Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

Ji-Yoen Kim; Stacy D. Grunke; Yona Levites; Todd E. Golde; Joanna L. Jankowsky

doi:10.3791/51863

JoVE Journal
Neuroscience

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JoVE Journal Neuroscience

Intracerebroventricular Viral Injection of the Neonatal Mouse Brain for Persistent and Widespread Neuronal Transduction

永続かつ広範な神経伝達のための新生児マウス脳の脳室内ウイルス注射

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10:15 min

September 15, 2014

DOI: 10.3791/51863-v

Ji-Yoen Kim*¹, Stacy D. Grunke*¹, Yona Levites², Todd E. Golde², Joanna L. Jankowsky^1,3

¹Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, ²Department of Neuroscience, Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease,University of Florida, ³Department of Neurology and Department of Neurosurgery,Baylor College of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、新生児マウスの脳へのアデノ随伴ウイルスの脳室内注射による広範なニューロン伝達の技術を示しています。この方法は、ウイルス送達型導入遺伝子の生涯にわたる発現を迅速かつ容易に達成する方法を提供します。

この手順の全体的な目標は、脳全体のニューロンをウイルスで形質導入することです。これは、新生児の子犬の凍結麻酔と、それに続く新生児の冷却段階への注射の移し替えによって達成されます。次に、ラムダ縫合糸と各眼またはラムダとBgmaの中間にある矢状縫合糸から外側との間の側脳室を標的とする注射部位を特定します。

最後のステップは、針を正しい深さまで挿入し、各半球の側脳室に最大2マイクロリットルのウイルス溶液をゆっくりと注入することです。最終的には、目的の遺伝子の蛍光タグまたは免疫蛍光法を使用して、脳室内注射から生じる導入遺伝子の発現パターンを示します。一般的に、この技術に不慣れな人は、側脳室を正確に標的にすることに苦労します。

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