Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Salvatore Coniglio; Ian Miller; Marc Symons; Jeffrey E. Segall

doi:10.3791/53990

共培養アッセイは、神経膠芽腫の浸潤のマクロファージとミクログリアの刺激を研究します

JoVE Journal
Cancer Research

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Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

共培養アッセイは、神経膠芽腫の浸潤のマクロファージとミクログリアの刺激を研究します

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09:23 min

October 20, 2016

DOI: 10.3791/53990-v

Salvatore Coniglio¹, Ian Miller², Marc Symons³, Jeffrey E. Segall⁴

¹New Jersey Center for Science, Technology and Mathematics,Kean University, ²Department of Physiology and Medical Physics,Royal College of Surgeons in Ireland, ³The Feinstein Institute for Medical Research at North Shore-LIJ, ⁴Department of Anatomy and Structural Biology, Gruss Lipper Biophotonics Center,Albert Einstein College of Medicine

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癌の悪性挙動を理解するには、腫瘍細胞がマクロファージなどの腫瘍微小環境の構成要素とどのように相互作用するかについての正確なモデルを作成する必要があります。ここでは、膠芽腫細胞と腫瘍関連マクロファージおよびミクログリアとの相互作用を研究するための2つの方法について説明し、膠芽腫の浸潤への影響

が評価されます。

この実験の全体的な目標は、in vitroアッセイで浸潤中の膠芽腫細胞とミクログリアおよびマクロファージとの相互作用をモデル化することです。したがって、この方法は、悪性腫瘍への進行中に微小環境の細胞タイプであるマクロファージとのがんの相互作用をどの化合物または治療法が妨げることができるかなど、腫瘍微小環境分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点の1つは、比較的簡単に実行でき、妥当な時間で完了でき、in vivoでの膠芽腫の浸潤を正確にモデル化しているように見えることです。

まず、ミリスチン酸ホルボールアセテートを使用して、以下のように目的の細胞株を分化します。まず、1.5ミリリットルの培地にTHP-1細胞を1.5ミリリットルの培地に2〜3回10回〜3回プレート化し、6ウェル培養プレートに載せます。めっき直後にPMAを100ナノモル添加し、摂氏37度、CO25%で48時間インキュベー

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