2017年10月22日
マウスでスリーブを用いた同所性同種大動脈移植モデルを提案します。それは非常に急速な吻合法のことで、血管疾患の研究に用いることができます。
この手順では、ドナーの大動脈を視能整列位に置き、表在性咬傷を栄養血管で採取します。フェイスマスクを介して、1.5体積パーセントのイソフルランと100%酸素の混合物でマウスを麻酔します。マウスを仰臥位のプラットフォームに置き、すべての脚を手術台にテープで固定します。
手術中の乾燥を防ぐために、眼科用軟膏を目に置きます。.反射神経をチェックし、後足をつまんでマウスに十分な麻酔がかけられていることを確認します。腹部からすべての髪を取り除きます。
脱毛クリームを塗るか、シェーバーを使用してください。無菌条件下で操作を行います。腹部を消毒します。
ドナー大動脈を切除するには、腹部の正中線切開を行い、腸を手動で右に引っ込めます。パウダーフリーの手袋を使用して、腸を横にそっと手動で反射させます。生理食塩水で濡らしたガーゼの上に腸を置き、湿らせます。
ピンセットによる鈍的解剖を使用して、腹部大動脈を周囲の組織から非常に慎重に解剖します。ピンセットを使用して、腎動脈と大静脈からの分岐部との間の大動脈のセグメントを解剖します。このセグメントのすべての小さな枝を11-0モノフィラメントシングル縫合糸を使用して固定します。
大動脈を切除する前に、50単位のヘパリンを含む0.5ミリリットルの生理食塩水を下大静脈に注入します。大動脈の部分が除去される前に、ドナー動物に放血させてください。移植片を生理食塩水で完全にすすぎ、その後すぐに氷のように冷たい生理食塩水の容器に入れます。
レシピエントの準備は、フェイスマスクを通して動物に麻酔をかけ、毛を取り除き、上記のように消毒し、剣状突起から骨盤への正中線切開をメスで行います。リトラクターで腹壁を引っ込めます。腸を生理食塩水で湿らせたガーゼで包み、動物の右側に非常に穏やかに移動します。
腎動脈の近位と遠位の分岐部の間の腎下大動脈をピンセットで解剖します。このセグメントのすべての小さな枝を11-0モノフィラメントシングル縫合糸を使用して固定します。大動脈の近位部と遠位部を6-0シングルシルク縫合糸でクランプします。
クランプの間の中央で大動脈を分割し、切り口の端をヘパリン化生理食塩水で洗浄して、内腔を洗い流します。移植片を整形外科の位置に置きます。11-0モノフィラメントを使用した縫合糸によるスリーブ技術を使用して吻合を行います。
この方法では、供給容器の端部が受容器内に置かれます。腎下レシピエント大動脈の端をドナー大動脈の近位端に配置します。同様に遠位吻合を行います。
ドナー大動脈の遠位端をレシピエント大動脈の遠位端内に配置します。ドナーとレシピエントの大動脈の完全な位置合わせを確保することにより、大動脈のねじれを避けるように注意してください。クランプが解放される瞬間は、手順の非常に重要なステップであり、非常に慎重に実行する必要があります。
吻合が正常であることを確認した後、クランプを解放します。最初に遠位クランプを静かに解放し、次に近位クランプを離します。このようにして、高圧側が解放される前に壁を一緒に保持するための低圧があります。
移植片はすぐに灌流され、脈拍が見えます。絹の残りをそっと取り除きます。腹部の内容物を腹腔に戻し、ランニング3-0ポリグリコール酸縫合糸を使用して創傷を閉じます。
麻酔を終了する前に、ブプレノルフィン0.05ミリグラム/キログラムをマウスに投与します。.移植後6週間の移植片の剖検写真と、その超音波3次元およびBモードビューの例を紹介します。写真はグラフトの開存性を示しています。
グラフトによって示されるルーメン寸法に変化はありません。また、狭窄や動脈瘤の形成は認められていません。移植された大動脈には、組織学的染色および免疫組織化学的染色による有意な病変は認められなかった。
核はDAPIによって対比染色されました。結論として、この非常に迅速な吻合法は、遺伝子操作マウスの血管疾患の研究に使用できる可能性があります。
本記事では、迅速な吻合を可能にするスリーブ法を用いたマウスにおける正位大動脈移植モデルを紹介します。この手法は、血管疾患の研究に活用することができます。
マウスにおける正位大動脈移植のスリーブ法は、低失敗率で迅速かつ再現可能な血管移植を可能にし、血管生物学の高スループット研究を支援します。このモデルは、前臨床の血管疾患研究におけるメカニズムのリスク低減とターゲット検証を促進し、遺伝学的および薬理学的介入を評価するための堅牢なプラットフォームを提供します。その操作の簡便さと信頼性は、心血管系の研究開発におけるポートフォリオの選別やトランスレーショナルな継続性に有用です。
このマウス大動脈移植モデルは、血管疾患研究における発見から前臨床に至る連続的なプロセスに組み込まれており、メカニズム研究とトランスレーショナルな検証を橋渡しするものです。