Name: 動静脈瘻の障害の新規マウスモデル：詳細の外科的手順 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 10 s
Description: 学ぶ動静脈瘻障害のマウスモデル作成法。静脈と動脈の吻合術を用いてヒトの臨床状況を再現し、血管アクセス合併症の病態生理を解明し、新規治療戦略の開発に貢献する。

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この研究は、オランダ腎臓財団（KJPB 08.0003）からの助成金によって支援されました。 
Carolien Rothuizenは、彼女の研究への貢献が認められています。ホアン・ファムは、病理学の精密検査への支援で認められています。

すべての実験は、ライデン大学医療センターの動物福祉に関する委員会によって承認されました。 1.動物の準備と麻酔<ol><li>三から四パーセントイソフルランで満たされた連続麻酔導入チャンバー内のマウス（1-3ヶ月齢）を麻酔。 </li><li>首と電気かみそりを使用して、左上の脚の内側部分の腹側を剃ると毛を除去するために、テープ片を使用します。 </li><li>両眼に眼軟膏を適用します。 </li><li>鼻換気マスクが固定されている加熱毛布の上に動物を配置します。粘着テープを使用して、鼻マスクにヘッドを固定。 <ol><li>以下の流量で酸素富化空気のセットを使用して1.5-2.0％の濃度でイソフルランを送達：空気0.3リットル/分、100％の酸素0.2リットル/分。麻酔の深さを評価し、必要に応じてイソフルランの濃度を調整するために足の指の間の皮膚をつまみます。 </li></ol></li><li>に動物を固定仰臥位℃で約37に設定されているすべての手足に粘着テープで加熱ブランケット。 </li><li> 0.1ミリグラムの用量で塩化ナトリウム（NaCl）で0.9％に溶解したブプレノルフィンを注入/動物の脇腹に無菌の0.9％NaClを皮下の0.5ミリリットルと一緒kgです。 </li><li>準備されたエリアにクロルヘキシジンチンキに0.5％を適用します。 </li></ol> 2.皮膚切開<ol><li>外科医に向かって頭を顕微鏡下で動物を置きます。 </li><li>マイクロはさみを使用して、腹側頸部の正中線に約1.5センチ縦切開を行います。 </li><li>鉗子で唾液腺をつかみ、それが部分的に傷の外になるまで頭側右の唾液腺を移動させます。 </li></ol> 3.静脈を解剖し、準備<ol><li>識別し、露骨に拡散することにより、その血管周囲組織から完全に右外頸静脈の背内側枝を分析だけ長辺と血管の方向です。 </li><li>解剖静脈の周りにループ（10.0縫合糸）を配置し、それをロックすることなく、1つの結び目を適用します。 </li></ol> 4.胸鎖乳突筋の削除<ol><li>鉗子を使用して、ぶっきらぼうにその境界線に沿って拡散することによりその周囲から右胸鎖乳突筋を分析。孤立した筋肉の下でオープンピンセットを置き、それが6.0縫合糸で近位および遠位連結。その後、焼灼器を使用して筋肉を切除。 </li></ol> 5.共通の頸動脈を解剖し、準備<ol><li>鉗子を使用して、右総頸動脈を特定し、解剖。動脈の操作を補助するために、動脈の周りに6.0縫合糸を配置します。 </li><li>遠位および近位に可能な限り血管クランプを適用します。 </li><li>特殊なマイクロシザーを用いて約1ミリメートルの動脈の真ん中に縦切開を行います。 </li><li>リンスヘパリン溶液[100 IU / mlの]と動脈血管が血液の透明になるまで。 </li><li>必要に応じて幅を血管クランプ[1.1ミリメートル]を一致させるために切開の長さを測定し、調整します。 </li></ol>静脈の6.ライゲーション<ol><li>近位にすでに準備静脈の血管クランプを適用し、静脈の周りに縫合糸を配置します。 </li><li>以前に配置した10.0縫合糸を使用して、できるだけ遠位静脈を縫合糸上に配置され、ライゲートされた止血を使用して静脈に優しい尾トラクションを適用します。 </li><li>ライゲーションにちょうど近位にはさみを使用して静脈をカットします。 </li><li>血管鉗子を使用して、静かに静脈の内腔を開き、ヘパリン溶液[100 IU / mlの]でそれをすすいでください。 </li></ol>吻合パート1の7の作成<ol><li> 6 O &#39;で縫合糸に続く12時の位置に2平方ノットを使用して結節縫合（10.0）と動脈に静脈を接続しますクロック位置。それは自身の軸の周りに回転させることなく動脈に静脈を接続してください。外科的露出を改善するために動物を回転させます。 </li><li>静脈の周りに縫合糸を配置し、止血を使用して穏やかな横方向のトラクションを適用します。 </li><li>同じ結節縫合を使用して、吻合の可視腹側で約3-4追加の縫合糸を配置することによって、吻合を完了します。 </li></ol> 8.ヘパリン投与<ol><li>加熱ブランケット180度回転し、左上肢に顕微鏡の焦点を合わせます。 </li><li>上肢の内側部に縦方向に実行され、皮膚を通して見ることができる血管構造を探して、大腿静脈/動脈/神経束を特定します。直接、長手方法で大腿静脈上記の約1cmのマイクロハサミで切開を行います。 </li><li>慎重に大腿静脈の血管周囲の組織を解剖し、線量Oでヘパリンを注入大腿静脈で0.2 IU /グラムの体重F。 </li></ol>吻合パート2の9創出<ol><li>首のエリアに戻り、静脈の周囲に配置された縫合糸を除去します。 </li><li>その後、静脈の上にして、再度頸動脈の下、頸動脈の下を通る縫合糸（6.0）を配置します。 （ 図1L） </li><li>静脈血管クランプを取り外します。 </li><li>次に、同時にねじることによって時計回りに頸動脈の軸に沿って180°動静脈瘻を完了半分の両方の血管クランプをねじると、縫合糸の端部に内側トラクションを適用します。 </li><li>ステップ7.2で説明されているのと同じやり方で吻合を完了します。 </li></ol> 10.血管クランプの取り外し<ol><li>縫合糸を外し、血管が180°反時計回りにクランプ回転させます。 </li><li>近位血管クランプ続い遠位血管クランプを取り外します。 </li> &lt;李&gt;は優しく、血管鉗子で静脈流出路を閉塞することにより、吻合の開存性を評価します。特許吻合の場合は、事前に閉塞静脈セクションでは、脈動的に拡大していきます。鉗子を使用して、元の解剖学的位置に右の唾液腺を再配置します。 </li></ol> 11.皮膚閉鎖と術後ケア<ol><li>中断のない縫合糸（6.0）と上肢の皮膚を閉じます。 </li><li>中断のない縫合糸（6.0）と首の皮膚を閉じます。 </li><li>加熱ブランケットから動物を削除し、0.5ミリリットルのNaClを0.9％を皮下に注入します。 </li><li>加熱ランプで加熱して暗くケージに動物を置き、それが完全に回復しましょう​​。動物が完全に回復しない場合には、それが原因で手術領域の出血に血行動態ショックを受けないことを確認してください。このような腫れ首や血液の漏れなどの兆候を探してください。 </li><li> buprの最初の注射後約6時間後enorphine、さらに72時間、十分な鎮痛を提供するために、製造業者によって推奨される用量におけるブプレノルフィン皮下の徐放性製剤の単回投与を注入。 </li></ol> 12.組織の収穫<ol><li>メデトミジン（0.5ミリグラム/キログラム）とフェンタニル（0.​​05ミリグラム/ kg）を腹腔内投与し、麻酔薬の混合物を含有ミダゾラム（5mg / kg）で動物を麻酔。 </li><li>非加熱シリコンマットにその足や頬を通して針を挿入することにより、仰臥位で動物を固定。 </li><li>マイクロはさみで首に傷跡の上に約1.5〜2.0センチメートルの切開を行います。 </li><li> AVFを分析し、簡単に識別proximal-、遠位動脈と静脈流出路の周りに縫合糸（6.0）を配置。 </li><li>プロトコルのセクション10.3に記載されているようにAVFの開通性を評価します。 </li><li>内側開腹のuを実行することにより、腹膜腔を開きますマイクロシザーを歌います。 <ol><li>鎖骨中央線に尾側開始ハサミを使用して、左右の腹側胸郭を切断。マイクロはさみを使用して、腹側胸郭の中央部に取り付けられ、その後、ピンセットを用いて頭蓋このセクションを変位されるダイヤフラムを横断。 </li><li>下大静脈を見つけ、マイクロはさみでそれを横断します。 </li></ol></li><li>左心室に針23ゲージ針を挿入し、血管内の流体がほぼ透明になるまで約100 mmHgでの圧力で、PBSで灌流。 </li><li>針を除去することなく、今は約100 mmHgの圧力で10分間、4％ホルマリンで灌流。 </li><li>マイクロハサミで動脈と静脈の両方を横断することにより、AVFを切除し、4％ホルマリン溶液O / Nでそれを沈めます。 </li></ol> 13.組織の埋め込みとセクショニング<ol><li>製造者のprotocoに従ってパラフィンために組織を処理リットル。適用されるプロトコルは、以下のとおりであります。 <ol><li> RTで1時間、エタノール70％に浸します。 2回繰り返します。 </li><li> RTで1時間、エタノール96％に浸します。 2回繰り返します。 </li><li> RTで1時間エタノール99.5％に浸します。一回繰り返します。 </li><li> RTで1.5時間、エタノール99.5％に浸します。 </li><li> RTで1時間キシレン中に100％を浸します。一回繰り返します。 </li><li> 62℃で1時間、パラフィンに浸し。 2回繰り返します。 </li></ol></li><li>静脈流出路は、包埋カセットに垂直に配向されるように、パラフィンにAVFを埋め込みます。 </li><li>ミクロトームを用いて、それぞれが5ミクロンの厚さで30のセクションからなる12連続切片を作成します。そして、各シリアルセクションの、吻合部に​​近い領域で始まる整然と12までの位置1から始まる単一のマウントガラス上の1つのセクションを配置します。 </li></ol>

<ol><li>Rotmans, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+for+Studying+Pathophysiology+of+Hemodialysis+Access%5BTitle%5D)+AND+%22The+Open+Urology+%26+Nephrology+Journal%22%5BJournal%5D)">Animal Models for Studying Pathophysiology of Hemodialysis Access.</a> The Open Urology & Nephrology Journal. 7, 14-21 (2014).</li>
<li>Kwei, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+adaptive+responses+of+the+vascular+wall+during+venous+arterialization+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.J.Pathol%22%5BJournal%5D)">Early adaptive responses of the vascular wall during venous arterialization in mice.</a> Am.J.Pathol. 164 (1), 81-89 (2004).</li>
<li>Castier, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+neointima+lesions+associated+with+arteriovenous+fistulas+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model.</a> Kidney Int. 70 (2), 315-320 (2006).</li>
<li>Krishnamoorthy, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+wall+shear+stress+profiles+influence+the+magnitude+and+pattern+of+stenosis+in+a+pig+AV+fistula%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic wall shear stress profiles influence the magnitude and pattern of stenosis in a pig AV fistula.</a> Kidney Int. 74 (11), 1410-1419 (2008).</li>
<li>Ene-Iordache, B., Cattaneo, L., Dubini, G., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+anastomosis+angle+on+the+localization+of+disturbed+flow+in+%27side-to-end%27+fistulae+for+haemodialysis+access%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol.+Dial.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effect of anastomosis angle on the localization of disturbed flow in 'side-to-end' fistulae for haemodialysis access.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 28 (4), 997-1005 (2013).</li>
<li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+and+intimal+hyperplasia+in+a+novel+murine+model+of+arteriovenous+fistula+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J.Vasc.Surg%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling and intimal hyperplasia in a novel murine model of arteriovenous fistula failure.</a> J.Vasc.Surg. 59 (1), 192-201 (2014).</li>
<li>Rekhter, M., Nicholls, S., Ferguson, M., Gordon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+proliferation+in+human+arteriovenous+fistulas+used+for+hemodialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb%22%5BJournal%5D)">Cell proliferation in human arteriovenous fistulas used for hemodialysis.</a> Arterioscler. Thromb. 13 (4), 609-617 (1993).</li>
<li>Falk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+and+salvage+of+arteriovenous+fistulas%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vasc.+Interv.+Radiol%22%5BJournal%5D)">Maintenance and salvage of arteriovenous fistulas.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 17 (5), 807-813 (2006).</li>
<li>Tordoir, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+evaluation+of+failure+modes+in+autogenous+radiocephalic+wrist+access+for+haemodialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol.+Dial.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Prospective evaluation of failure modes in autogenous radiocephalic wrist access for haemodialysis.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 18 (2), 378-383 (2003).</li>
<li>Dixon, B. S., Novak, L., Fangman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodialysis+vascular+access+survival%3A+upper-arm+native+arteriovenous+fistula%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Kidney+Dis%22%5BJournal%5D)">Hemodialysis vascular access survival: upper-arm native arteriovenous fistula.</a> Am. J. Kidney Dis. 39 (1), 92-101 (2002).</li>
<li>Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+arteriovenous+fistula+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vasc.+Interv.+Radiol%22%5BJournal%5D)">The mouse arteriovenous fistula model.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 20 (7), 946-950 (2009).</li>
<li>Kang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+and+systemic+hemodynamic+responses+following+the+creation+of+a+murine+arteriovenous+fistula%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Regional and systemic hemodynamic responses following the creation of a murine arteriovenous fistula.</a> Am. J. Physiol Renal Physiol. 301 (4), F845-F851 (2011).</li>
<li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin+is+a+key+regulator+of+outward+remodeling+in+arteriovenous+fistulas%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Vasc.+Endovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Elastin is a key regulator of outward remodeling in arteriovenous fistulas.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 49 (4), 480-486 (2015).</li>
<li>Kennedy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+renal+failure+cause+an+atherosclerotic+milieu+in+patients+with+end-stage+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Does renal failure cause an atherosclerotic milieu in patients with end-stage renal disease.</a> Am. J. Med. 110 (3), 198-204 (2001).</li>
<li>Cheung, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerotic+cardiovascular+disease+risks+in+chronic+hemodialysis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Atherosclerotic cardiovascular disease risks in chronic hemodialysis patients.</a> Kidney Int. 58 (1), 353-362 (2000).</li>
<li>Lee, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severe+venous+neointimal+hyperplasia+prior+to+dialysis+access+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol.+Dial.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Severe venous neointimal hyperplasia prior to dialysis access surgery.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 26 (7), 2264-2270 (2011).</li>
<li>Kokubo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CKD+accelerates+development+of+neointimal+hyperplasia+in+arteriovenous+fistulas%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">CKD accelerates development of neointimal hyperplasia in arteriovenous fistulas.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 20 (6), 1236-1245 (2009).</li>
</ol>

著者らは、開示することは何もありません。

AVFは、血液透析治療でアキレス腱であると考えられます。残念ながら、AVFはまだ失敗8-10の高い数に苦しんでいます。根底にあるメカニズムに関する広範な研究にもかかわらず、正確な病態生理は不明のまま。 AVFの故障のための多数のマウスモデルは、既に文献2,3,11,12に記載されています。しかし、これらのモデルはいずれも、ほとんどの臨床状況で使用されている動脈側吻合構成に静脈末端を組み込むません。得られた血行力学的プロファイルは、血管リモデリングにおいて重要な役割を果たしているので、これは非常に適切です。また、モデルのいくつかは、臨床現場で使用されていない動脈と静脈2,11の間の接続のための合成カフを使用していました。 臨床的関連性を改善するために、我々は、したがって、動脈側吻合部への一方的な静脈端がjuguの枝の間に作成されたマウスモデルを開発しましたLAR静脈および結節縫合6と共通の頸動脈。このモデルでは重要な組織形態学的変化は、外側に、最終的にAVFの故障につながる、内膜肥厚を改造し、プ...

機能的な血管アクセス導管は生き続けるために慢性血液透析に依存腎不全患者のために極めて重要です。動静脈瘻（AVF）の建設は、現在、血管アクセスのための好ましい選択肢です。しかし、AVF関連した合併症は、慢性血液透析を受けている患者のための罹患率の主要な原因を構成しています。広範な科学的な努力にもかかわらず、小説のどれもAVFの耐久性の大幅な改善をもたらすでしたAVFへのアクセスに関連した合併症を減らすために近づいていません。この残念​​な進歩の一部は、血液透析アクセス障害の根底にある病態生理の不完全な理解に関係します。 AVアクセス障害の病態生理を解明するために、厳密にヒト病理を模倣する動物モデルは、最も重要です。この点で、動物種だけでなく、吻合部位、必要な抗凝固療法とサージ後のフォローアップの期間ryは、アカウント1に入れなければなりません。大型動物は、新たな治療戦略を開発することを目的とした介入研究のために最も適しているが、マウスモデルは、トランスジェニックマウスの在庫状況によりAV・アクセス障害の根底にある分子メカニズムでより多くの洞察を得るための大きな可能性を持っています。また、マウスの大多数は、より大きな動物での使用に比べて低コストで、この目的のために使用することができます。 AVF障害の最初のマウスモデルはKweiとらによって 2004年に記載された。このモデルでは2、のAVFは、血管内カテーテルを使用して、エンド・ツー・エンドの方法で頸動脈と頸静脈を用いて構築しました。このモデルは、エンドツーエンドの構成及び血管内カテーテルの存在が人間のAVFのためのこのモデルの有効性を制限するが、のAVFの早期静脈適応を研究するのに有用であり得ます。改良されたAVFモデルはCastierやらによって導入された。3最後のました頸動脈は、頸静脈の側に接続されています。しかしながら、血液透析患者でのAVFは通常、動脈の側に静脈の端部をanatomizingによって構成されています。それは導管4内の血行力学的プロファイルを決定するため、AVFの正確な構成は、AVアクセスモデルの重要な特徴です。後者は、機能不全および内膜肥厚（IH）5のその後の発展を内皮細胞への重要な貢献者です。 小説のマウスモデルは、最近、ヒト6で利用されているものと同一の解剖学的構成で開発されました。このモデルでは、AVFは断続縫合で総頸動脈の側に外頸静脈の枝の先端を吻合することにより、C57BL / 6マウスに作成されます。本論文では、複雑な病態を解明することを目的とし、このマウスモデルの普及を促進するために、このモデルの顕微手順に焦点を当てます血液透析アクセス失敗の。

<table><tbody><tr><td>解剖microsocpe</td><td>ライカ</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>鉗子</td><td>Medicon</td><td>07.61.25</td><td></td></tr><tr><td>血管鉗子</td><td>S&T</td><td>JFL-3D.2</td><td></td></tr><tr><td>血管鉗子</td><td>S&T</td><td>D-5a.2</td><td></td></tr><tr><td>鉗子</td><td>Roboz</td><td>SS/45</td><td></td></tr><tr><td>マイクロハサミ 5mm刃</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>マイクロハサミ 2mm刃</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>ハサ</td>ミ <td>メディコン</td><td>05.12.21</td><td></td></tr><tr><td>クリップアプライヤー 1</td><td>S&T</td><td>CAF-4</td><td></td></tr><tr><td>血管クランプ 1</td><td>S&T</td><td>B-1V</td><td></td></tr><tr><td>クリップ アプライヤー 2</td><td>BBraun</td><td>FE572K</td><td></td></tr><tr><td>血管クランプ 2</td><td>BBraun</td><td>FE740K</td><td></td></tr><tr><td>止血鉗子</td><td>BBraun</td><td>BH110</td><td></td></tr><tr><td>10.0 縫合糸</td><td>BBraun</td><td>G1117041</td><td></td></tr><tr><td>6.0 縫合糸</td><td>BBraun</td><td>768464</td><td></td></tr><tr><td>焼灼器</td><td>ファイン サイエンス ツール</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>Medicon</td><td>11.82.18</td><td></td></tr><tr><td>眼軟膏</td><td>Pharmachemie</td><td>41821101</td><td></td></tr><tr><td>クロルヘキシジンチンキ剤 0,5%</td><td>ライデン大学医療センター</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>ヘパリン</td><td>レオ ファーマ</td><td>012866-08</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td>RB ファーマシューティカルズ&nbsp;</td><td></td><td></td>283732</tr><tr><td>イソフルラン</td><td>Pharmachemie</td><td>45,112,110</td><td></td></tr><tr><td>麻酔マスク</td><td>マーストリヒト大学</td><td>カスタムメイド</td><td></td></tr><tr><td>ミダゾラム</td><td>Actavis</td><td>AAAC6877</td><td></td></tr><tr><td>デクスメデトミジン</td><td>オリオン</td><td>141-267</td><td></td></tr><tr><td>フェンタニル</td><td>ビファーマ</td><td>15923002</td><td></td></tr><tr><td>連続麻酔薬導入チャンバー</td><td>Vet-techソリューション</td><td>AN010R</td><td></td></tr></tbody></table>

動静脈瘻の障害の新規マウスモデル：詳細の外科的手順

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

動静脈瘻(AVF)は、不十分なリモデリングと内膜過形成による多数の失敗にまだ苦しんでおり、正確な病態生理学は不明のままです。病態生理学を解明するために、AVF不全のマウスモデルが開発され、吻合の構成が臨床現場での好ましい状況に類似しています。断続縫合糸を使用して、外頸静脈の枝の静脈端を総頸動脈の側に接続することによりAVFが作成されるモデルが説明されました。組織学的レベルでは、失敗したヒトAVFにも見られる静脈流出路の進行性狭窄性内膜病変が観察されました。この手順は、動物の寸法が小さいため技術的に困難な場合がありますが、十分なトレーニングを行った結果、97%の手術成功率を達成することができました。マウスモデルの主な利点は、トランスジェニック動物が利用できることです。AVFの失敗の原因となるさまざまな提案されたメカニズムを考慮すると、血管のリモデリングに関与する可能性のある遺伝子を無効にすることは、AVFの失敗の複雑な病態生理学を解明するのに役立ちます。

吻合（ 図1）を作成した後、開存はまもなく血管鉗子で静脈流出路を閉塞することによって評価されるべきです。吻合は、特許である場合には、閉塞に対する血管管の近位は明らかに拍動の方法で展開する必要があります。さらに、開通性を効果的に血管造影（ 図2）として機能する近赤外蛍光透視法（NIRF）を使用して確認されます。 （図2）に示されているように外科手術の失敗は、吻合部の閉塞をもたらすことができます。この障害は狭すぎる吻合領域、血管のねじれ、不十分なヘパリン投与量または裏側に吻合の正面側を接続する偶発的縫合糸の配置によって引き起こされる場合があります。 組織学的レベルでは、AVFにおける血管リモデリングのプロセスはエレガントなこのモデルを用いて調べることができます。 AVFにおける血管リモデリングはの結果として起こります血流および圧力の増加。マウスでは、この応答は、手術後最初の2週間での管腔面積の増大をもたらす（例えば、外側に改造）円周の増加によって特徴...

ここでは、臨床的に関連性のある吻合構成が組み込まれた動静脈瘻(AVF)不全のマウスモデルを提示します。このモデルは、病態生理学の研究や可能な治療介入のテストに使用できます。

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

この手順の全般的な目的は、動静脈瘻不全の病態生理を模倣したin vivo動物モデルを作製することです。この手法を用いることで、動静脈瘻不全の病態生理を解明でき、世界中の研究者が血管アクセス関連の合併症を予防するための新しい治療戦略を開発するのに役立ちます。この技術の主な利点は、ヒトで利用される臨床状況に密接に類似した、静脈端から動脈部位への吻合を組み込んでいる点にあります。本手順は、私の研究室の優秀な博士課程学生であるChun Yu Wongによって実演されます。1〜3ヶ月齢のマウスをイソフルランで麻酔した後、頸部の腹側と左前肢の内側の被毛を剃毛してください。緩んだ毛はテープを用いて取り除きます。次に、両眼に眼軟膏を塗布し、鼻用ベンチレーションマスク付きの37 °C加温ブランケットを準備して、動物の頭部を粘着テープで固定します。マスクに、1.5%から2%のisofluraneを空気流量0.3 L/minで、100%酸素を0.2 L/minの流量で送り込みます。足指の間の皮膚をつまみ、麻酔深度を確認します。必要に応じてイソフルランの濃度を調整します。次に、マウスの四肢をテープで固定し、ブランケットの上で仰臥位に固定します。その後、0.9% sodium chloride 0.5 mLに溶解したブプレノルフィンを、左側腹部に皮下投与します。0.5%クロルヘキシジンを用いて切開部位の皮膚を洗浄し、準備を完了させます。解剖顕微鏡下で、首の中央線に沿って約1.5 cmの縦切開を加え、唾液腺を露出させます。右側の唾液腺を頭側へ移動させて傷口の外に部分的に出し、右頸静脈を露出させます。次に、静脈の背内側枝を探し、血管の直横にある組織を広げることで、血管周囲組織から鈍的に剥離します。その後、剥離した静脈に10/0縫合糸のループをかけ、ゆるい結節を作ります。次の主要な手順は、胸鎖乳突筋を除去することです。まず、ピンセットを用いて右胸鎖乳突筋の周囲を鈍的に剥離します。次に、6/0縫合糸を2回ループさせて筋肉を結紮し、電気焼灼器で切除します。続いて、総頸動脈を剥離し、準備します。特定後、その周囲に6/0縫合糸をかけ、動脈の可能な限り遠位側と近位側に血管鉗子を装着します。次に、マイクロシザースを用いて、動脈に1 mmの縦切開を加えます。切開後、ヘパリン溶液で動脈を洗浄して血液を除去し、血管鉗子の幅に合わせて切開部の長さを測定し調整します。次に、静脈の周囲に糸を配置し、近位側に血管クランプを装着します。止血鉗子を用いて尾側へ緩やかに牽引し、あらかじめ配置しておいた10/0縫合糸を用いて、可能な限り遠位側で静脈を結紮します。結紮後、血管腔にアクセスするために、結紮部の直近位側で静脈を切断します。血管鉗子で管腔をゆっくりと拡張し、ヘパリンで静脈を挙上させてから吻合に進みます。吻合を開始す

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Medicine

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分岐人間の脳動脈瘤を模倣する動脈分岐部動脈瘤の顕微作成のための最適化手法が説明されています。静脈のポーチは、両方の総頚動脈の人工的に作られた真の分岐部に縫合する。容易に顕微技術と積極的な術後の抗凝固療法と鎮痛が最小化罹患率と高い動脈瘤の開存率につながる。...

ウサギモデルにおける顕微静脈ポーチ動脈 - 分岐瘤：技術的側面

目標は単純で再現性のある動静脈瘻を作り出すことである。この方法は、縫合糸や接着剤の接着剤を使用しません。したがって、サンプルが分析のために異物のうちの量で用いることができる。...

マウスAortocaval瘻の技術的な側面

我々は、成体マウスにおける脳静脈性高血圧の信頼性モデルを作成するための方法を記載している。このモデルは、広くラットに記述され、テストされている。マウスにおけるこの新たな対応物の遺伝子改変動物を使用する可能性を開き、それによってモデルの適用を広げる。...

成体マウス静脈性高血圧モデル：外頸静脈吻合部の総頸動脈。

マウスで大動脈を穿刺し、下大静脈（IVC）を通してマウスに大動脈瘻を作成した後、薬物を含む溶液を同じ針でIVCに注入し、その後インキュベーションします。この方法により、外部経路と比較して、静脈内皮へのより堅牢な薬物送達が可能になります。...

マウスの動静脈瘻内皮への管腔内薬物送達

大器内膜瘻は、両方の壁を通して下の静脈カバに尿の赤外線大腸を穿刺することによって作成され、その後、劣った静脈カバの部分的なライゲーションを介してその流出における狭窄の作成が行われた。この再現可能なモデルは、中央静脈狭窄症の研究に使用することができる。...

流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

我々は、静脈および動脈壁が血管脱血を避け、橈骨動脈が切断されない放射線頭蓋動静脈瘻(RC-AVF)を作成するための修正ノータッチ技術(MNTT)を提示する。...

修正されたノータッチ技術による前腕のラジオ頭蓋動静脈瘻の作成

このプロトコルは、マウスの総腸骨動静脈瘻作成の外科的ステップを詳述しています。我々は、血液透析アクセス関連の四肢の病態生理を研究するためにこのモデルを開発しました。...

血液透析アクセス関連手機能障害のマウスモデル

本プロトコルは、修正されたノータッチ技術を使用してウサギに動静脈瘻を作成することを提案しています。この技術は、静脈周囲組織の解剖または動脈の切断なしに、総頸動脈および外頸静脈の左右の吻合を含む。...

ウサギの動静脈瘻構築のための改良技術

このプロトコルは、腹部動静脈瘻(AVF)のマウスにおける出生後の右心室容積過負荷(VO)モデルの確立と確認を示しており、VOが出生後の心臓の発達にどのように寄与するかを調査するために適用できます。...

出生後右心室容積過負荷マウスモデルの確立と確認

ここでは、大腿動脈吻合のマウスモデルを紹介し、血管吻合狭窄を研究し、シミュレートするための貴重な動物モデルを研究者に提供します。この開発は、この疾患の根底にある病態生理学の理解を深め、血管疾患のより正確で効果的な研究を促進するために重要です。...

大腿動脈吻合管狭窄症に対するマウスモデルの開発

学ぶ動静脈瘻障害のマウスモデル作成法。静脈と動脈の吻合術を用いてヒトの臨床状況を再現し、血管アクセス合併症の病態生理を解明し、新規治療戦略の開発に貢献する。

動静脈瘻の障害の新規マウスモデル：詳細の外科的手順

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