Name: 魚油サプリメントの脂質プロファイルの迅速な評価のための強力なツールとしてNMR分光法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-01T11:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: 学ぶNMR分光法による魚油サプリメントの脂質プロファイル解析法。迅速かつ頑健な分析で脂肪酸の位置分布を定量的・定性的に評価し、栄養科学研究への応用価値を示します。

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この作品は、オハイオ州立大学の健康ディスカバリーテーマのための食品とオハイオ州立大学食品科学省によってサポートされていました。著者は、ペンシルベニア州立大学でオハイオ州立大学のNMR施設とNMR施設に感謝したいと思います。

<ol><li>Simopoulos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+ratio+of+omega-6%2Fomega-3+essential+fatty+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">The importance of the ratio of omega-6/omega-3 essential fatty acids.</a> Biomed. Pharmacother. 56 (8), 365-379 (2002).</li>
<li>Goodnight, S. H. Jr, Harris, W. S., Connor, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+dietary+omega+3+fatty+acids+on+platelet+composition+and+function+in+man%3A+a+prospective%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The effects of dietary omega 3 fatty acids on platelet composition and function in man: a prospective, controlled study.</a> Blood. 58 (5), 880-885 (1981).</li>
<li>Harper, C., Jacobsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+omega-3+fatty+acids+and+the+prevention+of+coronary+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of omega-3 fatty acids and the prevention of coronary heart disease.</a> Am. J. Cardiol. 96 (11), 1521-1529 (2005).</li>
<li>Kremer, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-dose+fish+oil+on+rheumatoid+arthritis+after+stopping+nonsteroidal+antiinflammatory+drugs.+Clinical+and+immune+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+and+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Effects of high-dose fish oil on rheumatoid arthritis after stopping nonsteroidal antiinflammatory drugs. Clinical and immune correlates.</a> Arthritis and Rheumatol. 38 (8), 1107-1114 (1995).</li>
<li>Malasanos, T., Stackpoole, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+omega-3+fatty+acids+in+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Biological effects of omega-3 fatty acids in diabetes mellitus.</a> Diabetes Care. 14, 1160-1179 (1991).</li>
<li>Han, Y., Wen, Q., Chen, Z., Li, P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1876610211019503">Review of Methods Used for Microalgal Lipid-Content Analysis.</a> Energ. Procedia. 12, 944-950 (2011).</li>
<li>Guillén, M., Ruiz, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.200300799/abstract">1H nuclear magnetic resonance as a fast tool for determining the composition of acyl chains in acylglycerol mixtures.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 105, 502-507 (2003).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, I., Aubourg, S. P., Addeo, F., Paolillo, L. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/237943502_Proton_Nuclear_Magnetic_Resonance_Rapid_and_Structure-Specific_Determination_of_o-3_Polyunsaturated_Fatty_Acids_in_Fish_Lipids">Proton nuclear magnetic resonance rapid and structure specific determination of ω-3 polyunsaturated fatty acids in fish lipids.</a> J. Am Oil Chem Soc. 70, 225-228 (1993).</li>
<li>Igarashi, T., Aursand, M., Hirata, Y., Gribbestad, I. S., Wada, S., Nonaka, M. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/226798699_Nondestructive_Quantitative_Acid_and_n-3_Fatty_Acids_in_Fish_Oils_by_High-Resolution_1H_Nuclear_Magnetic_Resonance_Spectroscopy">Nondestructive quantitative acid and n-3 fatty acids in fish oils by high-resolution 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 77, 737-748 (2000).</li>
<li>Plans, M., Wenstrup, M., Saona, L. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-015-2666-8">Application of Infrared Spectroscopy for Characterization Dietary Omega-3 Oil Supplements.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 92, 957-966 (2015).</li>
<li>Jian-hua, C. I. A. <a target="_blank" href="http://pubs.sciepub.com/jfnr/2/2/1/">Near-infrared Spectrum Detection of Fish Oil DHA Content Based on Empirical Mode Decomposition and Independent Component Analysis.</a> J Food Nutr Res. 2 (2), 62-68 (2014).</li>
<li>Millen, A. E., Dodd, K. W., Subar, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+vitamin%2C+mineral%2C+nonvitamin%2C+and+nonmineral+supplements+in+the+United+States%3A+The+1987%2C+1992%2C+and+2000+National+Health+Interview+Survey+results%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Am.+Diet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Use of vitamin, mineral, nonvitamin, and nonmineral supplements in the United States: The 1987, 1992, and 2000 National Health Interview Survey results.</a> J. of Am. Diet Assoc. 104 (6), 942-950 (2004).</li>
<li>Dwyer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+developing+analytical+and+label-based+dietary+supplement+databases+at+the+NIH+office+of+dietary+supplements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Compos.+Anal%22%5BJournal%5D)">Progress in developing analytical and label-based dietary supplement databases at the NIH office of dietary supplements.</a> J. Food Compos. Anal. 21, S83-S93 (2008).</li>
<li>Monakhova, Y. B., Ruge, I., Kuballa, T., Lerch, C., Lachenmeier, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+coenzyme+Q10+in+food+supplements+using+1H+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Vitam.+Nutr.+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of coenzyme Q10 in food supplements using 1H NMR spectroscopy.</a> Int. J. Vitam. Nutr. Res. 83 (1), 67-72 (2013).</li>
<li>Monakhova, Y. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardless+1H+NMR+determination+of+pharmacologically+active+substances+in+dietary+supplements+and+medicines+that+have+been+illegally+traded+over+the+internet%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Test.+Anal%22%5BJournal%5D)">Standardless 1H NMR determination of pharmacologically active substances in dietary supplements and medicines that have been illegally traded over the internet.</a> Drug Test. Anal. 5 (6), 400-411 (2013).</li>
<li>Berger, S., Braun, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerger%2C+S+%22200+and+more+NMR+experiments%3A+a+practical+course%22">200 and more NMR experiments: a practical course</a>. , Wiley-VCH. Weinheim. (2004).</li>
<li>Knothe, G., Kenar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+fatty+acid+profile+by+1H-NMRspectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Lipid+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Determination of the fatty acid profile by 1H-NMRspectroscopy.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 106, 88-96 (2004).</li>
<li>Sacchi, R., Medina, J. I., Aubourg, S. P., Paolillo, I. G. L., Addeo, F. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00032a016">Quantitative High-Resolution 13C NMR Analysis of Lipids Extracted from the White Muscle of Atlantic Tuna (Thunnus alalunga).</a> J. Agric. Food Chem. 41 (8), 1247-1253 (1993).</li>
<li>Dais, P., Misiak, M., Hatzakis, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/277335832_Analysis_of_marine_dietary_supplements_using_NMR_spectroscopy">Analysis of marine dietary supplements using NMR spectroscopy.</a> Anal. Methods. 7 (12), 5226-5238 (2015).</li>
<li>Pickova, J., Dutta, P. C. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-003-0809-7">Cholesterol Oxidation in Some Processed Fish Products.</a> J. Anal. Oil Chem. Soc. 80 (10), 993-996 (2003).</li>
<li>Siddiqui, N., Sim, J., Silwood, C. J. L., Toms, H., Iles, R. A., Grootveld, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicomponent+analysis+of+encapsulated+marine+oil+supplements+using+high-resolution+1H+and+13C+NMR+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+of+Lipid+Rsrch%22%5BJournal%5D)">Multicomponent analysis of encapsulated marine oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR techniques.</a> J. of Lipid Rsrch. 44 (12), 2406-2427 (2003).</li>
<li>Sua´rez, E. R., Mugford, P. F., Rolle, A. J., Burton, I. W., Walter, J. A., Kralovec, J. A. <a target="_blank" href="http://link.springer.com/article/10.1007/s11746-010-1638-2">13C-NMR Regioisomeric Analysis of EPA and DHA in Fish Oil Derived Triacylglycerol Concentrates.</a> J. Am. Oil Chem. Soc. 87, 1425-1433 (2010).</li>
<li>Youlin, X. A., Moran, S., Nikonowiczband, E. P., Gao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Z-restored+spin-echo+13C+1D+spectrum+of+straight+baseline+free+of+hump%2C+dip+and+roll%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Chem%22%5BJournal%5D)">Z-restored spin-echo 13C 1D spectrum of straight baseline free of hump, dip and roll.</a> Magn. Reson. Chem. 46, 432-435 (2008).</li>
<li>Tengku-Rozaina, T. M., Birch, E. J. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ejlt.201300357/abstract">Positional distribution of fatty acids on hoki and tuna oil triglycerides by pancreatic lipase and 13C NMR analysis.</a> Eur. J. Lipid Sci. Technol. 116 (3), 272-281 (2014).</li>
<li>Berry, S. E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triacylglycerol+structure+and+interesterification+of+palmitic+and+stearic+acid-rich+fats%3AAn+overview+and+implications+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Triacylglycerol structure and interesterification of palmitic and stearic acid-rich fats:An overview and implications for cardiovascular disease.</a> Nutr. Res. Rev. 22 (1), 3-17 (2009).</li>
<li>Hunter, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+effects+of+dietary+fatty+acids+as+related+to+their+position+on+triglycerides%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Studies on effects of dietary fatty acids as related to their position on triglycerides.</a> Lipids. 36, 655-668 (2001).</li>
<li>Vlahov, G. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1097-458X(199805)36:5%3C359::AID-OMR274%3E3.0.CO;2-Z/abstract">Regiospecific analysis of natural mixtures of triglycerides using quantitative 13C nuclear magnetic resonance of acyl chain carbonyl carbons.</a> Magnetic Res. in Chem. 36, 359-362 (1998).</li>
</ol>

著者は、開示することは何もありません。

トラブルシューティングのための変更と戦略 スペクトル品質 。 NMR信号の線幅及びNMRスペクトルの分解能は、従って、磁場の均一性を最適化するためのプロセスである、シミングに大きく依存します。ルーチン分析のために、1Dシミングが適切であると3Dシミングは、それが定期的にNMR員によって行われることを考えると、必要とされません。そうでない場合、3Dシミングは、H 2 Oの0.6 mLを含む試料を用いて分析前に実行されなければならない：D 2 O（90:10）。より良く、より速いシミングを達成するために、サンプルは、それが磁石のボア内に配置される前に、段階的な深さゲージを使用して、無線周波数（RF）コイルの励磁/検出領域の中心にする必要があります。シミングに影響を与える別の要因は、10~20ヘルツのスピン速度でサンプルを回転しています。このスピン速度でサンプルを回転すると、ラジアルシムを改善するが（X、Y、XY、XZ、YZ、X 2 -Y 2、 等 ）、そ...

食餌中のn-3脂肪酸の摂取は、心疾患1、2、3、4、炎症性疾患および糖尿病5のように、いくつかの状態に対して有益であることが証明されています。西洋食は、n -3脂肪酸の貧しい考えられているので、魚油サプリメントの消費量は、nを改善することが推奨され-6 / N -3消費者の栄養1のバランス。魚油サプリメントの消費量の最近の増加にもかかわらず、質問は、これらの製品のいくつかの安全性、信頼性、および品質について残ります。魚油サプリメントの迅速かつ正確な組成分析は、適切にこれらの商用製品の品質を評価し、消費者の安全を確保するために不可欠です。 魚油サプリメントを評価するための最も一般的な方法論Sは、ガスクロマトグラフィー（GC）及び赤外分光法（IR）です。これらは非常に敏感な方法ですが、彼らはいくつかの欠点がある6。 GC分析は、個々の化合物の分離および誘導体が7必要であり、脂質酸化を分析8,9の間に発生する可能性があるため、時間がかかり（4~8時間）です。 IR分光法を定量することができるがIRバンドは、単一化合物10に起因することが可能な例外はあるが、予測モデルは、部分最小二乗回帰（PLSR）を使用して構築する必要があります。 PLSR解析11の時間を増大させる多数のサンプルの分析を必要とします。このため、魚油多数のサンプルの正確かつ迅速な分析を可能にする新しい分析手法の開発に関心が高まっています。このようオフィとしての組織国立衛生研究所（NIH）と食品医薬品局（FDA）でのサプリメントのCE（ODS）は、これらの新しいメソッド12、13を開発するための公式分析化学者協会（AOAC）と協力してきました。 スクリーニングおよびそのような栄養補助食品などの多成分マトリックスを評価するための最も有望な分析方法の一つは、核磁気共鳴（NMR）分光法14、15です。 NMR分光法は、いくつかの利点を有する：それは非破壊的かつ定量的な技術は、それはサンプル調製に最小限必要であり、優れた精度と再現性を特徴とします。それは、溶媒を少量しか使用しているためまた、NMR分光法は、環境に配慮した方法論です。 NMR分光法の主な欠点は、他のanalytiと比較して相対的に低い感度でありますCALの方法は、しかし、そのような強い磁場、種々の直径の極低温プローブ、高度なデータ処理、及び多目的パルスシーケンス及び技術として計測における最近の技術進歩は、nM範囲まで感度が増加しています。 NMR計測は、高コストではあるが、NMR分光計の長寿命およびNMRの多くのアプリケーションは、長期的には、分析のコストを下げます。この詳細なビデオプロトコルは、フィールドに新しい実践者が1 Hおよび魚油サプリメントの13の C NMR分光分析に関連した問題を回避するためのものです。

<table><tbody><tr><td>Avance III 850 NMR 装置</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Avance III 500 NMR 装置</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TCI 5 mm プローブ</td><td>Bruker</td><td></td><td>Helium 冷却逆 (プロトン検出) NMR プローブ 3 つの独立したチャネル (1H、13C、15N)</td></tr><tr><td>BBO prodigy 5 mm probe</td><td>Bruker</td><td></td><td>窒素冷却観察(X核検出)プローブ、2つのチャンネルを備えています。1つは1Hおよび19F検出用、もう1つはX核用(15Nから31Pまで)</td></tr><tr><td>スピナータービン</td><td>ブルカーNMR</td><td></td><td>スピナーはポリマー材料で作られており、NMRチューブを所定の位置にしっかりと保持するためのゴム製Oリングを備えています</td></tr><tr><td>Topspin 3.5</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>deuterated chloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp;865-49-6</td><td>99.8原子%D、0.03 TMS</td></tr><tr><td>2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>&nbsp;128-37-0</td><td>純度>99%</td></tr><tr><td>魚油サンプル</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NMRチューブ新</td><td>時代</td><td>NE-RG5-7</td><td>5mm外径ルーチン」R&rdquo;シリーズNMRサンプルチューブ</td></tr><tr><td>BSMS</td><td>ブルカー</td><td></td><td>ブルカーシステム管理システム;制御システムデバイス</td></tr></tbody></table>

魚油サプリメントの脂質プロファイルの迅速な評価のための強力なツールとしてnmr分光法

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

西洋の食事は、したがって、魚油サプリメントの消費はこれらの必須栄養素の摂取量を増やすことが推奨され、nは -3脂肪酸に乏しいです。この研究の目的は、二つの異なるNMR器具を利用した高分解能1 H及び13 C NMR分光法を用いてカプセル化された魚油サプリメントの定性・定量分析を実証することです。 500 MHzおよび850 MHz装置。両方のプロトン（1 H）および炭素（13 C）NMRスペクトルは、魚油サプリメントの主要な構成成分の定量的決意のために使用することができます。魚油サプリメント中の脂質の定量は、当該1Dスペクトルに適切なNMRシグナルの積分によって達成されます。 1 H及び13 C NMRにより得られた結果は、2つの核と2つの機器間の分解能と感度の差にもかかわらず、互いによく一致しています。 1 H NMRプランスペクトルは1時間に10分から続く13の C NMR分析とは対照的に、1分未満に記録することができるようにSAより迅速な分析は、13 C NMRに比べ。 13 C NMRスペクトルは、しかし、はるかに有益です。個々の脂肪酸のより大きな数の定量的データを提供することができ、グリセロール骨格上の脂肪酸の位置分布を決定するために使用することができます。両方の核を精製または分離工程を必要とせずにただ1つの実験において定量的情報を提供することができます。磁界の強度はほとんどが13 C NMRに対するその低い解像度に1 H NMRスペクトルに影響を与える、しかし、低コストのNMR機器を効率的に食品業界および品質管理研究所による標準的な方法として適用することができます。

1 H及び13の C NMRスペクトルは、二つのNMR機器を用いて、市販の魚油サプリメントのために収集しました。 850 MHzおよび500 MHzの分光計。これらのスペクトルは、ドコサヘキサエン酸（DHA）とエイコサペンタエン酸（EPA）、例えばNなどのn -1アシル鎖及び栄養的に重要な指標として、他の化合物などの魚油の成分の定量的決意のために使用することができる-6 / N比-3。定量も内部標準を使用せずに行うことができるが、定量的な結果は、相対モルパーセントとして表現されなければなりません。データは、絶対値（MG / g）に発現する必要がある場合、内部標準が必要とされています。 NMRにより得られた結果は、Tに依存して、1つの H NMR分析のために0.3％から13 C NMR分析のために、2％及び0.5％〜2.5％の範囲の相対標準偏差（RSD）を有する高度に再現可能です<html>彼は、脂質。プロトンスペクトルは、分析の精...

ここで、高分解能1 H及び13 C核磁気共鳴（NMR）分光法は、カプセル化された魚油サプリメントの定量的および定性的分析のための迅速かつ信頼性の高いツールとして使用しました。

魚油サプリメントの脂質プロファイルの迅速な評価のための強力なツールとしてNMR分光法

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

本手法の目的は、核磁気共鳴（NMR）分光法を用いて魚油サプリメントの脂質プロファイルを決定することです。この手法は、魚油サプリメントの脂質含有量や、グリセロール骨格における様々な脂肪酸の位置分布など、脂質分析における重要な疑問を解決するのに役立ちます。本手法の主な利点は、分離・精製工程を経ることなく、一度の測定で複数の異なる分子を迅速かつ堅牢に分析できることです。プロトンおよび炭素NMR分析用の試料を調製するには、まずシリンジを用いて食事用カプセルから魚油を120 µL（約110 mg）抽出し、4 mLガラスバイアルに入れます。魚油の重量を記録してください。BHTストック溶液500 µLを用いて、100 mg ± 10 mgの魚油を溶解させます。オイルを溶解させた後、溶液すべてを高品質な5 mm NMRチューブに直接移し、キャップを付けます。サンプル調製後24時間以内に分析を行ってください。NMRチューブをスピナータービンに挿入します。スピナーとチューブを深さ計の上に置き、チューブの下端がゲージの底に触れるまで、チューブの上部をそっと押し下げます。次に、NMRチューブをサンプルケースの空いている箇所に配置します。サンプルを配置したスロット番号を記録してください。NMR装置にサンプルをロードするには、制御用コンピュータに戻り、「SX-番号」（番号はサンプルケース内でサンプルが格納されているスロット番号）を入力します。画面に重クロロホルムの重水素信号が表示されるまで待ちます。重水素信号が見え次第、コマンドラインに「lock」と入力し、溶媒リストから重クロロホルムを選択して、その重水素共鳴を用いてサンプルをロックします。コマンドラインに「bsmsdisp」と入力し、スピンがアクティブになっていないことを確認します。スピンボタンが緑色である場合は、それをクリックしてスピンを解除してください。「new」というコマンドを入力して新しいデータセットを作成した後、「name」タブにデータセット名を、「EXPNO」という実験番号タブに実験番号を入力します。PROCNOという名称のプロセス番号タブに1を入力してください。TITLEタブに実験タイトルを記入します。ExperimentタブでSelectを押し、C13IGパラメータファイルを選択してください。次に、「Set selected item in editor」を選択してOKをクリックします。コマンドラインに「getprosol」と入力し、現在のNMRプローブおよび溶媒の標準パラメータを取得します。その後、「atma」コマンドを入力し、炭素核とプロトン核の両方に対してプローブの自動チューニングおよびマッチングを行います。次に、1次元グラジエントシミングを行い、磁場を高均一化させ、NMR信号の最適なラインシェイプを実現します。そのために、コマンドラインでqu topshim 1dfast ss;qu topshim tuneb ss;およびqu topshim reportを順に実行し、1Dシミングの標準自動手順を使用します。テキストプロトコルに記載されたパラメーター最適化の後、1次元炭素NMRスペクトルを取得します。そのためには、炭素データセットに移動し、コマンドラインでpulprog zgigと入力して、インバースゲートデカップリングパルスシーケンスを使用します。コマンドラインにコマンドを入力し、nppmによるスペクトル設定、RF送信機の中心周波数、スキャン回数、ダミースキャン回数、データポイント数、および90度パルス角のパルス幅を設定します。コマンドラインに「digmod baseopt」と入力して、ベースラインを改善したスペクトルを取得します。次に、コマンドラインに「di 60s」と入力し、850 MHzの装置に対して60秒の緩和遅延を設定します。コマンド「rga」を使用してレシーバーゲインを自動計算し、適切な値に設定します。最後に、コマンドラインにパルス収集コマンド「zg」を入力して、データ収集を開始します。データを処理するには、まずコマンドラインに「si 64K」と入力し、ゼロフィリングを適用してリアルスペクトルのサイズを64Kに設定します。次に、コマンドラインに「lb 1.0」と入力してラインブロードニングパラメータを1.0 hertzに設定し、フーリエ変換の前にラインブロードニング係数1.0 hertzの待ち関数を適用します。コマンドラインに「efp」と入力して、フーリエ変換を実行します。続いて、コマンドラインに「apk」と入力し、自動位相補正を行います。スペクトルをさらに改善するために追加の位相調整が必要な場合は、「Process」タブをクリックしてください。次に、「Adjust Phase」アイコンと、0次および1次の位相補正用「Phase Correction」アイコンをクリックします。0次および1次の位相補正アイコンをクリックしながら、すべての信号が正の吸収モードになるまでマウスをドラッグしてください。Return and Saveボタンをクリックして位相補正値を適用し、保存して位相補正モードを終了します。積分時のベースライン補正には、コマンドラインに「abs n」と入力して4次多項式関数を適用します。TMSからのppmで化学シフトを報告するには、TMS信号をズームアップし、Calibrationアイコンをクリックしてから、基準とするNMR信号（この場合はTMS）の上に赤い線のカーソルを配置します。必要に応じて、マウスの中ボタンを使用して閾値強度を調整します。左クリックして0と入力してください。内部標準としてBHTを使用する場合、ピークの各側から5 Hzまで広げたdelta 151.45のピークを積分します。次に、積分値をストック溶液0.5 millilitersあたりのBHTのマイクロモル数に等しいとします。各ピークの両側から5 hertzにわたる目的のピークを積分します。特定の領域に焦点を合わせる必要がある場合は、ハイライトアイコンをクリックしてハイライトを解除してください。次に、左クリックしてドラッグし、目的の領域をズームします。ハイライトアイコンを再度クリックして積分関数を有効にし、次のピークへ移動します。カーソルを左クリックしてドラッグし、積分範囲を指定します。Return Save Regionsボタンをクリックします。ここに、カルボニル炭素領域における炭素NMR分析の代表的なスペクトルを示します。sn-1, 3位およびsn-2位にあるEPAとDHAのNMR信号が表示されています。これらのシグナルは、EPAおよびDHAの定量決定に使用できます。ここに、プロトンNMR解析の代表的なスペクトルを示します。定量決定に使用可能なEPAおよびDHAのNMRシグナルが表示されています。プロトンNMRスペクトルは、炭素NMRスペクトルと比較してスペクトル幅が狭いため、スペクトル分解能が低くなるという特徴があります。この手法に習熟すれば、適切に実施することで30分以内に完了させることが可能です。本手法の開発により、脂質分析分野の研究者は、サプリメント、植物油、バイオ燃料などの多成分マトリックスに含まれる様々な脂質成分を迅速に分析することが可能となりました。このビデオを視聴することで、魚油サプリメントの脂質プロファイルを分析するための、プロトンおよび炭素NMR分光法の適用方法について深く理解することができます。NMR分光計から発生する強力な磁場での作業は、ペースメーカーや手術用プロテーゼだけでなく、クレジットカードや時計などの電子機器にとっても非常に危険であることに注意してください。

nmr-spectroscopy-as-robust-tool-for-rapid-evaluation-lipid-profile

Research

JoVE Journal

Chemistry

化学

微生物のプランクトンコミュニティからの代謝物抽出のための方法が示されています。コミュニティ全体のサンプリングが特別に用意されたフィルター上にろ過することにより達成される。凍結乾燥後、水性の水溶性代謝物が抽出されます。このアプローチは、自然または実験的な微生物群集のトランスオミクス研究への環境メタボロミクスの応用が可能になります。...

核磁気共鳴分光法を用いた環境メタボロミクスのための低密度プランクトンコミュニティからの代謝物の濃度

プログレッシブ植民地化の手順は、さらにホストの肝代謝への影響を評価するために記述されています。肝代謝が高分解能マジック角スピニング（人事MAS）無傷の生検のNMRプロファイリングによって評価されている間植民地化は、NMRベースの代謝プロファイリングによる共同代謝微生物の尿中排泄を評価することにより、侵襲的、非監視されます。...

無菌マウスでのプログレッシブ植民地時代に肝代謝変化を評価する 1 H NMR分光法

機械的な細胞破壊、溶媒ベースの脂質抽出、エステル交換、および定量化およびガスクロマトグラフィーを用いて脂肪酸の同定に基づく微細藻類中の脂肪酸含量および組成の決定のための方法が記載されている。 tripentadecanoin内部標準抽出及び不完全なエステル交換時の損失の可能性を補償するために使用される。...

微細藻類中の脂肪酸含量および組成の分析

ナイルレッド染色手順を使用して藻の中性脂質含有量を決定するための簡単​​なプロトコルが記載されている。この時間節約の技術は、従来の重量ベースの脂質定量化プロトコルに代わるものを提供しています。これは、バイオプロセスの性能を監視する特定の用途のために設計されている。...

蛍光を用いて藻体で中性脂肪を測定するための簡単​​かつ迅速なプロトコル

哺乳類の脳の神経化学は、多くの神経疾患や全身疾患で変化しています。脳代謝産物の特徴的なプロファイルは、脳組織の粗抽出物に基づいて効率的に取得できます。そのために、高分解能NMR分光法を採用し、代謝物濃度の詳細な定量分析(メタボロミクス)を可能にしています。...

組織抽出物の高分解能核磁気共鳴分光法によるラット脳のメタボローム解析

このプロトコルでは、相補的な分析とオミックス技術の天然有機物と異なる生態系における微生物のプロテオミクスの完全にペアの特性で最高潮に達する単一のスループットについて説明します。この方法は、代謝と環境変化への応答を予測する温室効果ガス生産を記述するため重要な変換を識別するための堅牢な比較を許可します。...

シングル スループット複雑な天然有機物の混合物の評価の補完的な高解像度分析の手法

この記事では、炎症およびニューロン活性の根底にある脂質、膜脂質、下流メッセンジャー、および脂質機能の根底にあるmRNAコード酵素/受容体を標的とする神経疾患マウスモデルにおける組織リピドミクスおよびトランスクリプトミクス、および血漿リピドミクスのためのモジュラープロトコルを提示する。サンプリング、サンプル処理、抽出、および定量の手順が概説されています。...

神経疾患におけるリピドミクスとトランスクリプトミクス

刺激されたラマン散乱(SRS)顕微鏡検査は、特定の化学部分の選択的でラベルフリーなイメージングを可能にし、生体内の脂質分子を画像化するために効果的に採用されています。ここでは、SRS顕微鏡の原理を簡単に紹介し、...

刺激されたラマン散乱顕微鏡を用いた カエノラム型エレガンス における脂質蓄積ダイナミクスの無標識イメージング

このプロトコルは、海水および生物学的標本中の脂質の決定のためのものです。濾液中の脂質は、固形物の場合にはクロロホルムまたはクロロホルムとメタノールの混合物で抽出される。脂質クラスは、炎イオン化検出を用いたロッド薄層クロマトグラフィーで測定され、その合計が総脂質含有量を示します。...

海洋試料における総脂質および脂質クラスの決定

Shotgun 質量分析ベースのリピドミクスは、さまざまなげっ歯類組織からの 1...

げっ歯類組織のショットガンリピドミクス

学ぶNMR分光法による魚油サプリメントの脂質プロファイル解析法。迅速かつ頑健な分析で脂肪酸の位置分布を定量的・定性的に評価し、栄養科学研究への応用価値を示します。

魚油サプリメントの脂質プロファイルの迅速な評価のための強力なツールとしてNMR分光法

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