海綿神経刺激とラットの海綿静脈洞部の圧力の記録

この方法の全体的な目標は、海綿体内圧力記録のための陰茎骨管カニューレ挿入の簡略化された外科的技術と、電気刺激のための海綿状神経の解剖と分離を説明することです。この実験プロトコルは、勃起不全の病態生理学を研究し、新しい治療法をテストするために使用できます。この手法の主な利点は、再現性があり、高速で、信頼性が高いことです。

このチュートリアルで説明されている主要な落とし穴に対処し、排除しました。この方法は勃起不全への洞察を提供することができますが、生体適合性シリコーン接着剤による神経電極複合体の分離は、末梢神経の電気刺激に適用でき、他の臓器の生理学的検査を可能にします。この手順を開始するには、動物に麻酔をかけた後、腹部と会陰の下半分を剃ります。

70%アルコールとポビドンヨードで動物を交互に3回こすります。その後、ラットを加熱した手術用パッドの上に仰臥位に置きます。目に軟膏を塗り、ラットを2.5%イソフルランを含む鼻円錐を介して麻酔をかけます。.

次に、手術用顕微鏡でドレープを使用して、すべての外科的処置を行います。続いて、陰茎の基部の高さから始めて下方に伸びる正中線の横方向に5ミリリットルの1センチメートルの皮膚切開を行います。Qチップを使用して、陰嚢の外側の筋膜を慎重に分離します。

筋膜を解剖した後、一対の開創器を使用して皮膚の端と睾丸を引き戻し、綿の先端の綿棒による触診を使用して坐骨結節を特定します。坐骨海綿体筋が見えるまで、脂肪組織を内側に解剖します。一対の鉗子を使用して、筋肉を縦方向に分離し、アルブギニア内膜を露出させます。

チュニカ・アルブギネアは明るい白い構造として現れます。システムの設定をキャリブレーションした後、会陰部の皮膚にチューブを挿入し、陰茎の襟骨と平行に走っていることを確認します。次に、ラインを所定の位置に残し、切開部を生理食塩水で湿らせます。

この手順では、皮膚を通して腹部の正中線を2センチメートル下まで切開します。膀胱と前立腺を露出させるために、linea albaに沿って筋膜を通して一致する切開を作成します。リトラクターを使用して、良好な露出を達成します。

次に、綿の先端の綿棒を使用して、前立腺を脂肪組織から分離します。リトラクターを調整し、前立腺の背側側面で実行中のMPGとCNが明確に視覚化されるまで解剖を完了します。MPGとCNの位置を特定したら、MPGから2〜5ミリメートル遠位の神経を覆う筋膜を慎重に切開します。

次に、神経の両側とその下に組織を広げて、4ミリメートルの長さの部分を解放し、次に縫合糸を神経の下に滑り込ませます。縫合糸の助けを借りて神経をわずかに持ち上げ、バイポーラ電極のフックを神経の周りに配置しやすくします。アシスタントに、2液型シリコーン接着剤をインスリン針の先端と5秒間混合させます。

神経を乾かし、フックと神経の周りの領域に接着剤を塗布します。接着剤が乾くまで約1分間電極を少し引っ張って神経を上昇させます。その後、電極が引っ張られたりねじれたりしないように、右側のリトラクターを除いて、リトラクターを取り外します。

その後、露出した臓器を生理食塩水で濡らし、切開部に生理食塩水に浸したガーゼを敷きます。この手順では、リトラクターを使用してtunica albugineaの視覚化を復元します。リトラクターを坐骨海綿体筋に取り付けないように注意してください、それはcrusを歪めるので。

次に、針をPE50チューブに取り付け、チューブをヘパリン化生理食塩水で洗い流してから、アルブギニア内膜に導入します。アルブギネア内膜を伸ばし、利き手で上にある筋肉を挿入点まで遠位に保持します。次に、利き手ではない手で針を持ち、海綿体に導入します。

ラインを洗い流して、漏れなく海綿体に正しく配置されていることを確認します。圧力記録のために針を海綿体に挿入することは、重要なステップを構成します。針をクリュに展開するときは、クリュを伸ばし、針をそのコースと平行に展開することが重要です。

チューブを洗い流し、クラを押してラインをテストします。漏れがないことを確認してください。その後、誤ってラインを引っ張らないように、チューブをテープでテーブルに固定します。

次に、リトラクターを取り外します。刺激装置にパラメータを設定し、刺激の間に最低1分間の休憩を挟んで、50秒間刺激を適用します。この図は、50ミリメートル水銀柱の刺激による最初の応答の低下を示しており、その後、66ミリメートル水銀の2回目と3回目の刺激

その後、その後の測定値は、73ミリメートル水銀柱の正常レベルで記録されました。そして、ここに示されているのは、75〜78ミリメートルの水銀柱の間で10回の連続刺激でこのプロトコルを使用した結果の安定性です。この図は、海綿体内圧での有効な麻酔用量を示しています。

イソフルランの増加に対する反応の減少と変動は、最初の2回と最後の3回の刺激で2%の安定した反応と比較して観察されました。.上部の青いトレースは、一定の主動脈圧を示しています。この図は、海綿体内圧に対する麻酔タイプの影響を示しています。

イソフルラン麻酔下で行われた最初の刺激は、80ミリメートル水銀柱の圧力上昇を示しました。フェンタニルミダゾラムを投与すると、110ミリメートル水銀に対する反応が増加しました。この図は、ノーズコーンを介した酸素投与の効果を示しています。

ノーズコーンを介した酸素投与を中止すると、海綿状神経刺激による海綿体圧上昇が大幅に減少しました。主動脈圧への影響は認められませんでした。一度マスターし、適切に実行すれば、この手順は30分で完了することができます。

刺激を行う際には、麻酔と酸素化の種類とレベルの両方が海綿体内圧に大きな影響を与えることを覚えておくことが重要です。この手順に続いて、勃起不全の病態生理学と新しい治療法の導入に関連する質問に答えるために、さまざまな薬剤をテストできます。このビデオを見た後、シーリング接着剤による神経電気複合体の分離や、低侵襲解剖後の海綿体内圧の記録、海綿体部分のカニューレ挿入など、カニューレ神経刺激を行う方法を完全に理解しているはずです。