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DOI: 10.3791/58696-v
Frederico Gerlinger-Romero1, Alex B. Addinsall2, Richard M. Lovering3, Victoria C. Foletta4, Chris van der Poel5, Paul A. Della-Gatta4, Aaron P. Russell4
1School of Exercise and Nutrition Sciences,Deakin University, 2Centre for Molecular and Medical Research, School of Medicine,Deakin University, 3Department of Orthopaedics, School of Medicine,University of Maryland, 4Institute for Physical Activity and Nutrition (IPAN), School of Exercise and Nutrition Sciences,Deakin University, 5Department of Physiology, Anatomy and Microbiology,La Trobe University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
齧歯動物の骨格筋収縮機能の測定は、治療的介入の有効性と同様、病気の進行を追跡するために使用できる便利なツールです。私たちはここで同じマウスで時間をかけて繰り返すことができる内がえし筋の非侵襲的体内評価について説明します。
このモデルは、筋収縮機能の分野で重要な質問に答えることができます。力の生産のメカニズムなどは、疾患進行の間に。この技術の主な利点は、この手順は、疾患の進行および治療を監視するために、異なる時点で同じ動物に対して行うことができる非侵襲的である。
この方法の視覚的なデモンストレーションは、これらの手順のいずれかを変更すると、結果の変動性が高まる可能性があるため、重要です。したがって、より一貫した結果を得ることができる場合があります。この手順を開始するには、プラットフォームにマウスの膝クランプを設置し、トランスデューサにマウスのフットプレートを設置します。
その後、暖房プラットフォームを摂氏37度にします。デスクトップでダイナミックな筋肉制御ソフトウェアを開きます。セットアップのドロップダウン リストで、インスタントステムを選択し、実行時パラメータを 120 秒に変更します。
「自動保存ベース」というラベルのウィンドウで、自動保存ファイルの場所の名前を入力します。自動保存ベースウィンドウの左にあるチェックボックスをオンにし、自動保存を有効にするように変更します。DMC コントロール画面の上部で、シーケンサーをクリックすると、新しいポップアップ ウィンドウが開きます。
開いているシーケンスを選択し、使用するプロトコルを選択します。次に、ロードシーケンスをクリックしてウィンドウを閉じます。実験のために動物を準備するには、電気毛バリカンでマウスの右足の毛を取り除きます。
加熱されたプラットホームの上のsupineの位置に動物を置き、70%アルコールとヨウ素で右足をきれいにしなさい。この時点で、イオブルランを1分あたり1リットルの酸素流で2%に調整してください。フットプレートに足を置き、医療テープを使用して固定します。
次に、電極が配置される皮膚に導電性ゲルを塗布します。次に、手順中に脚を安定させるために膝をクランプします。足首に90度の角度を形成するために、後肢を配置するためにプラットフォーム上のノブを使用してください。
マウスをプラットフォームに固定したら、電極を右脚の皮膚の下に置き、1つはフィブラの頭部の近くに、もう1つの電極は脚の側面にもっと遠位に置きます。電極は、ペロン神経の十分な刺激を達成するために慎重に配置されています。また、この位置は、画面に視覚化され、安定したピークに達するように調整することができます。
これらのステップが達成されたら、高出力の二相刺激装置を調整して、最大の反射トルクをもたらすペロン神経の刺激を得る。刺激の間、電極がペロネアル神経によってドーシ屈筋だけを刺激していることを確認するために重要である負の値を得るためにトランスデューサを時計回りに回す。このステップが達成されたら、プロシージャ中の動きを防ぐためにクランプを使用して電極を安定させます。
負のピークをゆっくりと徐々に達成することは、電極が正しい位置に配置され、最大の力を達成するのに十分な電圧であることを確認するために重要です。続いて、ソフトウェアのインスタントステムを停止します。メイン画面で、開始シーケンスというボタンをオンにして、前の設定シーケンスを開始します。
力の測定が完了したら、電極を取り外し、フットテープを取り外し、膝クランプを解放します。イオフイオフと数分間の酸素の供給を維持し、動物の回復を支援します。マウスが動き始め、意識を取り戻したら、ケージに戻します。
このグラフは、マウスからの代表的な力周波数曲線データを時間をまたいで示し、5つの時点まで週に1回手順を繰り返した。これらの観測値は、時間ポイント全体で一貫した力の生産値を示しています。この手順はまた、FFC刺激の曲線の下で、FFC刺激の曲線の下で、異なるマウス間で一貫していることも示している。
その開発後、この技術は、神経筋疾患の分野の研究者が病気のミラーリングモデルにおける筋肉機能の時間的変化を調査することを可能にする。
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