ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法

このモデルの全体的な目標は、ラットのうつ病の伝染を確立することです。この方法は、伝染性うつ病の作用機序、予防、封じ込め、治療など、行動分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、これが伝染性うつ病を確立するための新しいモデルであることです。

この技術の意味は、現時点では伝染性うつ病を研究するための既存の形式がないため、うつ病の治療にまで及びます。実験手順では、明白な病状がなく、各体重が300〜350グラムの雄のSprague Dawleyラットを選択します。ケージごとに3匹のネズミを飼い、チャウと水を自由に利用できます。

12時間の明暗サイクルで最低2週間の適応を見込んでください。実験を開始する前に、3日間のショ糖選好試験を使用して、すべてのラットに抑うつ様行動の存在をテストします。.これを行うには、暗いサイクルの間に、ラットをハウジングと同じ部屋の個々のケージに入れます。

100ミリリットルの1%スクロース溶液のボトルを各ケージに24時間置き、適応させます。24時間後、ボトルを取り外し、ラットから餌と水を12時間奪います。12時間後、100ミリリットルの1%ショ糖溶液と100ミリリットルの水道水が入った2本のボトルを各ケージに4時間置きます。

4時間後、消費したショ糖溶液と水に関する容量をミリリットル単位で記録し、図のようにショ糖選好に対する親和性を計算します。うつ病の検査で陽性となったラットを排除し、次にうつ病のラットと同じケージに収容されていたラットを排除します。必要に応じて、追加のラットをランダムに除外して、最終的なグループを作成します。

番号付きのステッカーを使用してネズミにタグを付けます。うつ病を誘発するには、慢性予測不能なストレスにさらされたグループの60匹のラットに、次の7つのストレッサーのいずれか2つをさらします。5週間連続でランダムな順序で、1つのストレッサーを日中、もう1つを夜間に使用します。

ケージごとに通常の3匹ではなく6匹のラットを18時間配置することにより、ラットをより大きなグループに収容します。ラットを垂直軸に沿って45度傾けたケージに3時間置きます。食べ物は18時間ラットを奪います。

ラットから水を18時間奪い、1時間後に空の水筒にネズミをさらします。夜のサイクル中に8時間、ネズミを濡れた寝具のあるケージに入れます。ラットを週に2回、逆の明暗サイクルで24時間連続照明にさらします。

ラットを摂氏40度に設定された高温環境に、夜間サイクル中に5分間置きます。選択した 2 つのストレッサーにさらされた後、ショ糖選好テストを実行してうつ病の発症を確認します。まず、ケージごとに2匹のCUS曝露ラットを30の異なるケージに入れます。

次に、うつ病伝染グループから1匹のラットを、2匹のCUS曝露ラットを含む各ケージに追加し、標準条件下で5週間同居できるようにします。同棲の5週間後、すべてのグループにショ糖選好、オープンフィールド、および強制水泳テストを施します。各動物を導入する前に、5%アルコールで装置を清掃してください。

壁に面したオープンフィールドの角にネズミを置きます。ネズミの行動をビデオカメラで5分間記録します。フィールドの中央部での総移動距離、速度、フィールドの中央部で費やした時間のポストレコーディングを分析します。

慣れのために、ラットを室温で水の入ったガラスシリンダーに15分間の水泳セッションを置きます。ラットをシリンダーから取り出し、ペーパータオルで乾かし、暖かいケージに15分間置いてから、ラットをホームケージに戻します。翌日、5分間の水泳セッションをビデオに録画し、不動、登山、排便の録画を分析します。

うつ病の誘発のためにラットを5週間のCUSに曝露した後、続いて健康なラットをさらに5週間CUS曝露ラットに曝露した後、両方のラットのセットは、ショ糖に対する嗜好の低下によって示されるように、最後に抑うつ様行動を示しました。オープンフィールドテストでは、CUS曝露感染群とうつ病感染群の両方のラットは、対照群と比較して総移動距離が減少し、平均速度が減少しました。2つの実験群の対照群のラットが野原の中央で過ごした時間は、有意差はありませんでした。

CUSに曝露したラットとうつ病の伝染ラットは、強制水泳試験後に長時間の不動性を示しました。ただし、対照群と比較すると、CUSに曝露されたグループでのみ、有意に長い非アクティブ時間が登録されました。調査された別の強制水泳テストパラメータであるクライミング時間では、CUS曝露ラットと伝染性うつ病ラットの両方のグループは、対照グループと比較した場合、非常に限られたクライミング特性を示しました。

排便率の評価により、対照群と比較して、両方の実験群に大量の糞便が登録されました。この手順を試みる際には、肉体労働の需要が高いため、慢性的な予測不可能なストレスモデルでは、ストレッサーのランダムな回転を事前に計画することを覚えておくことが重要です。この手順に続いて、うつ病後の行動の変化をさらに調査するために、昇格プラス迷路やミラーテストなどの他のテストを実行できます。