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高速液体クロマトグラフィー分析とシナプトソーム ドーパミンによるマウスにおけるドーパミン作動性恒常...
高速液体クロマトグラフィー分析とシナプトソーム ドーパミンによるマウスにおけるドーパミン作動性恒常...
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JoVE Journal Neuroscience
Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

高速液体クロマトグラフィー分析とシナプトソーム ドーパミンによるマウスにおけるドーパミン作動性恒常性の評価

Full Text
13,054 Views
11:26 min
September 21, 2017

DOI: 10.3791/56093-v

Kathrine L. Jensen1, Annika H. Runegaard1, Pia Weikop2, Ulrik Gether1, Mattias Rickhag1

1Molecular Neuropharmacology and Genetics Laboratory, Lundbeck Foundation Center for Biomembranes in Nanomedicine, Department of Neuroscience and Pharmacology, Faculty of Health and Medical Sciences,University of Copenhagen, 2Laboratory of Neuropsychiatry, Psychiatric Center Copenhagen and Department of Neuroscience and Pharmacology,University of Copenhagen

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents two techniques to investigate dopamine homeostasis in mice: the assessment of dopamine transporter function through synaptosomal dopamine uptake and the analysis of dopamine levels in striatal tissue using high-performance liquid chromatography (HPLC). These methods allow for the evaluation of dopamine tissue content and transporter functionality, especially after in-vivo manipulations.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Dopamine Transporter Function
  • High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Background

  • Dopamine plays a crucial role in various neural functions.
  • The dopamine transporter is critical for dopamine reuptake and homeostasis.
  • Understanding dopamine dynamics can provide insights into neurological disorders.
  • HPLC is a reliable method for quantifying neurotransmitter levels.

Purpose of Study

  • To provide protocols for assessing dopamine transporter function.
  • To measure dopamine content in the striatum of mice.
  • To facilitate the understanding of dopamine homeostasis post-manipulation.

Methods Used

  • The study utilizes synaptosomal preparations and HPLC for analysis.
  • Mice serve as the biological model, particularly focusing on their striatal tissue.
  • The protocols can be executed following chemogenetic manipulations or drug treatments.
  • Detailed steps are provided for brain dissection, tissue preparation, and analysis.

Main Results

  • Both methods enable robust measurement of dopamine levels and transporter activity.
  • The study provides insights into the parameters of dopamine homeostasis in a controlled setting.

Conclusions

  • The protocols established in this study enhance the understanding of dopamine transport dynamics.
  • They enable researchers to assess the impact of various manipulations on dopamine neurotransmission.

Frequently Asked Questions

What advantages does synaptosomal preparation offer?
Synaptosomal preparation allows for the isolation of synaptic terminals, providing a focused assessment of neurotransmitter dynamics without interference from other cell components.
How are dopamine levels measured in the study?
Dopamine levels are quantified using high-performance liquid chromatography (HPLC), which allows for precise analysis of neurotransmitter concentrations in tissue samples.
What interventions can affect dopamine homeostasis?
The methods implemented can be applied following chemogenetic manipulations, drug treatments, or behavioral training, influencing dopamine transporter function and levels.
What is the role of the dopamine transporter?
The dopamine transporter regulates dopamine signaling by reabsorbing dopamine from the synaptic cleft, thus playing a crucial role in maintaining neurotransmitter homeostasis.
How can this study's methods be adapted?
The techniques can be adapted for various experimental manipulations and different neuronal pathways, facilitating broader applications in neuroscience research.

シナプトソーム ドーパミンやドーパミン ・ トランスポーターの機能と線条体組織中ドパミンのレベルを評価することによりマウスにおけるドーパミン恒常性を調査するため高速液体クロマトグラフィー分析を表す実験ツールそれぞれ。ここでドーパミン組織量を測定、ドーパミン ・ トランスポーターの機能を評価するプロトコルを提案する.

このプロトコルでは、2つの手法を紹介しています。最初の目標は、シナプトソーム製剤からのドーパミン取り込みを測定することにより、ドーパミントランスポーター機能を評価することです。2つ目は、HPLC分析によって組織内のドーパミンレベルを評価するためのものです。

これらの方法は、マウスのドーパミン組織含有量を測定し、ドーパミントランスポーターの機能を評価する方法を示すことにより、ドーパミン恒常性の重要なパラメーターを提供します。これらの技術の主な利点は、化学遺伝学的操作、生体内薬物治療、動物の行動訓練などの生体内操作後に実行できることです。HPLC手順のデモンストレーションは、神経精神医学研究所の准教授であるPia Weikop氏です。

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神経科学 問題 127 線条体 ドーパミン 高速液体クロマトグラフィー (HPLC) シナプトソーム ドーパミン取り込み シナプトソーム ドーパミンの恒常性 ドーパミントランスポーター

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