2018年11月30日
臭気媒介昆虫の行動のアッセイのためここでは、建設と風洞の使用を述べる。風洞の設計により視覚刺激といくつかの方法、臭いの源のリリース。風洞実験は、行動的にアクティブな揮発性化学物質を識別するために重要なメソッドです。
この方法は、行動活性成分の同定など、化学生態学の分野における重要な質問に答えることができます。この技術の主な利点は、さまざまな方法で臭気を放出することができ、昆虫の行動レパートリー全体を監視できることです。ゴムバンドを使用して、ガーゼでガラス管を準備します。
調製されたガラス管に10個の昆虫を分離し、残りの端をプラスチック製のスナップキャップで覆います。昆虫が風洞室の温度、光条件、湿度に少なくとも2時間順応するようにします。ここでは、噴霧器プロトコルが臭気源を準備するために実証されています。
1ミリリットルのガスタイトな注射器に合成臭いミックスを充填し、シリンジをシリンジポンプに挿入します。チューブアダプターを使用して、シリンジ先端をフッ素化エチレンプロピレンチューブに接続します。さて、シリンジポンプを起動し、続いて広帯域超音波発生器を起動します。
噴霧器からのエアロゾルの放出は、放出点の下からの光をポイントで確認することができる。昆虫を入れたガラス管を、嗅覚源から180センチメートルの風下のホルダーに、地面から30センチメートルに置きます。上限の端は、上風を指す必要があります。
プロトコルを開始するには、キャップを開いてタイマーを開始します。飛行パターンを観察し、飛行特性と風上の向きに特別な注意を払ってください。ここに示されている、着陸のない指向飛行です。
着陸を伴う方向飛行は、コントロールとして含まれている自然な臭い源で、ここに示されています。離陸のクローズアップだけでなく、自然の臭い源に着陸のクローズアップも見ることができます。離陸、短距離での指向飛行、長距離飛行、着陸など、事前定義された動作カテゴリに従って飛行性能をスコアリングします。
風洞の壁に着陸する昆虫を、臭いプルームの外に集め、ホルダーに戻します。純粋なエタノール専用の別のシリンジを使用して、すべての洗浄に使用します。96%エタノールでスプレーを実行し、処理の間に最低10分間、チューブとノズルの内部を洗浄します。
使用後、96%エタノールで注射器とノズルの先端を洗浄してください。完成したら、金属とガラスのハードウェアをすべてエタノールと水で洗い、乾燥するまで放置します。すべての金属とガラスのハードウェアを摂氏300度に6時間加熱し、汚染物質を取り除きます。
ブローハエの視覚的に誘導された臭気応答がここに示されています。視覚刺激の有無にかかわらず飛行行動の詳細を研究した。着陸応答には視覚的な手がかりが大きく影響しましたが、他の行動ステップには影響しませんでした。
エンドウ豆の植物とそれに対応する揮発性のコレクションに対するエンドウガの着陸応答の比較をここに示します。同様の着陸は、両方のタイプの手がかりに向かって記録されました。エンドウ豆の花の揮発性の合成ブレンドは、天然花の揮発性と比較して、わずかに低い着陸をもたらしました。
ここでは、合成ブレンドに対するリンゴ果実の蛾応答に対する植物揮発性の背景の効果を示す。複雑なブレンドとシンプルなブレンドを持つ臭気ディスペンサーは、同様の風上の引力をもたらし、きれいな背景を持つ。しかし、リンゴ揮発性バックグラウンドに埋め込む場合、蛾は複雑なブレンドを好んだ。
この手順を実行する場合は、フライト パターンが均一ではないことを覚えておくことが重要です。それは昆虫の注文によって大きく異なります。ブローハエは強いチラシであり、蛾に比べてより広いキャスティングの動きを持っています。
風洞は、手元の質問に応じて、風洞に臭いを放出するための多数の方法を容易にします。私たちは、本物のソース、合成ミックス、およびヘッドスペースのコレクションから、臭いディスペンサーから解放することができます。また、特定の臭気を背景臭気の上に放出することができ、我々は異なる視覚刺激を使用することができ、我々は、2つの選択肢バイオアッセイを行うことができます。
風洞実験は、応用研究と基礎研究の両方において、行動活性化合物および化学物質を同定する上で重要なツールです。良い例は、害虫駆除のためのツールを開発したい場合です。
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本記事では、昆虫の臭気媒介行動検定に用いる風洞装置の構築とその使用方法について解説します。この設計により、さまざまな手法で臭気源を放出させることが可能となり、化学生態学における重要な実験を促進します。
風洞を用いた臭気介在性行動検定は、昆虫の嗅覚駆動行動を詳細に分析するための制御された定量的なプラットフォームを提供し、害虫防除の研究開発における初期段階のターゲットバリデーションに直接的な知見を与えます。この手法により、候補となる揮発性物質に対する行動反応を精密に測定することが可能となり、誘引剤や忌避剤の同定における予測の信頼性が向上します。本手法は、研究室での発見とトランスレーショナルな応用を橋渡しし、リスクを調整した新しい化学生態学ツールの開発を促進します。
この風洞アッセイは、創薬から前臨床に至る一連のプロセスのなかに位置づけられ、昆虫の行動を変化させる化合物の早期の仮説検証、リード化合物の同定、およびトランスレーショナルな妥当性確認を可能にします。