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DOI: 10.3791/58371-v
Tatsuo Ito1, Keiki Ogino1, Kenjiro Nagaoka1, Kei Takemoto1, Rina Nishiyama1, Yurika Shimizu2
1Department of Public Health,Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry, and Pharmaceutical Sciences, 2Department of Pathophysiology-Periodontal Science,Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
高性能液体クロマトグラフィー-電気化学検出器 (HPLC-ECD) を使用して空気サンプラー プリフィルターからカット 6 mm ラウンド 3-ニトロチロシン大気タンパク質の化学修飾を検出する手法を提案します。
この方法は、ニトラピリンと3-ニトロチロシンに関する環境研究の重要な質問に答えることができます。.この技術の主な利点は、それが空気サンプルフィルター上の3-ニトロチロシンを検出するためのユニークで高感度な方法であるということです。全懸濁粒子または粒子状物質の全粒径を7ミクロン未満で収集するには、まずバインダー3石英フィルターを計量し、大量の空気サンプラーに固定します。PM7を収集するために、粒子サイズセレクターでフィルターを覆うか、収集された総懸濁粒子にフィルターを覆い隠したままにします。1分間に1000リットルのエアサンプラーを7日間連続して実行します。サイズ分類ユニットにプリフィルターをロードし、サイズ分類ユニットとバックアップフィルターを少量のエアーサンプラーに取り付けます。バックアップフィルターでPM2.5を収集するために、毎分116リットルで連続して116リットルでエアサンプラーを実行します。サンプリングが終了すると、合計フローボリュームを記録します。フィルターの重量を量り、収集したパーティクルの重量を計算します。フィルターをビニール袋に密封し、摂氏30度で保管します。充填された膜を酢酸緩衝液1 Lに浸し、摂氏4度で24~36時間攪拌し、12時間ごとにバッファーを交換して内因性の3-ニトロチロシンおよび亜硝酸塩を除去し、次いで、バイチンチオン酸タンパク質アッセイで透析プロテアーゼ溶液中のタンパク質濃度を測定する。その後、冷凍庫からフィルターを取り外し、袋に密封したまま室温まで暖めます。次に、フィルターの粒子状物質被覆領域から最大5つの6ミリメートル幅の円をパンチし、1.5ミリリットルのマイクロ遠心分離管に円を入れ。50を含む酢酸緩衝液の300マイクロリットルを準備する
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