フッ素含有医薬品の量を測定するアプリケーションと非破壊¹⁹F 時間ドメインの NMR 手法論

この低磁場フッ素19時間領域核磁気共鳴法の全体的な目標は、製剤化された医薬品中のフロリン化薬物の平均含有量を決定することです。これは、製薬業界における医薬品の開発と製造のための非破壊技術です。この方法は、医薬品や医薬品の処方過程で、薬剤学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。

錠剤やカプセルの薬の平均含有量を提案してください。この手法の主な利点は、医薬品中の薬物の平均含有量を測定する際に、高速液体クロマトグラフィーなどの従来の方法よりも非破壊的で高速であることです。適切なNMRチューブでキャリブレーションするサンプルを、マーキングラインまで、または高さ約30ミリメートルまで秤量します。

また、適切なNMRチューブに製剤化された医薬品サンプルを、マーキングラインまたは高さ約30ミリメートルまで計量します。次に、テフロン標準試料を25mmまたは26mmのNMRチューブに入れます。NMRチューブを磁石内部のプローブに入れます。

チューブを5〜10分間平衡化させてから、機器をf19に調整します。RINMRソフトウェアのコマンドメニューの下にある「自動」を選択します。測定を少なくとも3回繰り返します。

そして、o one パラメータの最後の値を取ります。RINMRソフトウェアのコマンドメニューに移動し、auto p 90を選択すると、装置で利用可能な標準自動キャリブレーションシーケンスを使用して、標準テフロンサンプルでf 19の90度パルスをキャリブレーションします。S/N比を向上させるには、25mmNMRチューブに調製したAPIサンプルを磁石に取り付けたf 19プローブ内に置き、少なくとも10分間平衡化させます。

装置マニュアルの指示に従って、各APIサンプルについて、RINMRソフトウェアからの反転回復のための標準実験を使用して、t1緩和時間を測定します。緩和時間を測定するには、SEQUENCEに移動し、RINMRソフトウェアでloadを選択します。次に、逆回復パルス シーケンスを選択し、[開く] をクリックします。

基本パラメータが正しい値になっていることを確認するには、[a] タブをクリックします。ツールメニューでスクリプトを選択すると、ウィンドウがポップアップ表示されます。次に、t one のタブを選択し、緑色の矢印をクリックします。

別のウィンドウがポップアップします。適切な遅延リストファイルを選択します。または、[開く] をクリックした後にリストを作成します。

遅延リストが満足のいくものになったら、[OK] をクリックします。ウィンドウに、t one 値を計算するために、収集されるすべてのスペクトルのファイルを作成するプロンプトが表示されます。機器の保存をクリックして、データの集録を開始します。

そして、選択したフォルダにファイルを自動的に保存します。ウィンドウがポップアップし、t 1 の緩和曲線と時定数または t 1 の値が表示されます。検量線を作成するには、まず、特定のAPIについて、1つの校正サンプルを磁石に入れます。

サンプルを小さめのチューブで最低5分、大きいチューブで10分平衡化します。装置マニュアルの指示に従って、適切なパラメータで自由誘導崩壊または固体実験を取得します。RINMRソフトウェアのsequenceタブで、シーケンスを選択してopenをクリックし、パルスシーケンスをロードします。

基本パラメータの値が正しいことを確認します。各API用に調製されたすべてのサンプルを磁石の温度に平衡化した後、5〜10分間測定し、各APIサンプルの検量線を生成します。データをフォルダーに保存し、各実験の実行に明確な名前を付けます。

各チューブ内の量に基づいて、サンプルの重量パーセンテージを計算します。APIサンプルの純度を考慮し、最大のチューブに入れます。すでに調製した製剤サンプルを磁石に入れ、一度に1つずつ測定します。

小さなNMRチューブの場合は5分、大きなNMRチューブ内のサンプルの場合は10分間、サンプルを平衡化します。各APIのキャリブレーション済みサンプルと同じNMR実験を、同じ条件で取得します。RIキャリブレーションソフトウェアを開きます。

クリップ記号をクリックして、特定のAPIとその医薬品サンプルを錠剤としてFIDまたは固体ファイルを開いて、すべての固体データを思い出してください。測定したすべてのサンプルについて、濃度列の下に重量の割合を入力し、質量列の下に重量を入力します。平均法を使用して適切な領域を選択し、検量線を作成します。

検量線を保存します。次に、固体実験の領域を5〜300ポイントから選択して、検量線を作成します。平均法を使用したキャリブレーションの結果は、表形式で表示されます。

キャリブレーションの2番目の方法として、RIキャリブレーションソフトウェアのFitメソッドを使用して、選択した同じ領域でキャリブレーション曲線を作成します。検量線を保存します。Fit メソッドを使用したキャリブレーションの結果は、表形式で表示されます。

キャリブレーションの3番目の方法として、Mnovaソフトウェアを開きます。特定のAPIからすべてのソリッドデータをドラッグします。そして、サンプルの重量パーセントを入力します。

詳細メニューで、時間ドメインを選択し、次に定量を選択します。ウィンドウがポップアップします。青いプラス記号をクリックして、統合領域を選択します。

次に、マグニチュードモードを使用して適切な領域を積分し、検量線を作成します。検量線を保存します。表で、標準試料のみの濃度列の下にサンプルあたりの薬物の割合を入力します。

そして、質量カラムの下にあるすべてのサンプルの重量。キャリブレーションサンプルは赤で表示する必要があります。信号を質量に正規化するために、信号関数が y が m よりも s と等しいことを確認します。

再現性と再現性を確保するには、各サンプルを異なる日に3回測定し、両方のソフトウェアパッケージで検量線を作成します。検量線ファイルは必ず保存してください。測定したサンプルからNMRデータを読み取り、その重量を入力して、配合された錠剤またはカプセル中のフッ素化APIの重量パーセンテージを決定します。

3つの異なるキャリブレーション方法のそれぞれから得られた検量線を使用します。最後に、テキストプロトコルにある式を使用して、錠剤またはカプセルあたりのフッ素化薬物の量を平均値として計算します。そして、検量線に基づいてソフトウェアによって計算された値と比較します。

ここに示されているのは、フリーベースおよびトリプリケート測定として計算された Cinacalcet HCL の検量線の代表的な結果です。平均モードでRIキャリブレーションソフトウェアを使用します。RIキャリブレーションソフトウェアをフィットモードで使用すると、トリプリケート測定でCinacalcet HCLの同様のキャリブレーション曲線が得られます。

Mnovaソフトウェアエリア法をマグニチュードモードに使用した3回測定におけるCinacalcet HCLの検量線は、同等の結果をもたらします。ここに示されているのは、市販の錠剤中のシナカルセットフリーベースの計算された用量の結果の表です。.RIキャリブレーションソフトウェアによる統計では、平均法とフィット法、およびMnovaソフトウェアを使用しています。

一度習得すれば、このテクニックは15分から20分で完了します。たとえば、キャリブレーションサンプルには1時間かかる場合があります。そして、適切に実行されていれば、一度だけ行う必要があります。

このビデオを見れば、低磁場フッ素19 TD NMRの非破壊技術を用いて、製剤化された医薬品中のフッ素化薬の平均含有量を定量化する方法についてよく理解できるはずです。薬物やNMR装置の取り扱いは非常に危険であり、この手順を実行する際には、個人用保護具や磁石の近くに金属物を置かないようにするなどの予防措置を常に講じる必要があることを忘れないでください。