Name: 注入カテーテル電極の繰り返し測定を可能にすると目がさめているラットの膀胱内圧測定と外部尿道括約筋の測定 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: 学ぶ膀胱カテーテルと尿道括約筋電極の外科的埋め込み法。覚醒ラットで反復的な膀胱内圧測定を実施し、排尿機能の経時的変化を評価する信頼性の高い技術です。

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ここで説明したすべての手順は、動物研究のためオーストリア政府倫理委員会で承認された (同毛皮学問、上海虹橋と付き、WF/V/3b) 研究評価会を遵守していたと動物用動物のガイドラインです。ラットのこのアプローチの使用は女性、12 週齢のルイス ・ ラット.プロトコルを通して滅菌器具を使用します。
1 材料の準備
<ol><li>
カテーテルの製造
	<ol>
<li>動物のサイズに合わせて適当な長さ (20 〜 25 cm) にカテーテル (ポリエチレン チューブ PE 50) をカットします。 注: は、トンネリングおよび容易に処理にいくつかの余分な長さを残してください。</li>
		<li>丸みを帯びた先端を得るためのライターと 1 つの端に します。最終の適切な開口部とカテーテルの鈍い端を確認します。</li>
		<li>それだけ急に燃え上がった端の下にあるまでカテーテル上 2 mm 長いシリコン チューブを置きます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
電極の製造
	<ol>
<li>20-25 cm (動物のサイズに応じて適切な長さ) の四フッ化エチレン樹脂被覆鋼線を準備します。</li>
		<li>銀線の長さ 2 cm を準備し、小さなループのままになるまで、両端をねじる。一方の端にテフロン絶縁の 2 mm を落とします。裸鋼線に終わるツイストの銀線をはんだ付けします。</li>
		<li>コーティング ゾーンで従来のマニキュアを適用します。コーティングの領域に 4 mm 長いポリエチレン チューブを準備し、圧縮の鉗子に熱を適用することでシールの端。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 動物の準備
<ol><li>
麻酔
	<ol>
<li>使用カクテル適切な麻酔は、麻酔一般の機関によって承認。</li>
		<li>メデトミジン (0.15 mg/kg)、ミダゾラム (0.08 mg/kg)、フェンタニル (0.01 mg/kg) と麻酔カクテルを準備し、27 g 針付き 1 mL 注射器で筋肉内注入します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
手術の準備
	<ol>
<li>腹部を陰部と肩甲骨のレベルに戻る地域などを含む、電気かみそりで剃る。</li>
		<li>腹部を消毒、首の 70% エタノール最初とし 3 交互ボディス クラブ ポビドン ヨード溶液による地域。</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 膀胱カテーテル注入
<ol><li>3 番目と 4 番目の乳頭 (長さ約 2 〜 2.5 cm) のレベルで低中間線手術を実行するには、皮膚や腹部の筋肉の手術用はさみのメスを使用します。</li>
	<li>尾の方向に腹壁を導くことによって膀胱を公開し、この位置に再配置を避けるために膀胱、後ろに鉗子の背部を置くことによってそれを修正します。</li>
	<li>6-0 の非吸収性のモノフィラメント縫合糸を用いたテーパ先端針膀胱ドーム周辺の巾着縫合を配置します。</li>
	<li>財布文字列のメス チップまたは膀胱カテーテルを挿入するための 18 G 針で中の膀胱ドームを切開 (プロトコルの手順 1 を参照)。</li>
	<li>滅菌生理 0.9% 塩化ナトリウム溶液が充填されたカテーテルを挿入し、カテーテルのフレアの開口部が膀胱ドームのすぐ下に配置されるまで、膀胱カテーテルを慎重に撤回します。</li>
	<li>カテーテル周囲巾着縫合をセキュリティで保護し、さらに固定のためのカテーテル体の周りストップ縫合。</li>
	<li>ゆっくりとカテーテルを膀胱を滅菌生理 0.9% 塩化ナトリウム溶液に充填によって膀胱ドーム経由で漏れを確認します。</li>
</ol>4. 尿道括約筋を電極
<ol><li>3 つの電極を注入の準備 (プロトコルの手順 1 を参照)。</li>
	<li>1 つの電極を将来 null 電極をさらに識別するために永久的なフェルトのカラーペンでマークします。70% エタノールで電極を消毒します。 注: カテーテルは、熱や化学滅菌に適しておりません。代わりに寒さは 24 時間電極を滅菌します。</li>
	<li>恥骨の骨まで外科はさみで腹部の切開を拡張、恥骨をカットしないでください。</li>
	<li>尿道を識別して、尿道の両側に微細鉗子を使用して鈍ポケットを作成、血管または神経の外傷を避けるため。</li>
	<li>このウィンドウ内で尿道の近くに適切な脂肪の袋を識別します。</li>
	<li>6-0 の非吸収性のモノフィラメント縫合糸を使用して適切な脂肪ポーチの両側に電極を修正します。 注: 電極の最終的な位置は、尿道の中間領域で二国間する必要があります。</li>
	<li>6-0 非吸収性のモノフィラメント縫合糸と共に 2 つの電極を結ぶ。</li>
	<li>尿道の距離内で腹壁の筋肉にマークされた null 電極を縫合します。単一の縫合と共にすべての 3 電極を結ぶ。</li>
</ol>5. トンネル
<ol><li>トンネルの肩甲骨の間の小さな皮膚切開を行います。</li>
	<li>首に電極線をトンネルし正しい配置は、最終的なチェックを行うトンネル後電極の位置を確認してください。</li>
	<li>トンネル膀胱カテーテル肩甲骨レベル - 膀胱のねじれを避けるためにカテーテルをトンネリングしながら膀胱に注意を払う。この目的のためには、膀胱のねじれを避けるために膀胱ドームに入る前にカテーテルを保持します。</li>
	<li>4-0 polyfilament 吸収性縫合糸でステッチを連続または断続して腹筋を閉じます。中断されたマットレス縫合で皮膚切開を閉じる。</li>
	<li>電極ワイヤとカテーテルの最大膨満を持っているその完全な長さに動物をストレッチします。</li>
	<li>肩の筋肉に撃沈で縫合糸でカテーテルと電極ワイヤーを修正します。</li>
	<li>4-0 縫合糸で単一ステッチして皮膚を閉じます。</li>
</ol>6. ハーネス フィット
<ol><li>動物にハーネスに合わせて動物の頭の上のハーネスを引っ張ると 2 つのシリコン ストリップ間終了位置に前肢を引き出します。ディストリビューターと手術前に動物の重量によってハーネス サイズを確認します。</li>
	<li>トンネル ハーネスやドリルによるカスタムメイド スルーホール電極の中央の穴に膀胱カテーテル電極線のサイズに合わせて調整します。</li>
	<li>シリコン ストリップを引いてハーネスを調整します。それがあまりにも緩んでいないのでハーネスを調整するが、ラットの運動能力を維持するためにいくつかのスペースを確保します。</li>
	<li>ケーブルス トラップを使用して、シリコン ストリップを修正します。</li>
	<li>膀胱カテーテルの長さをハーネスの上 3 cm にカット、23 G ストッパーに接続し、最後にハーネスにそれを修正します。</li>
</ol>7. コネクタの電極の製造
<ol><li>3 つの小さい熱収縮チューブ (null の電極の色違い) を準備します。適切なサイズの 2 つのさらに熱収縮チューブを準備します。</li>
	<li>後女性のプラグで接続される緩すぎる、または短すぎることがなくできるように最適な長さに電極線の長さを短きます。3 本のワイヤー (約 2 mm) のテフロン絶縁材を除去し、文字列に鋼線をねじる。</li>
	<li>すべてのワイヤに大入熱収縮チューブをかぶせます、個別に 3 線の小さなチューブを配置し、null 電極の色チューブを使用します。</li>
	<li>男性 3 接続プラグ電極をはんだ付けします。途中で null の電極を置き、3 つ小さな個々 のチューブ上はんだ付けの領域を縮小します。</li>
	<li>男性プラグ国境に最初の個々 のチューブの語尾の終わりに大きいチューブと最終的な大型管を縮小します。</li>
	<li>男性プラグをさらに安全のためテープの部分にはハーネスと修正固定メスのコネクタに接続します。</li>
</ol>8. 手術後ケア
<ol><li>外科領域をきれいにし消毒ポビドン ヨード剤。</li>
	<li>加熱パッドまで目を覚ましに動物を置き、中および手術後ローカル動物のケアのガイドラインに基づいて水置換の 0.9% 塩化ナトリウム溶液を与えます。</li>
	<li>鎮痛薬を管理 (メロキシカム 1 mg/kg) と抗生物質 (sulfadoxinum 200 mg、trimethoprimum 40 mg、15 mg/kg) 複合注入剤として皮下。1 日 2 回 (朝と夕方)、鎮痛剤を与えるし、1 日 1 回その後の 5 日間の抗生物質を与えます。</li>
	<li>週 2 〜 3 注射で全くフォロー アップの期間にわたって同じ用量で抗生物質を続行します。</li>
	<li>ハーネスの適切なフィットを毎日チェックし、首の地域の特に、外科分野の検査を実行します。シリコン ストリップで慎重に引いて、きつすぎる場合は、ハーネスを調整します。</li>
	<li>封鎖を避けるために週に 1 回定期的にカテーテルをフラッシュします。</li>
</ol>9. 内圧測定のための準備
<ol><li>術後 6 日後最初の内圧測定を実行します。 注: 以前の測定値は、カテーテル留置による鎮痛薬および/または尿路炎症によって影響されます。</li>
	<li>メイン スイッチ、コンピューター、および筋電アンプをオンにします。</li>
	<li>暖められた室温 0.9% 塩化ナトリウムとシリンジ ポンプを入力します。ポンプから始まって降順な他の後三方コネクタの 1 つを開き、チューブをフラッシュします。 メモ: は、気泡内圧測定が変更されますと残りの空気泡のため慎重に確認します。</li>
</ol>10. 校正
<ol><li>プログラムした尿流計ソフトウェアを起動し、調整に行きます。</li>
	<li>ポンプや動物に三方コネクタを閉じます。</li>
	<li>接続されている圧力計バルブを開き、プログラムで 0 を押します。</li>
	<li>100 mmhg の圧力計で圧力を調整し、プログラムで 100 mmHg のボタンを押します。プレスは、キャリブレーションを保存することを確認します。ウィンドウは自動的に閉じます。</li>
	<li>圧力計バルブを閉じて、測定の準備を動物にポンプから三方コネクタを開きます。</li>
</ol>11. 動物データベース (動物 DB)
<ol><li>動物を登録するには、動物に簡潔な ID を付けます</li>
	<li>SCI、治療の開始、カテーテル注入、実験グループ、および動物の誕生日の日付の日付など、さらにデータを入力します。</li>
	<li>最後にデータを記録して、「記録保存」を押して、ファイルに保存します。</li>
</ol>12 記録前にの計測設定
<ol><li>ソフトウェア プログラムを起動するには、スタート ボタンを押します。</li>
	<li>動物を選択し、押します風袋スケールと圧力ゼロ。 注: これは EMG ケーブルのワイヤーの除去につながる可能性が、ケーブルを立ち往生しないように、落に動物を配置しながら注意を払う。</li>
</ol>13 動物の準備
<ol><li>カテーテル プラグを取り外し、ハーネスから EMG プラグを取り外します。</li>
	<li>ラットは、落します。落を閉じて、クランプでハーネスをロックします。</li>
	<li>カテーテルと、落から EMG プラグを得る。</li>
	<li>キャタ マウント ユニットに、落を配置します。管内尾を入れて、動きを避けるためにテープでチューブを修正します。</li>
	<li>男性の EMG プラグを録音 EMG メスコネクタに接続します。</li>
	<li>圧力ゼロをもう一度押すし、充填/記録管にカテーテルを接続します。ソフトウェア内の圧力をチェックします。 注: 圧力は、5-10 cm H2O ベースラインでまわりで肯定的にはずです。圧力が負の場合は、カニューレからカテーテルを切断、圧力ゼロを押して、カテーテルを再接続します。</li>
</ol>14. 記録
<ol><li>カテーテルと筋電図のケーブルが接続されている場合は、実行ポンプと記録を押します。</li>
	<li>Μ L/分で実験ニーズに充填速度を適応します。</li>
	<li>時間をメモ録音開始、ログ帳に部屋の温度。</li>
	<li>膀胱内圧測定の記録を停止するには、実行を押すとポンプによってポンプを停止し、もう一度録画を押します。 注: オフ、ポンプになります、ポンプで緑色のライトがオフになっています。</li>
	<li>カテーテルを外し、カテーテルの端を閉じるに 23 G ストッパー プラグを使用します。EMG のケーブルを外します。</li>
	<li>落の前面を開き、落からラットをガイドします。 注: はラットを慎重に処理し、ケーブルのロックを避けるためにワイヤーを監視します。</li>
	<li>ハーネスにカテーテルを差し込みます。再プラグ、ハーネスに EMG プラグとプラグの周りのテープの部分を置きます。 注: 動物に下部尿路の病態がある場合は、膀胱の overdistention を避けるために手動で最後に膀胱を表現します。</li>
	<li>その家のケージに動物を入れてください。</li>
	<li>押すと終了してプログラムを閉じます。</li>
	<li>きれいに落とビーカー。</li>
	<li>ポンプと動物のコンセントに 3 ウェイ コネクタを閉じます。</li>
	<li>コンピューター、筋ユニットとメイン スイッチを使ってシステムをシャット ダウンします。 注: データが測定ラット ID のサブフォルダーのファイルを「ログ データ」の別のフォルダーに保存されます。単一の記録は単一のラットの ID フォルダー日付で並べ替えられます。</li>
</ol>

<ol><li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+for+urodynamic+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li>
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<li>Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+in+rats%3A+a+chronic+model+for+study+of+bladder+function+and+effect+of+anesthetics%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics.</a> Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

このプロトコルを記述する永続的なカテーテルと尿道括約筋を電極と膀胱内圧測定記録し、目を覚まし、軽く拘束されたラットの膀胱の両方同時分析を含む技術の手術と外尿道括約筋。
外科の中に重要なステップは、漏れや広範な操作を避け、膀胱カテーテルの注意注入です。さらに、尿道括約筋に両側の電極の精密な注入は外尿道括約筋の音響計測に不可欠です。注入後外科分野の密接な検査も動物の健康を維持するために不可欠です。経過観察中に抗生物質のカバレッジは、尿路感染症の発生と同様、カテーテル ラインに沿って感染防止に役立ちます。
内圧測定中に処理されたラットが以前処理できなかったラットよりリラックスして穏やかになります。したがって、膀胱内圧測定記録はその結果で異なる場合があります。また、落はラットより快適に暗いフロント エリアと拘束空間を提供しています、したがって、ストレス レベルを低減します。他公開されて目を覚まし内圧測定のラットは測定ケージで自由に移動できます。ただし、これは測定時に高いアーチファクト リスクを負う、記録、また動物のストレス レベルの時...

ほとんどの研究は、尿・排尿機能と機能障害を分析するには、齧歯動物モデルを使用しています。反射神経を順次活性化、排尿が生成されます。これらの反射の調整は、効率的な排尿1に不可欠です。膀胱内圧測定記録技術は、そのニューラル制御1の下で, 膀胱機能解析のための貴重なツールを提供します。
ラットのほとんどの従来の cystometries として主にウレタン2麻酔の 1 つ、最終的な分析と膀胱にのみ焦点を当てます。しかし、神経因性排尿障害 (NLUTD) のようないくつかの疾患、膀胱だけでなく、膀胱の出口、尿道括約筋は機能不全の3、4です。これにより、単一内圧測定、膀胱が調べられ、のみ場合、NLUTD がフォロー アップすることは困難になります。人間に匹敵する信頼性の高い結果を得るためそれは膀胱と外尿道括約筋の機能との相互作用2の両方を正確に測定することが欠かせません。さらに、麻酔は非常に膀胱機能2,5,6を変更する可能性があると覚醒ラットで機能解析を実行することが重要です。目がさめている動物の記録良い膀胱内圧測定は膀胱機能や誤動作7の同定のための基礎です。
(例えば、キャタ マウント膀胱内圧測定駅 (CCS)) 小動物の膀胱内圧測定駅使用は小さな目を覚まし動物8膀胱内圧測定解析を実行するユニットです。恒久的な膀胱カテーテルと注入された外尿道括約筋電極、長い時間の期間2以上繰り返し測定を実行できます。したがって、CCS のための貴重なツールを提供します非神経因性と短期または中期的フォロー アップの中に、病因を変更できます、齧歯動物モデルにおける NLUTD 評価。さらに、このメソッドには覚醒ラットで膀胱の測定に、落を用いたアーチファクト低減膀胱内圧測定分析が含まれます。
完全に膀胱カテーテルと覚醒ラットで膀胱内圧測定の測定と共に、外尿道括約筋電極を移植する外科的アプローチについて述べる。

<table><tbody><tr><td>ポリエチレンチューブ PE 50</td><td>ベクトン ディキンソン</td><td>427411</td><td>カテーテル</td></tr><tr><td>Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c)</td><td>Ethicon</td><td>EH7403H</td><td>縫合</td></tr>糸 <tr><td>テフロンコーティング鋼線</td><td>クーナー線</td><td>AS631</td><td>電極材料</td></tr><tr><td>銀線 0.250 mm</td><td>World Precision Instruments</td><td>AGW1030</td><td>電極材料</td></tr><tr><td>Rotilabo - PVCチューブ</td><td>カールRoth</td><td>97241</td><td>ハーネス</td></tr><tr><td>Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c)</td><td>Ethicon</td><td>V4940H</td><td>縫合糸</td></tr><tr><td>クイックコネクト シングルハーネス</td><td>SAI Infusion Technologies</td><td>QCH-23CW</td><td>ハーネス</td></tr><tr><td>収縮チューブ</td><td>ChiliTec</td><td>17894</td><td>電極はんだ付け</td></tr><tr><td>はんだ付けワイヤー Pb60 Sn40</td><td>Stannol</td><td>LD0029</td><td>電極はんだ付け</td></tr><tr><td>フラックスエージェント157</td><td>Castolin Eutectin</td><td>157 0150</td><td>電極はんだ付け</td></tr><tr><td>ConnシュラウドなしヘッダーHDR 3 POS、2.54mmはんだSTスルーホールボックス</td><td>Preci-dip</td><td>801-87-050-10-001101</td>電極<td>はんだ付けConn</td></tr><tr><td>ソケットストリップSKT 50 POS 2.54mm、はんだSTスルーホールボックス</td><td>Preci-dip</td><td>890-18-003-10-001101</td>電極<td>はんだ付け</td></tr><tr><td>ラット膀胱測定パッケージ(ポンプ、スケール、圧力トランスデューサ、膀胱測定用ハードウェアを含む)</td><td>Catamount Research and Development Inc.</td><td>CAT-CYT-R</td><td></td></tr><tr><td>アクティブヘッドステージ付き差動増幅器</td><td>AD機器</td><td>DP-311</td><td>EMG増幅器</td></tr><tr><td>拘束装置 ラット用中型 200-300 g</td><td>emka Technologies</td><td>HLD-RM</td><td></td></tr><tr><td>Uro Dyn Software</td><td>Z&uuml;大学</td><td></td><td>MTAベースの</td></tr><tr><td>雌ラット(Strain Lewis)の豊富な12週齢の</td><td>チャールズリバー、ズルツフェルト、ドイツの</td><td></td><td>動物</td></tr></tbody></table>

注入カテーテル電極の繰り返し測定を可能にすると目がさめているラットの膀胱内圧測定と外部尿道括約筋の測定

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

下部尿路機能は、齧歯動物の膀胱内圧測定膀胱機能解析による主に評価されます。従来の cystometries は通常、ウレタン麻酔下ターミナル分析として実行されます。麻酔薬が膀胱機能に影響を与えることが知られています。したがって、このテクニックのねらいは軽く拘束された覚醒ラットで膀胱と外尿道括約筋の内圧測定を行うことです。このため、膀胱カテーテルが膀胱ドームの中に注入します。その後、2 つの電極は, 外尿道括約筋に二国間で注入され、接地電極は非応答性骨格筋に縫合します。膀胱カテーテルそして 3 つの電極は最後に、頚部に皮下トンネルし、ハーネスに貼付。この手法では、下部尿路機能を評価するために同じ動物の複数の時点で下部尿路を測定できます。この技術の主要なアプリケーションは、同時の膀胱と外尿道括約筋機能覚醒健康なラットに、病気やけがの誘導後のフォロー アップです。さらに、後続の下部尿路監視は、病気や怪我の治療の有効性を監視するための評価中に実行できます。

目を覚まし内圧測定のプロセスを示す回路図は、図 1に示したが、膀胱カテーテル留置の内部解剖学は図 2に示します。手術は約 2 h. 術後鎮痛と抗生物質、前述のプロトコルでは、カバー痛みと感染症手術後 5 日間。のどの痛みの兆候は見られなかったその後。腹部、腹部の縫合と首の縫合の 1 日 2 回の綿密な検査は動物の健康を維持するために必要です。ハーネス制御 (位置と堅さ) は最初の 5 日後に定期的に 1 日 1 回実施しなければなりません。腹部の縫合糸は、術後 10 日で削除できます。
我々 は炎症を避けるために手術後最初の 10 日間のソフト、非木質の寝具を使用します。寝具は、炎症のリスクを下げるに週に少なくとも 2 回が変更されます。グループ住宅電極やカテーテル、ハーネス ケーブル ケージ仲間でかむことのリス...

このプロトコルは最初外尿道括約筋電極と第二に、膀胱と尿道の外部関数の測定と組み合わせて膀胱カテーテルの永久的な注入の手術を記述します。注入の目がさめている動物で括約筋。

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

この外科的介入の全体的な目標は、膀胱測定中に意識のあるラットの膀胱の機能を観察することです。この方法は、進行性の病気や怪我による膀胱機能の変化など、機能的な泌尿器科領域の主要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、警戒心の強いラットで膀胱撲滅記録を繰り返し作成できることです。手術のために動物に麻酔をかけた後、肩甲骨のレベルで生殖器領域と背中領域を含む腹部を剃ります。次に、腹部と首の領域、前足と後足を70%エタノールとポビドンヨード溶液を使用して消毒します。メスを使用して、3番目と4番目の乳頭のレベルで低い正中線開腹術から手術を開始します。切開部を2〜2.5センチの長さにしてから、手術用ハサミを使用して腹部の筋肉を切断します。次に、腹壁に沿って頭蓋尾方向に解剖して膀胱を露出させます。次に、鉗子の裏側を使用して膀胱を固定します。次に、テーパーチップ針付きの6-0非吸収性モノフィラメント縫合糸を使用して、膀胱ドームの周りに巾着縫合糸を配置します。縫合糸を留置した後、巾着の紐内の膀胱ドームにカテーテルの開口部を作ります。メスまたは18ゲージの針を使用してください。次に、滅菌生理学的塩化ナトリウム溶液を予め装填したカテーテルを挿入します。フレアした開口部が膀胱ドームのすぐ下になるまで、膀胱カテーテルを慎重に引っ込めます。次に、巾着縫合糸をカテーテルの周りに固定し、カテーテル本体の周りにストップ縫合糸をして、カテーテルをさらに固定します。先に進む前に、カテーテルを通して膀胱をゆっくりと溶液で満たして、膀胱ドームの周囲に漏れがないか確認してください。漏れを止めるには、カテーテルの周りに別のストップ縫合糸を追加します。まず、埋め込み用の3つの電極を準備します。一方の電極にパーマネントインクで印を付けて、ヌル電極として識別します。次に、3つすべてを70%エタノールで消毒します。電極を埋め込むには、まず外科用ハサミを使用して、公共の結合を切断せずに腹部切開部を恥骨まで延長します。次に、尿道を特定し、両側に鈍いポケットを作成します。ポケットを作るときに血管や神経に外傷を負わせないようにしてください。次に、尿道を閉じるための適切な脂肪ポーチを特定します。次に、6-0非吸収性モノフィラメント縫合糸を使用して、2つの電極を脂肪ポーチに両側に固定します。次に、2つの電極を互いに縫合します。電極は、尿道の中央領域で両側にある必要があります。次に、マークされたヌル電極を尿道の腹壁筋に縫合します。次に、3つの電極すべてを1つの縫合糸で固定します。トンネリング手順を開始するには、肩甲骨の間に小さな皮膚切開を行い、次に腹部から首にデバイスをトンネルします。次に、電極線をネックにトンネルします。電極に対する位置を必ず確認してください。次に、膀胱カテーテルを肩甲骨レベルまでトンネルします。その際、膀胱がねじれないように、膀胱ドームに入る直前にカテーテルを保持するように注意してください。次に、4-0ポリフィラメント吸収性縫合糸で連続または中断されたステッチを使用して腹筋を閉じます。次に、中断されたマットレス縫合糸を使用して皮膚の切開を閉じます。次に、動物を全長まで伸ばして、ワイヤーの長さを確認します。次に、カテーテルと電極ワイヤーを沈み込ませ縫合糸で肩の筋肉に固定します。4-0縫合糸のシングルステッチを使用して、皮膚を閉じます。次に、ネズミの頭の上にハーネスを引っ張り、次にシリコンストリップの間に4本の手足を完全に引っ張ります。次に、膀胱カテーテルをハーネスの中央の船体にトンネルします。次に、ハーネスに事前に開けられたカスタマイズされた穴にワイヤーを通します。ワイヤーを所定の位置に固定した状態で、シリコンストリップを引っ張ってハーネスを調整します。ネズミの動きを妨げないように、ハーネスをできるだけ締めてください。調整したら、ケーブルストラップを使用してストリップを固定します。次に、膀胱カテーテルの長さを短くして、ハーネスから3センチ上に伸ばします。次に、カテーテルを23ゲージのストッパーに接続し、ハーネスに固定します。電極線をハーネスにしっかりと取り付けることが重要です。まず、短い長さの小さな熱収縮チューブを3本カットし、1本は独特の色をしています。次に、3本のワイヤーすべてを保持するために、わずかに長い長さの熱収縮チューブを2本作成します。次に、電極線の長さを調整して、緩すぎたり短すぎたりしないように差し込むことができるようにします。次に、各ワイヤから2mmの絶縁体を剥がし、露出したねじ山をねじります。次に、2本の大きな熱収縮チューブを3本のワイヤーすべてに通し、次に1本の小さな熱収縮チューブを各ワイヤーに通し、固有の色を使用してヌル電極を識別します。次に、電極をオスの3接続プラグにはんだ付けします。ヌル電極を中央に配置し、はんだ付けポイントの上にある3本の小さな個々のチューブを縮小します。大きい方のチューブの1つを他の熱収縮の上に折りたたみ、もう1つをオスプラグとの境界で折りたたみます。次に、オスプラグをハーネスに接続し、撥水テープで接続を固定します。外科的処置の成功率は約80%でした失敗した手順は、主にプラグからの電極ワイヤーの分離によるものでした。術後7日で、ラットは通常分析の準備ができていました。記録された膀胱測定には、通常、測定ごとに3回の連続した排尿サイクルが含まれ、ラットの不安と取り扱い状況に応じて20〜40分かかりました。次に、主な読み出しパラメータには、ベースライン、閾値、平均、および最大排尿筋圧の測定値、排尿量、流量と時間、膀胱のコンプライアンス、および外部尿道括約筋筋電図活動が含まれます。このビデオを見た後、覚醒状態の膀胱測定記録を繰り返すために、永久膀胱カテーテルと外部尿道括約筋電極を埋め込む方法についてよく理解できるはずです。一度習得すれば、移植は適切に行われれば90分以内に完了することができます。その開発後、この技術は、泌尿器科の分野の研究者が警戒ラットの機能的な泌尿器科の側面を探求する道を開きました。

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Research

JoVE Journal

Biology

生物学

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