査室で個別にマウスを置きます。 </li><li>別々に左右の手足と流域の数を示す、各肢に達した回数を記録します。拡張機能としてリーチを定義する手首室の平面を壊すようなことに達する開口部を通って手足の;リーチに向け又はパスタと接触することがすることが必要ではない。 </li></ol></li><li>到達には消極的であるマウスを奨励するために達する開口部を通ってちょうどチャンバー内のパスタのいくつかの部分を持ってください。マウスは、このように後退パスタ片の後に到達するためにそれらを奨励し、興味（ 例えばスニッフィング、噛む）を示していたときのパスタの部分を引き出す。マウスは、最初は乾燥パスタに興味を示していない場合は、それらを口に合うようにするために暖かい水の小さなカップパスタ片の先端を濡らす。 </li><li>マウスは単一肢との日々の流域の70％以上を示す場合に四肢の好みを決定します。これはタスク17に到達する訓練部分の間に観察学習の量を制限することができるように、終わっていない形の動物にやる。マウスが成形された後PMRTトレーニングを開始します。注：トレーニング次第NEXとして起動することができますTの日ですが、整形および訓練手順の間に数日待つようにしても良い。 </li></ol> 3届かトレーニング<ol><li>列車のマウスPMRTに能力を確立するために、以前の侮辱に一日一回。注：各試験はいずれか早い方15分以上（成功と失敗）観測者によってカウント100に達すると、最大構成されています。マウスを好みの手足のみで到達するために訓練されています。より激しいトレーニングパラダイムが18望む場合マウスは一日あたり2つの試験に耐えます。 <ol><li>フロント（ 図1B）に配置されたハーフフルマトリックスと試験チャンバー内にマウスを置きます。列車のマウスは、マウスは自分の体の正中線を越え達するため好ましい肢に行列反対側のみを充填することにより、好みの手足のみ到達する。 Sではないであろう（この四肢とリーチの試みを阻止するために、満たされていない、好まざる四肢に対応する行列の部分を残すuccessful彼らはパスタを達成）、好ましい手足だけ到達し奨励することができないため。 </li></ol></li><li>それは、マウスが正常に初期のトレーニングセッションの間に作品を打破するために行列にある間、パスタに少量の圧力を置きます。マウス用のパスタの部分を壊さないでください。軽く背後に垂直な意図、目標到達に1つまたは2つのパスタ片を保持することによってこれを達成する。サポートのこの小さな量は、彼らが最初にタスクを学んでいるようにマウスが把握するための非常に柔軟かつ困難である細いパスタを安定化するのに役立ちます。 </li><li>到達し、成功に達するの数、成功した流域の位置の合計数を記録します。成功に達するには、開口部を通って到達パスタの部分をつかむと、行列から削除するには、パスタピースを破るために、マウスが必要です。注：パスタ片は試験が終了した後までの行列で置き換えられるべきではありません。初期のトレーニングでは、マウスに、多くのパスタ片を壊すことはありません。 </li><li>安定した性能（日にわたってせいぜい2より多くのまたはより少ない部分でパスタの少なくとも9個を壊す）の（5日まで）は、少なくとも3日間として定義されている能力にPMRT列車マウス。それは多くの場合、習熟度に若い成体マウスを訓練するために、15〜20の間で日かかります。 </li></ol> 4。少ない - 患肢トレーニング<ol><li> （優先/影響を受けたとless-affected/unpreferred手足に明確化については図2を参照）が好ましい到達肢に反対運動皮質への虚血発作後4日から始まるあまり影響を受けた四肢（ すなわち 、手術前、好まざる四肢を）訓練。 1日1回15分または100リーチトレーニングセッションを管理します。 <ol><li>成功していない初期の患肢に到達することを確実にするために、あまり影響を受けた四肢のトレーニングの第一週をパスタの最初の列（到達開口から延びるすなわち 、最も内側の垂直列）を取り外します。 </li><li&gt;置く前に配置されたハーフ満たされたマトリックスと到達チャンバー中のマウス。行列の満たされた半分は今ではあまり影響を受けた（好まざる）四肢に到達するために、マウスを強制的に手術前の満たされた半分の反対であることを確認してください。 </li></ol></li><li>到達開口部を通って、この手足の延長を強化し、あまり影響を受けた四肢に到達奨励する。マウスは到達室の床の上にパスタの小さい（1/2個）に関係なく、リーチが成功したか否かの訓練所の最初の数日間で、あまり影響を受けた四肢を拡張する。 </li><li> 100リーチ合計に向かってあまり患肢で作られたものだけが到達を数える。流域の総数に向けた患肢とひそか試行をカウントされません。 </li><li>あまり影響を受けた四肢の訓練の最初の7日後に行列にパスタの最も内側の縦の列を返します。 </li><li>到達し、成功に達するの数、およびSUCCの場所の数を記録しますessful届きます。注：これらのデータは、あまり影響を受けた肢でパターンに到達するの違いを観察するために分析することができるが、以前に報告されていない。 </li></ol> 5。到達分析あまり影響を受けた四肢の訓練を次PMRTタスクに影響を受けた四肢を評価することにより、影響を受けた四肢の機能の回復にはあまり影響を受けた四肢使用の影響を判別します。あまり影響を受けた四肢のトレーニング日数所望の数（通常14日）完了した後、この評価が発生します。 <ol><li> （優先手足いっぱいに反対行列の半分、 すなわち ）訓練手順とまったく同じ指向室の前で行列を配置します。注：これは彼らの影響を受けた（以前推奨）手足に到達するためにマウスを強制します。 </li><li>プレストローク性能レベルと比較する達すると、成功に達するの数、成功した流域の位置の合計数を記録します。のパフォーマンスを調査しないでくださいこれらの影響を受けた四肢のプローブとしてあまり影響を受けた四肢のトレーニング中に患肢は患肢の回復に影響を与える可能性があるトレーニングセッションとして機能することができる。 </li></ol>

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<li>Clarkson, A. N., Lopez-Valdes, H. E., Overman, J. J., Charles, A. C., Brennan, K. C., Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+examination+of+structural+and+functional+remapping+in+the+mouse+photothrombotic+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Multimodal examination of structural and functional remapping in the mouse photothrombotic stroke model.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 33 (5), 716-723 (2013).</li>
<li>Liu, Z., Chopp, M., Ding, X., Cui, Y., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+remodeling+of+the+corticospinal+tract+in+the+spinal+cord+contributes+to+voluntary+motor+recovery+after+stroke+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Axonal remodeling of the corticospinal tract in the spinal cord contributes to voluntary motor recovery after stroke in adult mice.</a> Stroke. 44 (7), 1951-1956 (2013).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

PMRTマウス業者に達する性能を評価するための簡単​​な、定量的な方法を表しています。時間がかかるが、それは少数のトレーニングセッションと信頼性と再現性のあるデータを収集するように訓練される以前に経験のない大学生が可能である。タスクは、虚血性傷害3、13、15以下のマウス運動技能の性能のわずかな変化を測定するのに十分に敏感であり、それであるため多くの研究は、訓練プロトコル15、20、22の様々な長期的な障害を引用一方的なタスク、それはまた、マウスがタスクを実行すると手足を決定するために使用することができる。 PMRTのこの機能は、それが侮辱だけでなく、あまり影響を受けた四肢で学習への依存で発生する不適応や代償の変化を、以下の両方の適応行動や神経可塑性の研究に有効であることができます。タスクはまた、ラットモデルにおいて研究されてきた両手四肢使用の研究ではなく、圧力に向いている本来的にマウス23。 現在のプロトコルの最も重要な側面は、次のとおり正確に、以前の訓練への優先手足を決定する前に、損傷に対する熟練運動課題に習熟...

マウスモデルは、部分的には、その利便性と手頃な価格だけでなく、他のアプリケーション間でのin vivoイメージングに適しているトランスジェニック系統の利用可能性の実験的脳卒中研究のために、ますます人気となっている。これは、実験モデルで人気を増加して、損傷後の機能的な結果の敏感な行動評価の開発に関心が1-7増加している。人間の脳卒中生存者によって使用される両方のリハビリと代償戦略を模倣する動物の訓練プロトコルの開発に成功し、診療所8で使用する実験動物研究からの調査結果を変換する機能を向上させます。タスク（PMRT）に達するパスタマトリックス上運動技能訓練は、これまで感覚運動皮質3の虚血発作、次の運動技能の結果の敏感な行動評価として確立されている。 主要な関心の一つ脳卒中研究の懸念リハビリと傷害後の機能回復の改善を促進する行動戦略の開発と理解のS。現在、ヒトでのリハビリテーションの戦略は不完全リカバリ8になる。また、リハビリテーションセラピストは完全に彼らの影響を受けた四肢（S）の機能を回復する能力を損なう可能性脳卒中生存者は回復中に開発代償戦略を戦う必要があります。例えば、上肢機能に影響を与える一方的脳卒中後の、人間がそれらの低い影響肢9,10への依存を発症する傾向がある。短期間で機能する人の能力を向上させるが、これは、患肢の非使用学ん動物モデル11-13に示されたように、最終的な回復の可能性を妨げることがあります。動物ではこれらの知見は、ヒトの14に制約誘発性運動療法の開発と使用を知らせるために貢献している。動物モデルはbeneficiaです研究者が補助する神経生物学的メカニズムを探索し、機能の回復を促進させることにより、リハビリテーション戦略を改善するためのlである。脳卒中後の機能の効果的な行動評価であることに加えて、PMRTは、感覚運動ストローク15以下の改善された機能的結果を促進するのに有効なリハビリテーション戦略として確立されている。 PMRTも効果的に模倣患肢の不使用を学んだので、過度の依存の少ない患肢13の初期にもかかわらず、機能回復を改善することが、行動の操作への洞察を提供するために使用することができます。 PMRTの構築は3以前に記載されている。簡単に説明すると、到達室が開放された上部と下部で（20センチ長さ15cm、8.5センチ幅）4プレキシガラスの壁で構成されている。働き室の前壁の下部ベースから延びる中心スリット（13センチと幅5mm）がある達する開口部（ 図1A）として得た。パスタマトリックスは完全にブロックの深さを通して掘削直径1mmの穴を大型プラスチックブロック（5センチ幅8.5センチメートル長、及び1.5センチ）。 260穴の合計が各ホール（ 図1B）との間に2ミリメートルに達したウィンドウから2ミリメートルを開始、があります。パスタマトリックスは、乾燥、垂直に配向パスタ片が露出パスタ片の約半分を有するマトリックス段の深さ全体を通って延びるように設計されている。オーバーヘッドプラスチックや厚紙の取り外し可能な部分は、大きさに切断し、マトリックスの下側にしっかりとテープで固定する必要があります。これは、輸送中のマトリックスから脱落パスタ片を防止し、壊れたパスタ片の容易な除去を可能にする。 PMRTは、正確な結果データを収集し、臨床的な現象を模倣するために四肢の使用を操作することを可能にする実験者汎用性と敏感な行動アッセイである。行動Oのようなutcome対策、PMRTは実験者がより正確に梗塞サイズ3、16の伝統的な尺度の場合よりもリハビリ戦略の有効性を反映した行動データを収集することができます。行動操作など、PMRTは実験者がマウスでの上肢の使用を制御することができますリハビリテーションの臨床経験を模倣するために（ すなわち 、患肢の訓練）または不使用を学んだ（ つまり、あまり影響を受けた四肢のトレーニング）。神経解剖学の方法と組み合わせることで、PMRTは、脳卒中後の代償四肢使用を次の関数や不適応行動の可塑性の回復をサポートするメカニズムを探索する機会を研究者に提供します。 PMRTはさらに、外傷性脳損傷などの脳損傷および上肢障害の他のマウスモデルに適用することができる。 PMRTの別の利点は、その手頃な価格である。タスクに必要な機器の家にかなり合理的に構築することができ、データ収集はないスペースや財源を大量に必要とし、タスクが確実にデータを収集するために、学部学生のための非常に簡単ではありません。さらに、PMRTが少しでも行動障害3、13に敏感です。このプロトコルは、損傷後の行動回復を促進し、運動技能の学習を評価するための簡単で効果的な方法を提供し、模倣は脳卒中の確立マウスモデルにおいて不使用現象を学びました。

<table><tbody><tr><td>リーチングチャンバー</td><td></td><td></td><td>リーチチャンバーは、プレキシガラス</td></tr><tr><td>パスタマトリックスブロック</td><td></td><td></td>を使用して社内で作られています <td>パスタマトリックスボックスは、重いプラスチックブロックを使用して社内で作られています</td></tr><tr><td>カペッリーニパスタ</td><td>DeCecco</td><td></td><td>DeCeccoブランドのカペリーニパスタは、食料品店やAmazonなどのオンライン小売業者を通じて購入できます</td></tr></tbody></table>

代償四肢使用および虚血性脳卒中のマウスモデルにおける感覚皮質損傷後の運動技能の学習の行動評価

Compensatory Limb Use and Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Following Sensorimotor Cortex Injury in a Mouse Model of Ischemic Stroke

マウスモデルは、行動神経科学の分野で、具体的には、実験的な脳卒中の研究でますます人気となっている。モデル予めとしては、マウスに特異的な感受性の行動策を開発することが重要である。この議定書は、脳卒中のマウスモデルで使用するために熟練した運動課題について説明しています。パスタマトリックスは、正確な結果データを収集し、代償戦略（ すなわち 、不使用を学んだ）し、リハビリトレーニングを当て含むヒト臨床的現象を模倣するために四肢使用を操作する実験者が許可汎用性と高感度の行動分析などのタスク機能に達する。神経解剖学のツールと​​組み合わせることで、この作業には、脳卒中後の機能（またはその欠如）の行動回復をサポートするメカニズムを探求する研究者を許可します。タスクは、FUに関する数多くの研究課題のためのトレーニングとテストのさまざまなオプションを提供して、簡単かつ手頃な価格に設定することと行動の両方で損傷後nctional成果。タスクは、脳卒中のマウスモデルに適用されているが、それはまた、他の上肢損傷モデルにおける機能的転帰の研究において有益であり得る。

PMRT分析の結果は、壊れたパスタ片の数と成功に達するのパターンを含める必要があります。感覚運動皮質病変を有するマウスから得られた結果は、 図3Aに示されたように虚血発作は、成功に達するの数だけでなく、物理的なリーチパターン3、19の両方に影響を与えることを示している。代表パターンの変化は、図3Bに観察することができる。マウスにおける学習した未使用の効果を模倣するPMRTの能力はあまり影響を受けた肢の訓練13、20以下の患肢の障害回復によって証明され、その結果、影響を受けた肢でのみ成功した到達を分析する。感覚運動皮質への虚血性病変を有するマウスから得られた結果は、虚血性脳卒中後の低い患肢訓練の2週間、少なくとも7日間13患肢の使用を損なうことを示唆している。 図4に示されるように、あまり影響を受けた肢tを受け取るマウス一方的な虚血発作後15日間、雨は患肢評価の7日間の少ない成功リーチの試みを示す。脳卒中後の15日間、トレーニングなし（コントロール）を受信しないマウスは正...

マウスモデルは、行動神経科学の研究においてますます人気が高まっています。 モデルが進歩するにつれて、マウスに特有の感度の高い行動手段を開発することが重要です。 このプロトコルは、脳卒中のマウスモデルで使用するための熟練した運動課題であるパスタマトリックス到達課題について説明しています。

Mouse models have become increasingly popular in the field of behavioral neuroscience, and specifically in studies of experimental stroke. As models ...

本手順の全体的な目的は、脳卒中のマウスモデルにおいて、代償的な肢の使用が行動に及ぼす影響を評価することである。まず、シェイピング工程においてマウスがどちらの肢でもリーチできるようにし、好んで使用するリーチ肢を決定する。次に、パスタマトリックスリーチタスクを用いて、その好みのリーチ肢のみをトレーニングし、運動スキルを確立させる。次に、パスタマトリクスを用いて、マウスに影響の少ない方の肢を使用させるトレーニングを行い、代償的な肢の使用を習得させます。リーチングタスクは、好ましいリーチング肢の対側で片側性虚血性損傷を誘発した4日後から開始します。最終ステップとして、影響の少ない方の肢のトレーニングが、脳卒中により影響を受けた肢の機能的転帰に及ぼす影響を評価します。最終的に、患肢の機能的予後の悪化は、数日間のテストにおける到達成功回数の減少によって示されます。この手法は、行動介入が機能的予後にどのような影響を与えるかなど、脳卒中の基礎研究における重要な疑問を解決するのに役立ちます。一般的に、この手法に不慣れな人は、マウスにこの高度なスキルを要するタスクを教え込むための時間と忍耐が必要となるため、苦労することになります。この検査の利点は、他の感覚運動機能検査よりも感度が高いことです。マウスを用いて。まず、カミソリ刃を使用して、調理していないCAPIパスタの断片を切断することから手順を開始します。次に、パスタの断片をパスタマトリックスに配置します。マウスを試験チャンバーに慣れさせるため、前面にパスタマトリックスを配置し、底部にパスタの断片をいくつか置いてリーチ動作を形成させ、1回5〜10分間のセッションを3回行います。馴化トレーニングと同様に、前面にパスタマトリックスを配置した試験チャンバーにマウスを入れます。各肢でのリーチ回数を記録し、右肢と左肢のリーチ回数をそれぞれ個別に記載します。ここでは、リーチを「肢がリーチ用開口部から伸び、手首がチャンバーの平面を越えて、足の4本の指がチャンバーの外から見える状態」と定義します。シェイピングセッションにおいて、リーチがパスタに向かっていることや、パスタに接触することは必須ではありません。マウスの試行回数を最大10回まで、またはチャンバー内での時間を最大10分までとし、いずれかに達した時点で終了します。まず、マウスにリーチ動作を促すため、リーチングアパーチャー越しにパスタを数片、チャンバーのすぐ内側に保持します。マウスがクンクンと匂いを嗅いだり、かじろうとしたりするなど関心を示したときに、パスタを引っ張り出し、後退するパスタを追いかけようとするよう促します。マウスがドライパスタに関心を示さない場合は、パスタの先端を少量の温水に浸し、嗜好性を高めてください。また、シェイピングセッションは、肢の好みを決定するためにも用いられます。マウスが1日のリーチ動作の70%以上を単一の前肢で行った場合、その肢を利き肢と定義します。マウスを、半分に充填されたマトリックスが前方に配置された試験チャンバーに入れます。利き肢の反対側のマトリックスのみに餌を充填し、マウスが利き肢のみでリーチするように訓練します。このトレーニング段階では、マウスが影響の少ない肢でリーチしようとするのを防ぐため、その肢に対応するマトリックスの部分を空けておきます。マウスがパスタ片を正確に標的にして破壊することを学習できるよう、1日1回、15分間または100回のリーチトレーニングセッションを行います。トレーニングの初期セッションでは、標的となるパスタ片の後方に別のパスタ片を軽く垂直に保持することで、マトリックス内のパスタ片にわずかな圧力をかけます。この少量のサポートは、細いパスタを安定させ、マウスが掴みやすくする役割を果たします。到達に成功するためには、マウスが開口部を通して手を伸ばす必要があります。パスタを1片掴み、それを折ってマトリックスから取り出します。最大100回までの到達回数と、パスタを正常に破壊できた回数およびその位置を記録します。この手順では、好んで使用する到達肢の対側にある運動皮質に虚血性損傷を加えてから4日後に、影響の少ない肢のトレーニングを開始します。術前のリーチング訓練と同様に、1日1回、15分間または100回のリーチ訓練セッションを実施します。影響を受けていない側の肢の訓練の最初の1週間は、パスタの1列目を取り除いてください。影響を受けている側の肢による初期のリーチ試行が成功しないようにするため、半分まで埋めたマトリックスを前に配置して、マウスをリーチングチャンバーに入れます。マトリックスの充填した半分が、術前の充填側とは反対側になるように配置し、マウスが影響の少ない肢でリーチせざるを得ない状況にします。リーチ用の開口部を通してこの肢を伸展させることで、影響の少ない肢でのリーチを促し、強化します。トレーニングの最初の数日間にマウスが影響の少ない肢を伸展させたときは、リーチチャンバーの床に少量のパスタを置いてください。リーチが成功したかどうかにかかわらず、非麻痺側肢で行ったリーチのみを合計100回のリーチ数としてカウントします。麻痺側肢による密かな試行は、総リーチ数に含めないでください。その後、非麻痺側肢の訓練から最初の7日間が経過した時点で、パスタの最も内側の垂直列をマトリックスに戻します。リーチの総数と、パスタが正常に折れた個数およびその位置を記録し、非麻痺側肢の代償的利用が脳卒中による麻痺側肢の機能回復に与える影響を評価します。PMRTを用いて、影響を受けた肢のパフォーマンスをテストします。影響の少ない方の肢のトレーニング後に実施してください。マトリクスをチャンバーの前に設置し、術前のトレーニング手順と同じ向きに配置します。これにより、マウスは脳卒中の影響を受けた肢でリーチ動作を行うことになります。リーチの総回数、およびパスタを正常に折った回数と位置を記録し、脳卒中前のパフォーマンスレベルと比較します。ここでは、好みの肢と反対側の感覚運動皮質に片側性虚血性損傷を負わせる前後の、影響を受けた肢による代表的なリーチパターンを示しています。「Anterior（前方）」はマウスのより前方に配置されたパスタ片を、「lateral（側方）」はマウスのより側方に配置されたパスタ片を指します。術後のトレーニング期間における、患側の代表的なパターン変化をここに示します。このグラフは、感覚運動皮質の片側性虚血性損傷後の15日間にわたり、非患側でPMRTトレーニングを行った場合に、非患側のトレーニングが患側のパフォーマンスにどのように影響するかを示す代表的な例です。この手順を行う際は、シェイピング段階でマウスに過剰な回数の到達を許し、過剰トレーニングになることを避けるよう注意することが重要です。さもなければ、学習曲線はこのテストにおける学習の初期段階を正確に反映しません。この手順に従ってください。行動介入が神経解剖学的構造に与える影響に関するその他の疑問を調査するために、免疫組織化学、皮質マッピング、および生体内（in vivo）イメージングを含むその他の手法を用いることができます。

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Research

JoVE Journal

Behavior

行動

中大脳動脈の糸状閉塞は、マウスでは虚血性脳卒中を研究するための一般的なモデルです。...

マウスにおけるモデリングのストローク - フィラメントモデルと中大脳動脈閉塞

中大脳動脈閉塞（MCAO）の種々のマウスモデルが広く実験的脳研究において使用される。ここでは、人間の虚血性脳卒中の過半数によって課さ被害に対応する大き​​さの一貫した皮質梗塞を生成し、経頭蓋永久遠位MCAOのモデルを示しています。...

マウスにおけるモデリングのストローク：遠位中大脳動脈の永久的な凝固

円筒試験の古典前肢非対称性解析を日常脳損傷や脳卒中後のラットにおける行動障害を評価するために使用されます。しかし、マウスでは、一貫した障害を検出することができません。この研究は、足·ドラッグ動作を定量化することは、マウスにおける脳損傷の、より敏感な分析であることを示しています。...

ポウ·ドラッグ：小説、マウスシリンダー試験の感度分析

生後に一側内頚動脈閉塞を行った 7 10 CD-1 マウス新生児低酸素性虚血性 (HI) モデルを作成する子犬とこんにちは脳損傷の効果を検討しました。非運営正常なマウスと比較してこれらのマウスの神経行動学的機能を検討した.

新生児低酸素性虚血性脳損傷のマウス モデルにおける神経行動学的評価

ここで説明するフォトトロンボミックストロークモデルは、感光性染料の投与後にレーザー照明を用いて永久的な微小血管閉塞を誘導することによって無傷の頭蓋骨を通してストロークが生成される。...

マウスにおける脳卒中のモデリング:光血栓症による焦点性皮質病変

中大脳動脈閉塞の異なるモデル(MCAo)は、実験的な脳卒中研究で使用されています。ここでは、外部頸動脈(ECA)を介した一過性MCAoの実験的ストロークモデルについて説明し、これは、自然血栓溶解または治療のために脳血管血栓が除去されるヒトの脳卒中を模倣することを目的とする。...

マウスにおける脳卒中のモデリング:外頸動脈を介した過渡中脳動脈閉塞

MouseWalker(MW)ツールボックスを使用して自由に歩くマウスの自発運動パターンを定量的に記述するための実験パイプラインが提供されており、初期のビデオ録画や追跡から定量化後の分析まで、さまざまな結果が得られています。マウスの脊髄挫傷損傷モデルを用いて、MWシステムの有用性を実証した。...

MouseWalkerを用いた脊髄損傷マウスモデルにおける自発運動機能障害の定量化

ここでは、C57BL/6Jマウスの経頭蓋電気凝固術による遠位中大脳動脈閉塞(dMCAO)モデルを確立し、その後の神経学的行動と組織病理学的特徴を評価するためのプロトコルを提示します。...

遠位中動脈閉塞法を用いたマウスにおける急性虚血性脳卒中の誘発

この記事では、高度に翻訳され、独立して証明されたマウスストロークユニット(mSU)の概念を大脳卒中マウスで実行するためのプロトコルを紹介します。また、マウスの焦点実験脳卒中スケールを実行するための標準化されたプロトコルを提供し、長期的に検出された脳卒中焦点欠損を評価します。...

トランスレーショナルマウス脳卒中研究のための標準化された神経学的スコアリングを備えたマウス脳卒中ユニットプロトコル

このプロトコルは、ウイルスの送達、視球体の着床、光血栓誘導、アストロサイトおよびニューロン活動の同時記録、アストロサイトのオプトジェネティック刺激を含む統合的な手法を提供します。この統合手法は、虚血性脳卒中の急性期から慢性期にわたり、アストロサイトとニューロンの関係を同時に調査することを目的としています。...

振る舞うマウスの神経細胞およびアストロサイト活動の光血栓性脳卒中モデリングおよび in vivo 光学記録のための統合手法

学ぼう、マウス虚血性脳卒中モデルにおけるパスタマトリックス到達課題を用いた代償四肢使用と運動技能の行動評価法。この手法は、感覚皮質損傷後の機能回復とリハビリテーション戦略の理解に貢献する。

代償四肢使用および虚血性脳卒中のマウスモデルにおける感覚皮質損傷後の運動技能の学習の行動評価

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