で閉鎖性頭部外傷性脳損傷を負わせる方法ショウジョウバエ

この手順の全体的な目標は、閉鎖性頭部外傷性脳損傷を負わせることです。ハエで。これは、最初に底から1インチのバイアルにハエを置くことによって達成されます。

2番目のステップは、バイアルをHIITデバイスに取り付けることです。次に、スプリングを特定の角度に偏向させ、バイアルを解放して完全に静止させます。最終的には、さまざまな行動形態学的および分子アッセイを使用して、結果として生じる外傷性脳損傷の影響を特徴付けることができます。

この方法が、げっ歯類の体重減少法などの既存の方法よりも優れている点は、短期間で多くの動物を研究できることです。この方法は、外傷性脳損傷の結果が個人によって異なる理由など、外傷性脳損傷の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。まず、付属のテキストプロトコルの表1に記載されている原材料を組み立てます。

clを曲げますamp ペンチを使用して、スプリングにしっかりとフィットするようにします。次に、クランプをボードの幅に対して中央に配置し、外側のクランプをボードの端と同じ高さにして互いに突き合わせます。スプリングがボードの長さと平行になるように調整し、クランプをスプリングの上とボードに取り付けますamp 4本のネジを使用してボードに取り付けます。

次に、ベルクロ粘着テープのストリップを巻きます。スプリングの自由端を回ると、ベルクロの外縁がスプリングの端と同じ高さになるはずです。アイスバケツカバーを逆さまに、中央に、木の板に対してしっかりと置きます。

アイスバケツカバーの隆起した領域を、長い辺がボードの幅と平行になるように向きを変えます。デバイス全体を壁などの固定物にスライドさせて、アイスバケツカバーがボードとオブジェクトの間に挟まれて動かないようにします。次に、紙分度器を段ボールの底にテープで固定し、バイアルトレイを飛ばし、ボードの長さに対して端に立てて、90度のマークがスプリングと揃うようにします。

完全に垂直な位置に戻したら、空のバイアルに麻酔をかけたハエを1〜60個置き、ぴったりとフィットするコットンボールを使用してバイアルをストッパーします。次に、バイアルの基部から1インチ離れたところに線を引き、バイアルの側面からハエをたたき、新しく引いた線と一致するまで綿球を押し込みます。ハエが二酸化炭素から移動性を回復するまで5分待ちます。

次に、ベルクロの内側の端がバイアルの上部と同じ高さになるまで、スプリングの端をバイアルに挿入します。これにより、スプリングが平らに横たわった状態でしっかりとした圧縮フィッティングが作成され、バイアルがスプリングに固定されます。この時点で、バイアルの1インチがアイスバケツカバーの隆起した領域と重なっていることを確認してください。

バイアルが氷のバケツカバーに当たると大きな音がするため、聴覚保護具を装着してください。次に、左手の親指と人差し指を右手でバイアルをベルクロ領域に保持し、ボードをベンチトップにしっかりと保持します。次に、スプリングを目的の角度まで完全にまっすぐに引き戻し、スプリングを放します。

スプリングが完全に停止するのを待ってから、バイアルをスプリングから取り外します。バイアルをベンチトップにセットし、ハエが少なくとも5分間回復するのを待ちます。この間、ハエはゆっくりと正常な動きを取り戻します。

次に、ハエを後で分析するためにハエの餌を入れたバイアルに移すか、またはハエを別のストライクにさらすと、バイアルを何度も再利用できます。実験の目的は、24時間後の死亡率指数に対する傷害の重症度の影響を判断することでした。外傷の重症度は、リリース前のスプリングの 0 度から 90 度までのたわみ角度によって決定されました。

実験は、0〜7日齢のハエと20〜27日齢のハエの2つの異なる年齢のハエで行われました。その結果、重傷が大きいほど死亡率指数が高くなることが示されています。高齢のハエは、春のたわみが50度以上の場合、若いハエと比較して死亡率指数が増加しました。

このビデオを見た後、ハエを使用して外傷性脳損傷を負わせる方法についてよく理解しているはずです。