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DOI: 10.3791/54868-v
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私たちは、アルツハイマー病のげっ歯類モデルにおいて単核食細胞によって脳アミロイドβ(Aβ)食作用のインシリコモデリング (q3DISM) で定量的な3Dのための方法論を開発しました。この方法は、 インビボで実質的に任意の食イベントの定量のために一般化することができます。
この定量的3Dインシリコモデリング(q3DISM技術)の全体的な目標は、アルツハイマー病のげっ歯類モデルの脳内の単核食細胞によるアミロイドベータの取り込みを定量化することです。この方法は、アルツハイマー病患者の脳に沈着して老人斑を形成するアミロイドベータのクリアランスを定量化するためのアルツハイマー病研究の分野における差し迫ったニーズに対応します。この技術は初めて、in vivo でのマクロファージによるアミロイドベータの真の 3-D 再構築と定量を可能にします 私たちは、in vivo でマイクロファージの食作用を視覚化および定量化するための堅牢なツールが必要だったため、アミロイドベータ沈着の研究に cued 3-Dism を使用し始めました。
この手法は、実験的なアルツハイマー病治療薬の試験において、どの薬剤がマクロファージを刺激してアミロイドβを効率的に除去するかを評価するのに役立つ可能性があります。組織サンプルを免疫染色する準備ができたら、疎水性バリアペンで囲まれた組織領域にブロッキングバッファーを充填し、加湿チャンバー内で室温で1時間インキュベートします。インキュベーションの終了時に、ブロッキングバッファーを目的の最初の一次抗体と交換し、加湿チャンバー内で摂氏4度で一晩
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