くも膜下出血の急性および後期後遺症の研究のためのウサギの血液シャントモデル：技術的側面

この手順の全体的な目標は、ウサギの検査官に依存しない頭蓋内圧、または ICP 制御血液シャント、急性くも膜下出血、または SAH モデルを確立することです。これは、最初に鎖骨下動脈をカニューレで挿入することによって達成されます。2番目のステップでは、デジタルサブトラクション血管造影が行われ、次に神経モニタリングプローブと脊椎アクセス針が最終ステップに配置されます。

脊椎アクセス針と鎖骨下動脈はシャントに接続され、検査官が誘導し、独立したICP制御の急性SAH、最終的にはICP脳血流、またはCBFおよび急性SAHに対する動物の心肺応答を監視できます。この方法は、早期の脳損傷や遅延した脳血管標本が分娩不能の転帰と死亡率にどのように寄与するかなど、神経血管分野の重要な質問に答えるのに役立つ可能性があります。動脈瘤性スービック出血後 まず、鎮静剤を投与したウサギを仰臥位に置き、前足と後足の両方を手術面に固定します。

3チャンネルの心電図をそのまま取り付けます。ウサギの腹側に三角形の形に3つの皮下電極を配置します。次に、鎖骨の中央3分の1の周りの右絵筋の上のポビドンヨウ素または同様のもので皮膚を消毒し、動物を滅菌シートで覆います。

局所麻酔薬で胸筋に浸潤した後、横方向の皮膚横部切開を行い、胸筋を露出させます。鎖骨下動脈が視覚化できるようになるまで、鈍的解剖によって筋線維を上下に分割します。次に、顕微鏡下で、2 つのまっすぐなマイクロ鉗子を使用して鎖骨下動脈を解剖し、遠位に結紮し、4 つの O ポリフィラメント縫合糸と湾曲したマイクロ鉗子を使用して、露出した近位端の周りに結紮糸を配置します。

次に、湾曲したマイクロハサミを使用して鎖骨下動脈の壁を切開し、動脈の逆行性をカニューレします。次に、ダブルノット結紮糸でカテーテルを近位結紮糸に向けて固定し、さらに、動脈の近位部分の動脈のねじれや曲がりを防ぎ、滑りや大量出血を避けるために、ダブルノット結紮糸でカテーテルを遠位結紮糸に向けて固定します。次に、動脈血ガス分析状態の血液サンプルを収集し、標準的な心血管および呼吸器パラメータを継続的に監視します。

下顎骨の角度に外部サイジング装置を配置して、血管造影を校正し、ベースラインとフォローアップ血管の直径の事後測定を正確に比較できるようにします。次に、カニューレ挿入された動脈を介して非イオン性IOP IOLの逆行性動脈内ボーラス注射を行い、すぐにカニューレを生理食塩水で洗い流して、はしごの閉塞を防ぎます。ベースラインのデジタルサブトラクション血管造影に続いて、動脈内カテーテルを操作したり再配置したりしないように注意しながら、ウサギを腹臥位に再配置します。

動脈血圧モニタリングを接続し、心電図、動脈血圧、末梢酸素飽和度、呼気二酸化炭素、深部体温など、標準的な心血管および呼吸器パラメータの継続的なモニタリングを開始します。アナログ出力インターフェースを介してデータをアナログデジタルコンバーターデータロガーに転送して保存します。頭を30度の角度で下向きにホルダーに置き、頭と首の上の皮膚をポビドンヨードで3回、それぞれ1分間

新しい手術領域を滅菌シートで覆った後、正中線の皮膚を切開します。小さな外科用リトラクターを挿入して、外側の頭蓋骨のランドマークに従って3つの円形の骨切り術を行い、神経モニタリングプローブを校正します。頭蓋間圧と実質間レーザードップラー血流ニューロモニタリングチップを配置し、骨ワックスでバーの穴を塞いで頭蓋液をしっかりと保ち、頭蓋骨を閉じた状態にして、I-C-P-C-P-PとMAPの安定した状態を維持します。

次に、22ゲージ40ミリメートルの小児脊椎アクセス針を経皮的に大槽に挿入します。次に、隙間が検出されるまで、針を骨の外部後頭部に沿って下にスライドさせます。うさぎの頭を20〜30度の角度で数分間下に傾けた状態で、脳脊髄液の自発的な滴下を観察して、針の正しい位置を確認します。

次に、血液で満たされた圧力モニタリングチューブを使用して、大槽の脊椎アクセス針を、以前にカテーテルを挿入した鎖骨下動脈に取り付けられた三方向ストップコックに接続します。次に、鎖骨下動脈とCI大胸骨との間のシャント接続を開き、くも膜下出血を誘発します。シャントを開いた後、頭蓋内圧は拡張期血圧に近い値まで上昇し始めます。

その際、頭蓋間プラトーが10秒以上維持された場合、または圧力が自然に低下した場合は、頭蓋間圧がピークに達した後にシャントを閉じ、圧力がベースライン値に近い定常状態に戻るまで脊髄アクセス針を所定の位置に保持します。最後に、脳血流の細い針と頭蓋内圧プローブを取り外します。骨の穴を骨ワックスで塞ぎ、硫酸ネオマイシンを使用して厳密な創傷洗浄を行い、皮膚を縫合します。

まず、バーの穴に皮膚を縫合します。次に、ウサギを仰臥位に再配置し、鎖骨下動脈カテーテルを抜去した後、胸筋と皮膚を縫合します。本報告で報告したSAHの狂犬病性血液シャントモデルは、海馬基底皮質に早期脳損傷を生じ、損傷後24時間という早い時期に脳血管系を生じさせ、特徴的な血液分布を誘導する。

さらに、このモデルは、3日目に中等度から重度の遅延脳血管痙攣を引き起こします。SAH導入後、動物が完全麻酔下にある急性SAHの時点での呼吸停止または重度の徐脈により、この手順の死亡率は約20%です。技術的な観点から見ると、この血液シャントモデルにより、検査官に依存しない制御可能なSAH導入が可能になります。

この手順を試みるときは、このサブクラボン動脈をしっかりと固定し、素晴らしい車に乗って動物を再配置し、サイ胸骨鍼治療中は非常に穏やかで忍耐強くあることを覚えておくことが重要です。