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DOI: 10.3791/52788-v
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ここでは、ゼブラフィッシュの耳介における局所的な細菌感染の生成とイメージングのためのプロトコルを提示します。
この手順の全体的な目標は、ゼブラフィッシュの幼生に細菌性病原体連鎖球菌IEAをマイクロインジェクションして、宿主の免疫応答のライブ非侵襲的イメージングを行うことです。これは、まずマイクロインジェクション針に細菌懸濁液を装填し、麻酔をかけたゼブラフィッシュの幼生をアガロース注射型に並べることによって達成されます。次に、細菌懸濁液を幼虫の耳小胞に微量注入します。
次に、注入された幼虫を低溶融アガロースにマウントします。最後に、宿主免疫細胞を写真でラベル付けして追跡しやすくし、感染を共焦点顕微鏡で画像化します。最終的には、ストレプトコッカスIEAの耳小胞へのマイクロインジェクションと、それに続く写真標識および共焦点顕微鏡法を使用して、ゼブラフィッシュの幼生の宿主免疫応答を研究します。
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