Isolation and Culture of Dissociated Sensory Neurons From Chick Embryos

Sarah Powell; Amrit Vinod; Michele L. Lemons

doi:10.3791/51991

JoVE Journal
Neuroscience

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JoVE Journal Neuroscience

Isolation and Culture of Dissociated Sensory Neurons From Chick Embryos

ニワトリ胚から解離感覚ニューロンの単離および培養

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11:16 min

September 24, 2014

DOI: 10.3791/51991-v

Sarah Powell¹, Amrit Vinod¹, Michele L. Lemons¹

¹Department of Natural Sciences,Assumption College

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

細胞培養モデルは、環境条件を詳細に制御を提供し、したがって、神経細胞生物学の多くの側面を解明するための強力なプラットフォームを提供します。私たちは、隔離解離、およびニワトリ胚の培養感覚ニューロンために、迅速な安価で、かつ信頼性の高い方法を記載する。基質の調製および免疫細胞化学の詳細も提供される。

この手順の全体的な目標は、ニワトリの胚から解離した一次感覚ニューロンの濃縮集団を培養することです。これは、胚の日から無傷の後根神経節、7〜10個のニワトリの胚を円錐形のチューブに集め、続いてそれらを解離した細胞懸濁液に分解することによって達成されます。解離した第2のステップとして、DRG細胞を培養皿に播種してインキュベーションします。

その後、培養皿を穏やかにすすいで、ニューロンを優先的に除去する。最後のステップには、高濃度または低濃度のラミニンで事前にコード化された酸洗浄および焼きカバースリップなど、明確に定義された基層に解離した感覚ニューロンをめっきすることが含まれます。1つの免疫細胞化学を使用して、解離培養胚性ニワトリ感覚ニューロンの細胞体、神経突起、および成長円錐体におけるNCAおよび活性化β one integrinsの存在を示します。

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