Name: ラットにおける 1 吻合胃バイパス (OAGB) (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: 学ぶラットにおける1吻合胃バイパス（OAGB）の手術法。管状胃嚢作成と手縫い吻合を用い、ヒトと同じ胆膵管脚比率を再現する代謝外科の動物モデルです。術後の糖代謝と胃粘膜への長期的影響を研究できます。

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著者は彼の定数のヘルプとサポートのジャン ・ ピエール Marmuse を感謝したいです。エグランタイン Voitellier、ジャン = バティスト ・ Cavin、およびモデルと、イラストの設定 Houneyda エル金地アン シャーロット ジャリ、Andreia ゴンサルヴェスのビデオ;サラ ・ j ・ Zaat 英語でテキストを編集します。マチュー A. シーベルトとララ リベイロ Parenti 後援、財団からの受信者を注ぐラ精選された médicale (FRM) および協会・ フランセーズ ・ デ ・よう (AFC) であった。

すべての動物使用欧州共同体ガイドラインに適合したし、ローカル倫理委員会によって承認された (Comité d'éthique アン expérimentation animale N ° 121) 省の高等教育と研究 (Ref #02285.03)。
1. 動物とダイエット
<ol><li>
ラット
	<ol>
<li>260 320 g、高脂肪食 (HFD) 7 週齢で開始の重量を量る Wistar ラットを使用します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
ダイエット
	<ol>
<li>食餌誘導性肥満、HFD の術前数週間、少なくとも 12 を誘発します。水と HFD をラットの無料のアクセスを与えます。 注: HFD は、45% を含んでいる精製所 hypercaloric 齧歯動物ダイエット脂肪 (材料の表を参照してください)。</li>
		<li>ラットが 600-800 g の間で重量と、手術の時に肥満であることを確認します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 材料
<ol><li>
手術用機器
	<ol>
<li>オートクレーブ手術前にすべての手術器械。</li>
		<li>手続きに必要なすべての手術器具をレイアウト (材料の表を参照してください)。</li>
		<li>従来、顕微鏡下の楽器を使用して、拡大鏡下で吻合を実行します。</li>
		<li>ラットは、37 ° C の熱ランプの下で温度で温暖化のプレートに配置されることを確認します。必要に応じて、等温の電気基板を配置します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
麻酔と動物の準備
	<ol>
<li>齧歯動物で麻酔導入のための空気で 3% 集イソフルレンの吸入ラットを麻酔します。</li>
		<li>温暖化のプレートにラットを転送および 3% 同じ流量でフェイス マスクで麻酔を維持します。動物の尻尾をつまんで、anesthetization が完了したことを確認します。</li>
		<li>開腹術の切開ゾーン、~ 3 cm に対応する前方の毛皮を剃る-電気かみそりを使用して動物の骨盤に、剣から広いゾーン。</li>
		<li>動物の首を中心とした動物の背中に 3 cm 幅のゾーンを剃る。この手順は、単極パワー伝導を促進します。</li>
		<li>サイト運営上、アルコール ベースの消毒液をスプレーします。</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 手術
<ol><li>
開腹
	<ol>
<li>剃毛の皮膚にアルコール ベースのローカル防腐剤を適用します。</li>
		<li>メスで長さ約 3 センチの剣状突起から正中皮膚切開で腹部を開きます。筋膜と腹膜に沿って開く、リネア アルバ単極メスを使用します。</li>
		<li>皮膚切開の長さ全体に腹膜腔を開くことを確認します。 自己リトラクターで腹腔内を公開します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
大きいカーブと裂孔の解剖
	<ol>
<li>外科はさみと腹部食道の左側に腺および nonglandular 胃間の接合部から大きい胃曲線を解剖します。</li>
		<li>徐々 に、彼の偉大な胃曲線を完全に解放するためにモノポーラのメスと胃脾血管を凝固角度。薄い靭帯の切断によって食道裂孔の周辺は、公開します。</li>
		<li>左胃動脈と迷走神経神経、手動凝固切開装置を使用して維持、腹部食道の右側を解剖します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
胃の袋菓子
	<ol>
<li>
Nonglandular 胃切除
		<ol>
<li>適用 35 mm ステープル胃食道接合部の左側にある胃腺と nonglandular 間の接合部 (材料の表を参照) を銃。Nonglandular 胃をホッチキスの右側にあるを確認します。</li>
			<li>銃を発射し、nonglandular 胃を削除します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>
胃ポーチ
		<ol>
<li>開腹 (TA) デバイス (3 〜 3.5 mm) を使用して 2 番目のホッチキスを適用、最初ステープルの前庭部と胃体部を除外する胃食道接合部の右側に平行に (材料の表を参照してください)。</li>
			<li>定番の 2 行の結果が胃ポーチ幅約 0.5 cm であることを確認します。</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
OAGB
	<ol>
<li>
小腸の測定
		<ol>
<li>下の角度を探します。近位空腸は小腸部分のコロンの内側の部分の下にあります。ラット小腸のだけ非モバイルの一部です。</li>
			<li>5 cm 長いテープで下の角度から 35 cm を手動で測定します。対側腸の punctiform 結石を実行します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>
主吻合
		<ol>
<li>胃嚢の大きい曲線側をモノポーラ メス punctiform 胃を実行、正確に前の 2 つの定番ライン。胃ポーチが完全でない場合は、空、それを空にする胃ポーチに手動で穏やかな圧力を実行します。</li>
			<li>非外傷性鉗子と小さな針ホルダー側に主吻合を行います。</li>
			<li>7-0 アイソタクチックポリプロピレンの 2 つの下肢ステッチで縫合を開始 (材料の表を参照)、結石の四肢と胃の両端を縫合します。</li>
			<li>その後、2 下肢ステッチで使用される同じスレッド、吻合部のそれぞれの側に 2 つ実行縫合を実行します。必要な場合は、操縦を容易にする吻合を返します。近くに配置することによって吻合の品質ステッチ、少なくとも 7 または 8 吻合部の両側を確認します。</li>
			<li>すべてのステッチの 1 mm 幅の漿膜を取る。ステッチでそっと縫合中腸と胃の粘膜を埋めるために、粘膜の服用を避けます。 注: この結果は左側の胆道膵下肢と右の消化 (AL)/CL terminolateral 主吻合です。吻合部は胃ポーチに穏やかな圧力と透過性を確認します。</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
閉鎖と即時ケア
	<ol>
<li>0.9 %nacl 水溶液で腹腔内を洗浄し、手動で、生理学的な位置に腹部臓器を置き換えます。</li>
		<li>すぐの 1 つ実行縫合と腹壁はポリエステル縫合糸 2-0 (材料の表を参照してください) 古典のニードル ホルダーを編みこみ。</li>
		<li>Polyglactin 910 4-0 (材料の表を参照) の 1 つの実行縫合で皮膚を閉じます。</li>
		<li>術中の各側にリドカイン 1% の 2 つの頭頂部注射を実行します。直腹筋の腱膜にリドカイン 1 %1 mL/kg の総線量を管理します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. 術後のケア
<ol><li>20,000 単位/kg ペニシリン g. の筋肉内注射を行う</li>
	<li>等張性高分子ソリューション カリウム (KCl/L の 2 g、4 g/L の NaCl の 50 g のグルコース/L) の 10 mL の皮下注射を行います。この注射でブプレノルフィン (0.1 mg/kg) やメロキシカム (2 mg/kg) など適切な鎮痛剤と混合することが可能です。</li>
	<li>ランプがウォーム アップまで完全に目を覚ましている個々 のケージにラットを配置します。</li>
	<li>よく適切な鎮痛と水和 (等張性高分子溶液) 術後治療を管理するために動物を検査します。</li>
	<li>適切な鎮痛薬を注入、ブプレノルフィン (0.1 mg/kg) およびメロキシカム (2 mg/kg)、皮下から即時術後期間日 4、12 時間間隔をそれまでいます。</li>
	<li>1 日目の中に水への無料アクセスとラットを維持します。日に 2/3 無料で液体ダイエットへのアクセスを与える。4 日目、通常の食事にそれら自由アクセスを与えます。</li>
</ol>

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</ol>

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このプロトコルには、OAGB 人間で定期的に練習を模倣するという利点があります。その安全性とラットにおける再現性は臨床的、代謝の結果で実証されています。
このプロトコルでは吻合は技術的な難しさを提起、メインの重要なステップです。このため、マイクロサージャリーの針ホルダーやルーペなど、特定の顕微鏡下ツールを使用する必要です。任意の狭窄なしハーメチック吻合を実現するために吻合部のそれぞれの側で少なくとも 7 ~ 8 近い縫合を実行し、任意のステッチの縫合中、それを埋めるために任意の粘膜の服用を避ける必要があります。前述の通り、痛み、動物福祉、進歩的な術後栄養の効果的な管理は必須です。
しかし、このプロトコルには、いくつかの制限があります。まず、外科的アプローチは、動物のサイズが小さいため、腹腔鏡ではなく開腹手術です。胃嚢の右側の区分がないです。この選択は、技術的な理由のためにしました。それにもかかわらず、胃ポーチの repermeabilization は観察されていない 15 術後数週間後。さらに、ラットの制限的効果を模倣非常に...

病的肥満は増加する有病率1と、西部の世界で主要な健康問題です。肥満手術は、病的肥満の2肥満に伴う合併症3の明確な利点を持つ唯一の長期治療を残っています。ルー-EN-Y 胃バイパス (RYGB) 残る金本位最古の手順のいずれか、ほとんど実行の 1 つとして世界最長のフォロー アップ4。OAGB は、ラトリッジ52001年で最初に説明最近の手順です。それは RYGB6に効果的な代替として記載されているし、いくつかの利点があります。初期データは、体重減少と併存疾患の肥満関連6、7の解像度に関して RYGB に同様の有効性を示します。さらに、RYGB の jejunojejunal 吻合の漏れや狭窄のリスクは回避され、内ヘルニアのリスクが RYGB8よりも低い可能性があります。
肥満手術後の重量損失の基礎となる生理学的メカニズムは残る論争と人間9で勉強することは困難。動物モデルがどのように肥満手術を理解するのに役立ちます糖代謝、神経内分泌の変更、または満腹感のメカニズムに影響を与える可能性があります。プロシージャ間の比較データが不足していると、これらの手術の長期的な影響より良い理解10する必要があります。完全に術前・術後の臨床ケアを標準化することが可能だし、満足のいくフォロー アップを達成するために困難にすることができます: 最初の年11の 30% としていくつか研究レポートの損失-に-フォロー アップの率します。
胃バイパス手術の概念は適度な吸収不良、胃腸管内輸送から近位空腸十二指腸の除外に伴うと胃ポーチを作成するための限定的なプロシージャの組み合わせ。現在、肥満手術における下肢長はまだ議論12,13の問題です。使用可能なデータ表示のプロシージャおよびコンセンサスは得られなかった高い可変性に OAGB14,15に最適な下肢長にまだ達した。それにもかかわらず、多くの著者は、OAGB16,17,18の標準として全長 200 cm BPL を報告しています。小腸の平均の長さは約 700 cm19です。
袋サイズ、手足の長さ、および迷走神経の保存の面で大きな変化と、世界20RYGB のいくつかの齧歯動物モデルを開発しました。しかし、非常に少数の著者報告モデル実験 OAGB;このため、研究チームは、肥満の外科医と共同で OAGB のモデルを開発しました。モデルの開発の後ろの理論的根拠は、人間で練習される胃のバイパスを模倣することでした。モデルには、前庭部と胃体の除外で胃嚢の構造が組み込まれています。それは、外科医のステープル デバイスを使用して nonglandular 胃切除になります。人間の手術21のルーチンは、以前のプロトコル20と比較して、罹患率を減らすために手術ごとの予防的抗生物質治療を追加することを決めたチーム胃腸吻合にリンクされています。
BPL と人間で CL 比を再現するこのモデルで使用されるラット下肢長が選ばれました。予備測定は、90 と 120 cm22の間にあるラットの総小腸の長さを示しています。その結果、OAGB の選ばれた BPL の長さ 35 cm であった。さらに、このモデルは、胃ポーチ虚血を回避するすべての血管結紮することがなく実用的です。

<table><tbody><tr><td>高脂肪ダイエット、45%脂肪&nbsp;</td><td>Genestil、Royaucourt、フランス</td><td>C 1090-45</td><td></td></tr> <tr><td>http://www.genestil.com/ Metzenbaum Scissors</td><td>World Precision instrument、サラソタ、米国</td><td>501739</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>Dumont Tweezers</td><td>World Precision instrument、サラソタ、US</td><td>14098</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>Iris Forceps</td><td>World Precision instrument、サラソタ、US</td><td>15915</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>アイリスはさみ10cm</td><td>世界精密機器、サラソタ、米国</td><td>14218</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>世界精密機器、サラソタ、米国</td><td>14110</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>アルム自己保持リトラクター</td><td>世界精密機器、サラソタ、米国</td><td>14240</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>ベビーミクッター止血鉗子、&nbsp;直角</td><td>世界精密機器、サラソタ、米国</td><td>501240</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>不織布滅菌綿棒</td><td>LCH医療製品、パリ、フランス</td><td>SN40-0755</td><td>www.lch-medical.com</td></tr><tr><td>ガリレオ双眼ルーペ2.5倍</td><td>世界精密機器、サラソタ、米国</td><td>504056</td><td>https://www.wpi-europe.com</td></tr><tr><td>消化糸:アイソタクチックポリプロピレン、モノフィルプロレン7-0&nbsp;</td><td>エチコン、イッシーles&nbsp;Moulineaux, France</td><td></td><td>EH7813E</td></tr><tr><td>www.ethicon.com 頭頂糸 : コーティングされた編組ポリエステル Ti-Cron 2-0</td><td>Covidien, Mannsfield, MA, USA</td><td>3003-52</td><td></td></tr><tr><td>www.covidien.com 皮膚糸 : Polyglactin, VICRYL RAPIDE 4-0&nbsp;</td><td>エチコン、イッシーles&nbsp;Moulineaux、フランス</td><td>VR3100</td><td>www.ethicon.com</td></tr><tr><td>ETS-Flex 35-mmステープルガン</td><td>Ethicon、Issy les&nbsp;Moulineaux、フランス</td><td>ATS45</td><td></td></tr><tr><td>www.ethicon.com Proximate Reloadable Staplers</td><td>Ethicon、Issy les&nbsp;Moulineaux、フランス</td><td>XR30V</td><td>www.ethicon.com</td></tr><tr><td>TA-DST 30mm-3.5mm</td><td>Ethicon、Issy les&nbsp;Moulineaux, France</td><td>TX30B</td><td>www.ethicon.com</td></tr><tr><td>Alcohol 5% Betadine</td><td>MEDA Pharma, Merignac, France</td><td>41085</td><td>www.medapharma.fr</td></tr><tr><td>LIDOCAINE AGUETTANT 20 mg/ml</td><td>LABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, France</td><td>3400940000000.0</td><td>https://www.aguettant.fr</td></tr><tr><td>Penicillin G 5MUI</td><td>Panpharma, Luitre, France</td><td>3.40E+12</td><td>https://www.panpharma.eu/fr</td></tr><tr><td>ビオノライトG5;塩化ナトリウム0.4%、グルコース5%、塩化カリウム0.2%)</td><td>Baxter、Maurepas、フランス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>液体ダイエット</td><td>Genestil、Royaucourt、フランス</td><td>C-0200T</td><td></td></tr> <tr><td>http://www.genestil.com/ イソフルラン100%</td><td>Centravet、Plancoet、フランス</td><td>ISO007</td><td>http://cooperative.centravet.net</td></tr></tbody></table>

ラットにおける 1 吻合胃バイパス (oagb)

One-anastomosis Gastric Bypass (OAGB) in Rats

このプロトコルの目標は、肥満症治療手術より具体的には、肥満ラットにおける OAGB の前臨床モデルを設定することです。この前臨床モデルに基づいて、縦断研究可能人間の肥満症治療手術後見られる成果の基になるメカニズムの理解の改善を提供します。この目的のためにラットが操作とイソフルレン麻酔下で開腹。まず、外科医は長く、管状の胃ポーチを作成します: 大きい曲線と裂孔の郭清後、nonglandular の胃はホチキス止め、削除します。その後、残りの胃は胃管を作成し、胃の幽門部を除外するためにホチキス止めも。その後、外科医は下の角度から単一の端-側吻合 35 cm を実行します。この下肢の長さは、胆道膵肢 (BPL) と人間の肥満症治療手術と同様に一般的な肢 (CL) の長さの比を再現するために選ばれています。腱膜性と皮膚閉鎖操作を終了します。初期の術後管理は皮下水分補給、筋肉内の予防的抗生物質投与、キシロカイン、鎮痛剤の投与と食事療法の進歩的な野生復帰の頭頂部の注入から成っています。

このプロトコルを再現して人間の実践として OAGB を模倣しています。このプロトコルの安全性は、パブリッシュされたデータ23,24低死亡率 12% と 25% の間でサポートされます。同様の死亡率と研究チームの別の外科医は、このプロトコルを実践しています。
それにもかかわらず、学習齧歯動物の手術は複雑であり、拡大鏡の使用は必須です。確かに、顕微鏡吻合の建設の重要なステップには、最適な器用さに到達する約 15 に 20 操作から学習期間が必要です。手術の欠陥は、我々 の経験で主な死亡原因である胃閉塞の縫合につながります。成功へもう一つの鍵は術後栄養物;確かに、早い術後固体栄養物は、危険です。このプロトコルは、安全であることが実証されている正確な術後栄養のプロトコルを提供します。この手術の人間およびラットの概念は<strong class=...

このプロトコルは、ラットに 1 吻合胃バイパス (OAGB) の性能です。オペレーターは、手縫い吻合続いて長く、管状ホチキス止め胃ポーチを実行します。このモデルのオペレーターは胆道膵と人間; 一般的な肢の同じ比率を再現します。したがって、胆道膵肢は 35 センチメートルを測定します。

ラットにおける 1 吻合胃バイパス (OAGB)

The goal of this protocol is to set up a preclinical model of bariatric surgery and, more specifically, OAGB in obese rats. Based on this preclinical ...

病的肥満は、西洋の世界で蔓延する主要な健康問題です。肥満手術は、それのための唯一の長期的な効果的な治療法であり、手術のすべての種類の中で、より最近の手順である1つの吻合胃バイパスは、効果的かつ安全であるように見えます。しかし、いくつかの質問は未解決のままです。特に、手術後の神経胃粘膜に対する代謝的および長期的な影響について。私たちの知る限りでは、1つの吻合胃バイパスの動物モデルはまだ開発されていません。そして、これは、例えば、グルコース代謝、ニューロンデクイーン修飾は、他の胃粘膜に長時間の影響を研究するのに有用であり得る。このビデオで紹介されているモデルは、人間の手順を模倣するために開発されました。まず、外科医は長くて管状の胃のアプローチを実現し、その後35cmの小腸をバイパスする。この長さは、ビリオ膵肢と共通肢との比率を再現するために決定された。それは人間の手術のために行われるように。このプロトコルでは、ウィスターラットを使用します。そして、ダイエットと高脂肪食の少なくとも12プロボディウィークでちょうど肥満を使用してください。ラットが手術時に肥満であることを確認します。600と800グラムの間の重量を持つ。ここでは、この手順に必要な手術器具を提示しています。手術前に手術器具をすべてオートクレーブ。赤い箱の中の表示のために空気中の3%イオブルランの吸入でラットを麻酔します。次いで、ラットを温め板に移し、メギオン・ラ・パレタである3%の外科アプローチの同じ流量のマスクで麻酔を維持する。腹膜は腹腔を開くために線形アルバに沿って切断される。大きな胃曲線は、腹部のファガスの左側に腺と非腺胃の間の接合部から解剖されます.胃の脾臓は、彼の角度に大きな胃曲線を解放するために徐々に凝固されています。その後、ヘアタール領域は10の靭帯のセクションによって露出される。腹部のファガスは、左の胃動脈と迷走神経を維持しながら解剖される。外科用ホチキス止めは、胃食道接合部の左側に腺と非腺胃の間の接合部で水平に適用される。非腺胃を切断した後、この1つが削除されます。次に、TA デバイスを搭載した 2 番目のステープラーが最初のステープラーに適用されます。結果は、除外されたアントラムと胃の体を持つ小さな、管状の胃のアプローチです。十二指腸間の角度は、外科医が将来のアントメラドゥに35センチメートルを測定する位置しています。アンターミアは、十二指腸の時の側で行われます。次いで、オペレータは、腸摘出胃部摘出術を行い、イソプロポレン7ゼロの2つの縫合糸を有する胃凝解吻合を続ける。成功の鍵は、虫眼鏡の下でこの吻合を実現し、1吻合の両側に約7-8の閉じた余分な縫合糸を実行することです。その結果、この1回のアストモーシスによって胃袋に接続されたビロ膵臓および一般的な四肢を有するアマガロペである。処置

one-anastomosis-gastric-bypass-oagb-in-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

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十二指腸空腸バイパス術(DJB)は、グルコース代謝を改善し、インスリン抵抗性を低下させることができます。ここでは、DJBの安定した信頼性の高いマウスモデルを確立するためのプロトコルを紹介します。...

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学ぶラットにおける1吻合胃バイパス（OAGB）の手術法。管状胃嚢作成と手縫い吻合を用い、ヒトと同じ胆膵管脚比率を再現する代謝外科の動物モデルです。術後の糖代謝と胃粘膜への長期的影響を研究できます。

ラットにおける 1 吻合胃バイパス (OAGB)

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