Name: ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-22T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: 学ぶラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法。慢性予測不能ストレス（CUS）を用いて、健常ラットがうつ病様行動を獲得する伝染性うつ病モデルを確立する手法を解説します。

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著者感謝ビデオ分析なども研究室で彼の助けを Soroka 医療センター泌尿器科、居住者博士 r. Bilyar を認めます。シラ Ovadia、動物資源ユニット ディレクターのサポートはまた感謝します。A. Alir のおかげで、彼らのサポートと有用な議論のクリティカルケア ・ ユニット Soroka 医療センターでスタッフには多く。

欧州共同体の実験動物の使用のためのヘルシンキ宣言・東京ガイドラインの勧告に従って次の手順を行った。実験は、ベン Gurion 大学のネゲブで動物ケア委員会によって承認されました。
1. 実験手順のラットを準備
注: ないあからさまな病理を選択雄 Sprague-dawley ラット実験手順の各を 300 と 350 g の間計量。
<ol><li>家の食事、ケージごと 3 つのラットと水の利用可能なアドリブ、適応、日光の 12 時間と闇の 12 時間の間で交互に少なくとも二週間を可能にします。</li>
	<li>実験の開始前に 3 日間を使用してうつ病のような動作が存在するすべてのラットをテストサッカロースの好みテスト (手順 4 を参照).
</li>
	<li>まず、実験開始前に、影響を受けないラットにうつ病が広がる可能性を避けるために、ラットのように同じケージに収容されていますうつ様行動としているものを表示認識されている除外ラット排除のために陽性をテストしたラット世界大恐慌;その後、意気消沈したラットとして同じケージに収容されているラットを排除します。</li>
	<li>必要に応じて、うつ病の実験のための 60 のラットの最終的なグループを作成するのにはランダムに追加ラット、伝染病グループの 30 ラットおよび 30 ratsforthe コントロール グループを除外します。</li>
	<li>タグの実験の手順全体においてラット (番号のステッカーを使用して)。一時的に (同じ部屋で CUS、ショ糖、オープン フィールド テストのため暗いサイクルと別の部屋で暗いサイクル強制水泳テストおよびストレス (2.1.7 を参照) のいずれか) の実験の間に 1 つのケージにラットを転送し、彼らを戻す、ir 終わりに元の社会グループ。</li>
</ol>2. ラットにおけるうつ病の誘導するための手順
注: うつ病を引き起こすために、我孫子5 週間20のためのいくつかの操作の CUS 公開グループで 60 のラットを対象します。
<ol><li>ラットは毎日ランダムな順序で、次の 7 ストレスの任意の 2 を公開します。昼と夜、5 週連続で他に 1 つのストレッサー。<ol>
<li>グループ (6 ラット、18 h のケージごと、通常の 3 の代りに); でラットを家します。</li>
		<li>ラットが、傾斜ケージ (3 h の垂直軸に沿って 45 °);</li>
		<li>食べ物 (18 h); のラットを奪う</li>
		<li>水 (18 h) のラットを奪うし、急性水剥奪 (1 h); の期間の直後空の水のボトルにそれらを公開</li>
		<li>8 時間 (夜のサイクル); (寝具のこぼれた水 300 mL) と濡れたベッド ケージのラットを配置します。</li>
		<li>連続照明 (24 h) にラットを公開し、逆にダーク/ライト サイクル (12 h) 週 2 回。</li>
		<li>熱を上げるに使用される別の装置を (40 ° C、5 分 - 夜サイクル)、高温の環境でラットを配置します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>うつ病の開発を実行することによって確認、サッカロースの好みテスト (手順 4 を参照). 注: プロトコルを各上記の手順の後一時停止できます。さらに、その任意のラットによって任意の異常な動作が表示されている場合、ラットおよび不安定なラットによって影響されている可能性があります他のラットを排除します。</li>
</ol>3. 素朴なラットにおけるうつ病伝染を確立するための手順
<ol><li>30 お客さま公開 (60) からのラットの社会グループとうつ病-伝染病 (30) グループを確立します。<ol>
<li>30 の異なるケージ ケージごと 2 つお客さまに曝露されたラットを家します。</li>
		<li>我孫子 2 - を含む各ケージにうつ病感染グループから 1 匹のラットは、ラットを公開を追加します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>5 週間の食事の標準的な条件下での同居を許可し、水の利用可能な自由。</li>
	<li>同棲の 5 週間後対象のすべては、ショ糖の好み、オープン フィールド、および図 1に示す順序で強制水泳テストにグループ化します。</li>
</ol>4. ショ糖の好みテスト21
<ol><li>暗いサイクル中に住宅と同じ部屋に個々 のケージにラットを配置します。</li>
	<li>24 h の各ケージ内 100 mL 1% (w/v) ショ糖液のボトルを置き、適応を可能にします。</li>
	<li>ボトルを外し、食料や水に 12 時間のラットを奪います。</li>
	<li>場所 2 ボトル、ショ糖液 1% (w/v) と、4 h の各ケージ内の水道水 100 mL と他の 1 つ含む 100 mL。</li>
	<li>消費ショ糖溶液と水の両方の (mL) でボリュームを記録し、ショ糖の好みに親和性を次のように計算。 <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57137/57137eq1.jpg">
</li>
</ol>5. オープン フィールド試験
注: 標準的なオープン フィールド試験、探索的、自発、不安様行動と行動反応の実験動物22, 23で目新しさを評価するために使用されます。このテストは、抑うつの行動24を分析する示されています。オープン フィールド試験は 2 つの相反するパラメーターを調べノベルティー表現意欲に対して、フィールドの中央で輝く明るい光の齧歯動物の恐怖。ときに不安、齧歯動物は、発見と壁 (接触) での滞在を避ける傾向にあります。この不安は、明るい中央フィールドを回避の程度によって決定されます。黒つや消しアクリル ボックス (120 cm × 60 cm × 60 cm) から成る、オープン フィールドは、中央部 (25%) とボックス (75%) の残りの部分に分かれています。このテストは、暗いサイクル中に住宅として同じ部屋で行われます。フィールド上約 200 cm に一時停止ビデオ カメラは、オープン フィールド テスト22, 23を記録するために使用されます。
<ol><li>それぞれの動物の導入前に 5% のアルコールで装置をクリーニングします。壁に直面してオープン フィールドの隅にラットを配置します。</li>
	<li>5 分間ビデオカメラでのラットの行動を記録します。</li>
	<li>次のパラメーターの後の録音を分析: 総走行距離、フィールド、およびフィールドの中央部で過ごした時間の中央部の速度。</li>
</ol>6. 強制水泳テスト
注: 強制水泳テストの原理は、事実に基づくラット限られたスペースで泳ぐ時、最終的にあきらめて、時折21, 23を溺死を避けるために自分の体を移動、不動のまま。すでに組み立て装置の恐ろしさ、ためこのテストを行った別の部屋で暗いサイクル中に。
<ol><li>慣れ、ガラス シリンダー (身長 100 cm、直径 40 cm、深さ 40 cm) でラットを配置セッションの水泳 15 分の室温で水を含んでいます。</li>
	<li>シリンダー、紙タオルで乾かしてからラットを取り出し、15 分間の暖かいケージに置きます。</li>
	<li>その家 (元) ケージに戻るラット 注: プロトコルはここで一時停止することができます。また、このテストの過程で任意のラットを溺死している場合、直ちにそれを引き出します。</li>
	<li>次の日に 5 分泳ぐセッションをビデオテープに録画し、次のパラメーターの後の録音を分析: 不動、登山、および排便。</li>
</ol>

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著者が明らかに何もありません。

この議定書の適用で得られた結果によると人間のような健康なネズミは、長期間にわたって一緒に収容されて落ち込んでいるラットによって悪影響を受けた。詳細意気消沈したラットは、同棲、初めて異なる動物うつ病感染モデルの確立の 5 週間後既に落ち込んでいる相手の影響を受けた。豚より早い調査はまたうつ病と健康豚25間共有の感情的な法令を示唆していた。
ラットにおけるうつ病の誘導は、お客さまのアプリケーションで実現されました。このメソッドは、毎日の社会環境ストレスに共通の機能を表します。アーカイブは、お客さまが動物でうつ病を誘発する方法としては最もであることを示します。メソッド共有は、臨床症状や抑うつのような行動と強い類似性により得られた結果。ラットでそれを正しく使用する場合、すべてのラットのとりわけには抑うつの徴候26が知られています。ラットに適用されたときすべての抑うつ行動を引き出す能力は高い予測可能性と信頼性の高いうつ病を誘発する方法として CUS を検証し、妥当性<sup class="xref...

最近の回で実施テストは、精神科の病気が伝染1経由で健康な人に簡単に広げることができる示唆しています。この場合、それは社会的伝染病と呼ばれているし、影響、姿勢、または動作を介して 。これはのみ 1 つの 1 つの対話に落ち込んで、個々 またはそれによって感情の共有の促進より健全な個人を必要があります。社会的関係、それゆえ彼らは 1 人の個人から感情の擬態や「感情的な伝染病」を経由して、他への転送を定義する気分の非常に重要なコンポーネントです。伝染病を有効にするための時間枠は2感情の重症度と受信者の抵抗の強さに応じて必然的に異なります。
感情的な伝染の重要な結果は、負の側面に焦点を当てた研究が主に過去に作ったことを確保しています。負の影響の結果伝染病うつ病は伝染病うつ病増加うつ行動3を展示、落ち込んで、個々 の友人や家族の可能性を示す研究と、巨大な注目を受け取ったことを確認,4,5,6。
うつ病に取り組むこと個人的な経済的な理由があります。それは一般的に罹患率; を引き起こすその生涯発生率 13.3 とアメリカ合衆国7で 17.1% の間です。世界保健機関のファイルを示すうつ病がグローバル巨大な負担は、すべての性別、年齢、社会的背景の人々 に発生する疾患のリストには、同様に対話する能力に影響を与える、貧しい人々 の健康を負わせることができます。他の人と8,9,10,11、および原因過剰障害12,13。850,000 の生活は、各年14うつ自殺に失われると推定されます。通常、患者は抗うつ薬を処方または認知行動療法を受けることをお勧め。これらの treatmentshelp は約 60-80% の患者。ただし、病気を扱うまだ大きな問題が生じます治療はすべてのうつ病患者に使用できません。治療を受ける人のため、いくつかはガイドライン15に準拠他の悪い副作用を被る。治療抵抗性の患者の数は約 40% まで14。うつ病と経済はよく高価なトリートメント、労働力、そして早期退職16の減少の形に悩んでいます。$ 440 億米国での推定年間損失は、国の生産性の損失の17のほぼ半分を占めるうつ病が原因です。高価な治療には、さまざまな医療コストが増加し治療18に対する反応不良と同様に望ましくない結果の予想が必要になります注意してください医師の診察が必要です。
うつ病伝染のメカニズム、その予防および治療を勉強するすでに実績のある動物モデルに遭遇することがなく、この架空動物のプロトコルは初めて使用されました。それは、健康なラットは CUS 曝露したラットとの同居、を通じて、抑うつの行動を表現する傾向があるということを示唆しています。この実験の主な目的は、うつ病、伝染病、健康なものをお客さまに曝露されたラットからの経由での転送を強調した検査法を確立することだった。次に、結果を行ったうつ病伝染病はうつ症状のみに限定された場合、または不安など他の気分障害に関連していたかを判断します。実験の究極の目標よりよい新しい治療上のアプローチ19を開発する競争で伝染病のうつ病のメカニズムの理解に近づくことです。

<table><tbody><tr><td>ラットケージ</td><td>Techniplast</td><td>2000P</td><td>げっ歯類用の従来のハウジング。実験全体でラットを収容するために使用されました</td></tr><tr><td>水</td><td>-</td><td>-</td><td>一般的な水道水は、さまざまな段階で実験を通じて使用されました</td></tr><tr><td>ピュリナチョウ</td><td>ピュリナ</td><td>5001</td><td>ラット、マウス、ハムスターに与えられたげっ歯類の実験室用チャウは、50年以上にわたって生物医学研究に使用されてきたライフサイクル栄養です。この実験では、ラットに自由自在に提供される</td></tr><tr><td>ボトルテク</td><td>ニプラスト</td><td>ACBT0262SU</td><td>100mlの水と100mlの1%(w / v)ショ糖溶液で満たされた150mlボトル</td></tr>ブラック<tr><td>光沢のないパースペックスボックス</td><td>-</td><td></td><td>-(120cm&times;60cm;60cm)、25%の中央ゾーンと周囲の境界ゾーンに分割され</td></tr>た<tr><td>ビデオカメラ</td><td>キヤノン</td><td>-</td><td>オープンフィールドテスト下でのラットの行動を高解像度で記録するためのデジタルビデオカメラ</td></tr><tr><td>アルコール</td><td>薬局</td><td>-</td><td>99%の医薬品アルコールを5%に希釈し、各ラットの導入前にオープンフィールドテストボックスのlceaningに使用</td></tr><tr><td>ガラスシリンダー</td><td>-</td><td></td><td>高さ100cm、直径40cm、深さ40cmのシリンダー 強制水泳試験の実施に使用される</td></tr><tr><td>ペーパータオル</td><td>薬局</td><td>-</td><td>ネズミを水に浸した後、ネズミを乾いた状態に保つために使用されるドライタオル</td></tr><tr><td>太字マーカー</td><td>-</td><td>ラット</td><td>のラベル付けに使用される一般的な太字マーカー</td></tr></tbody></table>

ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

まだ完全に認識される現象であり、これは十分な材料を被験者から生じてうつ病は伝染します。現時点では、既存のアクション、防止、封じ込め、および伝染性のうつ病の治療のメカニズムを研究するための書式はありません。この研究の目的は、したがって、伝染性うつ病の最初の動物モデルの確立をだった。
意気消沈したラットにさらされた場合、健康なラットは抑うつの行動を契約できます。うつ病が慢性的な予測不可能なストレス (CU) のいくつかの操作に 5 週間以上を服従させることによってラットのプロトコルで説明するように誘導されます。ラットにおけるうつ病の開発を認識して成功したショ糖の好みテスト。お客さまに曝露されたラットはいた追加 5 週間素朴なラット伝染グループ (ケージ 1 世間知らずのラット/2 落ち込んでラット) から、ケージ。30 社会グループは、お客さまに曝露されたラットの素朴なラットの組み合わせから作成されました。
動物でこの提案うつ病伝染のプロトコルから成り同棲 CUS 公開および健康なラット 5 週間。この方法は、一連のテストが実施 - 最初に、ラット、うつ病を誘発する時にショ糖の好みテストを確実にし、スクロースの好み、テスト オープン フィールドと同棲期間の終わりに強制水泳テストと一緒に。実験中ラットはタグを与えられているし、各テスト後檻に常に返されます。
このメソッドにはいくつかの制限が弱い違いは実験の間に記録およびショ糖の好みテストおよび強制水泳テストの不可逆的な外傷性結果のグループを制御します。これらは、将来のアプリケーション プロトコルの前に適合性の検討に値するかもしれません。それにもかかわらず、次の実験、素朴なラット共有同じケージ、CUS に曝露されたラットの 5 週間後伝染病うつ病を開発しました。

サッカロースの好みテスト:うつ病の誘導 CUS の 5 週間のラットを公開し、さらに 5 週間のお客さまに曝露されたラットに健康なラットがその後公開した後は、ラットの両方のセットは、抑うつのような behaviorsat (図 2) 実験の終わりを表示されます。この現象の証拠は後に見られるショ糖の減らされた好み落ち込んでラット我孫子 (65 ± 2.8%、p &lt; 0.001、図 2) ときに比べて 30 ラット制御グループ (101 ± 7%、(図 2)。とき 60 のお客さまに曝露されたラットの実証 (72 ± 3.3%、p &lt; 0.001、図 2) の統計的に有意な変化を 10 週間後 30 うつ病感染ラット (76 ± 4.7 %p と同様コントロール群 (95 ± 3.4%、図 2)、30...

このプロトコルでは、健康なネズミが期の感染慢性予測への露出によって強調されたネズミは (CUS) 与えられた時間をかけてうつ病を契約、新しいモデルについて説明します。

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

このモデルの全体的な目標は、ラットのうつ病の伝染を確立することです。この方法は、伝染性うつ病の作用機序、予防、封じ込め、治療など、行動分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、これが伝染性うつ病を確立するための新しいモデルであることです。この技術の意味は、現時点では伝染性うつ病を研究するための既存の形式がないため、うつ病の治療にまで及びます。実験手順では、明白な病状がなく、各体重が300〜350グラムの雄のSprague Dawleyラットを選択します。ケージごとに3匹のネズミを飼い、チャウと水を自由に利用できます。12時間の明暗サイクルで最低2週間の適応を見込んでください。実験を開始する前に、3日間のショ糖選好試験を使用して、すべてのラットに抑うつ様行動の存在をテストします。.これを行うには、暗いサイクルの間に、ラットをハウジングと同じ部屋の個々のケージに入れます。100ミリリットルの1%スクロース溶液のボトルを各ケージに24時間置き、適応させます。24時間後、ボトルを取り外し、ラットから餌と水を12時間奪います。12時間後、100ミリリットルの1%ショ糖溶液と100ミリリットルの水道水が入った2本のボトルを各ケージに4時間置きます。4時間後、消費したショ糖溶液と水に関する容量をミリリットル単位で記録し、図のようにショ糖選好に対する親和性を計算します。うつ病の検査で陽性となったラットを排除し、次にうつ病のラットと同じケージに収容されていたラットを排除します。必要に応じて、追加のラットをランダムに除外して、最終的なグループを作成します。番号付きのステッカーを使用してネズミにタグを付けます。うつ病を誘発するには、慢性予測不能なストレスにさらされたグループの60匹のラットに、次の7つのストレッサーのいずれか2つをさらします。5週間連続でランダムな順序で、1つのストレッサーを日中、もう1つを夜間に使用します。ケージごとに通常の3匹ではなく6匹のラットを18時間配置することにより、ラットをより大きなグループに収容します。ラットを垂直軸に沿って45度傾けたケージに3時間置きます。食べ物は18時間ラットを奪います。ラットから水を18時間奪い、1時間後に空の水筒にネズミをさらします。夜のサイクル中に8時間、ネズミを濡れた寝具のあるケージに入れます。ラットを週に2回、逆の明暗サイクルで24時間連続照明にさらします。ラットを摂氏40度に設定された高温環境に、夜間サイクル中に5分間置きます。選択した 2 つのストレッサーにさらされた後、ショ糖選好テストを実行してうつ病の発症を確認します。まず、ケージごとに2匹のCUS曝露ラットを30の異なるケージに入れます。次に、うつ病伝染グループから1匹のラットを、2匹のCUS曝露ラットを含む各ケージに追加し、標準条件下で

a-new-method-for-inducing-a-depression-like-behavior-in-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

行動

この動画では、マウスの固定化を繰り返すことで慢性的なストレスを誘発し、コルチコステロンの放出とニューロンのグルタミン酸受容体活性の低下を引き起こし、うつ病のような行動を引き起こす方法を実演しています。...

固定化ストレスによるマウスのうつ病様行動の誘導

出典: Rich, MT, et al.ラットにおける神経可塑性を逆転させ、コカイン探索を阻害するための光遺伝学の利用J. Vis. 経験。(2021年)このビデオは、光遺伝学を使用して、内側膝状核から外側扁桃体 (MGN-LA) シナプスに長期抑制 (LTD) を誘発し、ラット モデルにおける手がかり誘発性麻薬探索行動を弱める方法を示しています。ラットは外科的に光ファイバーを埋め込み、光感受性イオンチャネルを発現するようにウイルス形質導入され、低周波光パルスによる光遺伝学的刺激を受け、神経伝達物質の放出とシナプスの弱体化を引き起こします。このプロセスは、神経伝達物質受容体の内在化を通じて MGN-LA...

ラットにおける麻薬探索行動を抑制するための長期うつ病の光遺伝学的誘導

このプロトコルは、げっ歯類の抑うつ的な行動の研究に使用される強制水泳テストを説明しています。この手順では、水で満たされた容器に動物を入れ、最終的には不動行動を示すことになり、これは行動の絶望を反映していると考えられています。...

うつ病のような動作のモデルとしての強制水泳試験

ここでマウスで予測不可能な慢性的な軽度ストレス...

マウスで無快感を誘導するため予測不可能な慢性的な軽度ストレス プロトコル

ここでは、内部頚動脈を介して中大脳動脈を閉塞させることによってラットに脳卒中後うつ病を誘導するプロトコールを提示する。私達は誘発された抑うつ気分を確認し、評価するために Porsolt...

ラットの脳卒中後うつ病を誘導するための中大脳動脈閉塞技術

この記事では、拘束を用いて慢性固定化されたマウスにおける抑うつ様行動の誘導のための簡略化された標準化されたプロトコルを提供する。また、うつ病の誘導を検証する行動や生理学的手法について説明する。...

マウスにおけるうつ病様行動を誘導する慢性固定化ストレスプロトコル

ここに提示されたラットのうつ病のような行動とアンヘドニックな行動を研究するためのプロトコルです。これは、2つの確立された行動方法、スクロースの好みと新規性誘発性低phphagiaテストを組み合わせて、自動食品および液体摂取量監視システムを組み合わせて、代理パラメータを使用してげっ歯類の行動を間接的に調査します。...

自動食物摂取モニタリングシステムを用いたラットにおけるショ糖嗜好と新規性誘発性低血圧試験

このプロトコルは、ラットモデルにおける社会階層を調べる方法を記述する。ラットは、水中でダイビングし、食べ物のペレットを得るために泳ぐ意欲に応じて明確な階層を形成する複雑なダイビング・フォー・フード・タスクを実行します。この方法は、小さなグループの非常に社会的な動物間の意思決定と社会的関係を理解するために使用されます。...

ラットの社会組織と相互作用を調査するための複雑なダイビング・フォー・フード・タスク

この記事では、マウスとラットの身体拘束ストレスを使用してストレス応答を誘発する手順について説明します。げっ歯類モデルで拘束応力を選択して使用する際に注意すべき追加の考慮事項について説明します。...

マウスおよびラットにおけるストレス誘発抑制

この記事では、躁病様と抑うつ様の両方の行動を捉える双極性障害のユニークなラットモデルの誘導のためのプロトコルを紹介します。...

双極性障害のラットモデルの開発

ここでは、うつ病のマウスモデルにおける食欲刺激と嫌悪臭刺激の両方に対する否定的な嗅覚バイアスの評価を可能にする嗅覚選好テストのプロトコルを紹介します。...

うつ病のマウスモデルにおける嗅覚快楽バイアスを測定するための嗅覚選好試験

学ぶラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法。慢性予測不能ストレス（CUS）を用いて、健常ラットがうつ病様行動を獲得する伝染性うつ病モデルを確立する手法を解説します。

ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法

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