Name: マウスにおけるアピカル歯年理炎の誘導 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-08-06T13:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 26 s
Description: 学ぶマウスにおけるアピカル歯根膜炎誘導法。外科的処置、マイクロCT、組織学的解析を用いて骨吸収と免疫応答をin vivoで評価する再現性の高いモデルです。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

オデッド・ヘイマン博士が動物の位置決めを手伝ってくれることを認め、ラファエル・リーバーがマイクロCT解析を手伝い、そして実験の前に助言を求めるアンディアラ・デ・ロッシ・ダルデガン教授に謝りたい。また、シドニー・コーエン博士の批判的な読み取りと編集についても認め申し上げ上げ、お知り申し上げ上げください。
この研究は、イザドール・I・カバコフ研究基金からMKとIAへの助成金、イスラエル科学技術省からEGへのイツァク・ナボン・フェローシップによって支援されました。

ここに記載されているすべての方法は、ヘブライ大学の機関動物管理および使用委員会(IACUC)によって承認されています(倫理いいえ。MD-17-15093-5)。
1. 動物麻酔と位置決め
<ol><li>以下に説明するように無菌溶液を調記する。<ol>
<li>リン酸バッファー溶液(PBS)/生理食液で希釈したケタミン7mg/mLおよび0.09mg/mLメデトミジンの5mLを調出す。</li>
		<li>PBS/生理生殖水で希釈したアティパメゾール(0.4mg/mL)の滅菌液を調作する(5mLの量を調出すことを推奨)。</li>
		<li>局所麻酔のためにPBS/生理生殖不能で希釈したメピバカイン(7.5mg/mL)の滅菌液を調作する(メピバカインのバイアルを供給されたものは7.2mLのストックに対して十分である)。</li>
	</ol>
</li>
	<li>実験には6~8週齢の雌C57BL/6マウスを用いる。動物を特定の病原体フリー(SPF)動物ユニットに保管し、施設が提供する標準的な水と食物、および動物がアドリビタムを供給します。</li>
	<li>マウスの重量を量り、体重のグラムごとに10 μLの体積を経口腔内(IP)に注入する。例えば、20グラムの重さのマウスの場合、 ケタミン/メデトミジン溶液を200μL注入します。これは、(70 mg/kg)ケタミンと(0.9 mg/kg)メデトミジンの最終的な濃度を与えます 各動物のために。</li>
	<li>手術中の乾燥による眼潰瘍を防ぐために、クロラムフェニコールを含む眼のチント(5%)彼らは麻酔下にある間、動物の目に。彼らは麻酔されている間、ランプで動物を暖かく保ちます。ペダル反射(しっかりしたつま先のピンチを実行)をチェックすることにより、麻酔の深さを確認してください。</li>
	<li>マウスが麻酔された後、マウスを右側(右手の研究者用)に置き、閉じたセル押し出されたポリスチレンフォーム表面に置き、テープを使用して表面に足を取り付けます。</li>
	<li>切開部の周りに小さなゴムバンド(上部切開部1、下部切開部用1)を使用して口を開き、閉じたセル押し出されたポリスチレンフォーム表面にピン留めされた長い針で固定します。</li>
	<li>表面にテープで留めた鉗子を使用して右頬を引き込みます。定常状態で閉じている鉗子を使用します。</li>
	<li>適切な拡大(双眼鏡または臨床顕微鏡)と光を使用して、顎臼高へのアクセスを可能にする快適な作業位置にマウスで表面を置きます。</li>
	<li>鉗子または歯科へらを使用して舌を引き込み、最初の顎臼歯に隣接する粘膜の折り目に27ゲージ針で局所麻酔を注入する。25-50 μLで十分です。注射部位の周りの組織の腫脹を視覚化する必要があります。</li>
</ol>2. パルプ露光
<ol><li>1/4ラウンドの歯科用バリ、または同じサイズのダイヤモンドバリ(長いシャンクが推奨)を毎分800ラウンド(rpm)の速度で使用し、任意の適切な歯科モーター(例えば、自動トルク低減(ATR)モーター)に取り付けます。</li>
	<li>パルプ角がデンチンを通して見えるまで、最初の右顎臼歯の閉塞部分をドリルします。モータの短いバーストを使用して、過熱を防ぎます。</li>
	<li>K-ファイルまたはHファイル#8または#10を使用してパルプを貫通し、それらを覆うデンティンを壊すことによって、パルプホーン(メシアルと遠位)にファイルを挿入します。ファイルはオートクレーブによって殺菌されます。</li>
	<li>ファイルで開口部を広げながら、パルプ内のファイルを可能な限り深く操作し続けます。通常、パルプから目に見える出血があります。</li>
	<li>実験中の痛みを軽減するために、歯の鋭いエッジをバリで丸め、閉塞から歯を取り除くようにしてください。マイクロブラシで手順中に破片をきれいにします。</li>
	<li>コントロールとして反対歯(左第一顎臼歯)を残します。</li>
</ol>3. 臨床処置の終了
<ol><li>固定状態からマウスを放出し、アティパメゾールIP(体重1グラムにつき10μL)を注入する。これは(4 mg/kg)アティパメゾールの最終的な用量を与える.</li>
	<li>PBS/生理食/生理食(0.05mg/kg)IPで希釈したブプレノルフィンを注入する(手順の日に3 mLの量を調作することをお勧めします)。痛みの軽減が必要な理由については、「議論」を参照してください。</li>
	<li>動物が麻酔から回復することを確認してから、それらを残してください。歯の痛みのために硬い食べ物を食べることができず、柔らかい食べ物を与えます。</li>
</ol>4. 後続手続き(42日)
<ol><li>処置後の最初の3日間は、動物を計量し、1日1回ブプレノルフィン(0.1mg/kg)IPを注入する(6mLの量を調少することをお勧めします)。</li>
	<li>実験の間(炎症が蓄積する42日)は、体重と一般的な行動評価によって動物を週に2〜3回監視します。</li>
	<li>フォローアップ期間中に動物に柔らかい食べ物を届けます。水で食べ物を濡らし、ケージの床にペトリ皿に入れます。</li>
</ol>5. 実験終了と分析
<ol><li>フォローアップの42日11日が完了すると、106.25mg/kgケタミン、および75mg/kgキシラジン(42.5mg/mLケタミンのストック溶液、および1.5mg/mLキシラジンの総容積で1.5mg/mLキシラジンの濃度でケタミン/キシラジンで動物IPを麻酔する推奨)およびプリフォーム子宮頸部脱臼。 注:炎症20、21を評価するために可能な分析のための異なるオプションがあります。ここでは、マイクロCTと組織染色による組織の分析について説明する。</li>
	<li>安楽死後、外科的はさみと鉗子を使用して、3つのモルを含む顎の一部を切り取ります(各側治療および非治療コントロールに対して別々に)。鉗子を使用することにより、可能な限り柔らかい組織を剥がし、主に骨と歯をサンプルに残します。</li>
	<li>組織をPBSで短時間すすいでから、パラホルムアルデヒド(PFA)4%(PBSで希釈)して24~48時間固定します。 注意:化学フードにPFAを使用し、その材料安全データシート(MSDS)ガイドラインに従って使用してください。</li>
	<li>24~48時間後、PBS 3xで洗い流してPFAを洗い流します。</li>
	<li>マイクロCT<ol>
<li>マイクロCT解析の場合、収穫した組織(3モルを含む一部、約4mm x 5 mmx 1 mm)をマイクロCTスキャナに取り込み、1.5mLのPBS指向の1.5mmLのチューブに入れ、ブッカルまたは言語表面を作ります。 歯と根のチューブの底部に平行に敷設されています。スポンジでサンプル間を分離し、柔軟なフィルムでチューブの上部をカバーします。</li>
		<li>スキャンパネルを開き、測定番号を選択します。70 kV のエネルギー、114 μA の強度、および 6 μm3ボクセル サイズの解像度のコントロール ファイルを選択します。</li>
		<li>スカウトビューをクリックし、画像が表示されたら、参照線をクリックし、スキャンのためにサンプルの領域をマークします。各サンプルの後にスキャンを追加します。サンプルのマーキングが完了したら、タスクリストに移動し、[対話タスクの開始] を選択します。 注:同じサンプルは、その後、組織学に使用することができます。CTスキャン中に乾燥しないことが重要です。</li>
	</ol></li>
	<li>マイクロCTの位置合わせと解析に適切なコンピュータプログラムを使用します。<ol><li>マイクロCT評価でXY平面上のサンプルを開きます。各サンプルの 3 つの点を選択して位置合わせを行います。 メシアル頂点収縮 - 座標系の原点を定義します。 メサル運河の冠状部分 - Z軸上の点を定義します。 遠位頂点収縮 - XZ平面上の点を定義します。</li>
		<li>左側のパネルの測定ツールを使用し、各点に達する線を描画します。3 つのポイントをそれぞれ X、Y、Z の値で定義します。</li>
		<li>μCT 評価でタスクを選択してサンプルの対象領域を定義し、3D評価をクリックします。四角形と軸ごとの寸法を持つウィンドウが画面に表示されます。マウスの中央ボタンでコーナーをクリックして、XY 軸の対象領域に合わせて四角形の寸法を一致させます。VOI スタートの下の Z 正方形に関心のある最初のスライス番号を挿入し、Dim の下の Z 正方形の最後のスライス数までのスライス数を挿入して、Z 軸の寸法を選択します。</li>
		<li>セッションマネージャの下にあるアプリケーションをクリックし、DECterm を選択します。 ウィンドウが開くのを数秒待ってから、次の手順に従って次に説明する傾斜スクリプトの 5 つの手順を入力します (行間でenter キーをクリックします)。 Ipl isq_to_aim 目指す1</li>
		<li>isq (関心のあるファイル) 名をコピーする:セッション マネージャの下でビューを選択し、microCTdata をクリックします。 作業中のファイルを見つけて、ファイルを中央でクリックします。次に、DECterm のウィンドウを中央クリックします。</li>
		<li>対象地域を選択する際にVOIで決定された X、Y、Z の値 (それらの間にスペースがある) を入力します。</li>
		<li>対象領域を選択する際に薄暗い下で決定された X、Y、Z の値 (それらの間にスペースがある) を入力します。</li>
		<li>メッセージを受信するまで待ちます: isq は完了を目指します。 (ステップII-アライメント): z の位置合わせ 目指す1 目的2</li>
		<li>座標系の原点に対して決定された X、Y、Z の値 (それらの間にスペースを含む) を入力します。</li>
		<li>Z 軸上の点に対して決定された X、Y、Z の値 (それらの間にスペースがある) を入力します。</li>
		<li>XZ 平面上のポイントに対して決定された X、Y、Z の値(それらの間にスペースがある)を入力します。</li>
		<li>メッセージを受信するまで待ちます: "align_Z 完了" (ステップ III- ヘッダー): ヘッダー 目的2 0 0 0 0 0 0</li>
		<li>をクリックします。 (ステップIV- 目的からisqにファイルを戻す): トイスク 目的2</li>
		<li>isq (関心のあるファイル) 名をコピーする:セッション マネージャの下でビューを選択し、microCTデータをクリックします。作業中のファイルを見つけて、ファイルを中央でクリックします。次に、DECterm のウィンドウを中央クリックします。消去(「バックスペース」を使用)を「。ISQ" をファイルの末端に表示し、次のように書きます。ISQ"は、整列されたファイルを認識します。</li>
		<li>[入力]をクリックします |を入力します。</li>
		<li>メッセージを受信するまで待ちます: "toisq_from_aim 完了" (ステップV-フリップ): isq A</li>
		<li>新しい isq (関心のあるファイル) 名をコピーする:セッションマネージャの下でビューを選択し、microCTデータをクリックします。作業中のファイルを見つけて、ファイルを中央でクリックします。次に、DECterm のウィンドウを中央クリックします。</li>
		<li>[入力]をクリックします |を入力します。メッセージが表示されるのを待ちます: "isq_to_aim 完了" フリップ A Aa Zx メッセージを受信するのを待つ: "flip_aim 完了" 差出人 Aa</li>
		<li>新しい isq 名をコピーする:セッション マネージャの下でビューを選択し、microCTデータをクリックします。作業中のファイルを見つけて、ファイルを中央でクリックします。次に、DECterm のウィンドウを中央クリックします。消去(「バックスペース」を使用)を「。ファイルの末端に ISQ" と書き込みます。ISQ"は、整列されたファイルを認識します。</li>
		<li>メッセージを受信するまで待ちます: "from_aim_to_isq 完了"</li>
	</ol></li>
	<li>輪郭<ol>
<li>コロナパルプ、両運河の放射状パルプ、および両方の頂点のフォアメンが提示されている歯のほぼ中央を表すスライスを選択します。</li>
		<li>左上の輪郭パネルをクリックして、左上の輪郭パネルをクリックして、中間のルート頂点の頂点を冠状に線形境界を結び、膜根頂点のメシアル境界線を通して、アピカル境界を冠状に手動でマークします。線源の遠位境界と、ファーション領域を通る遠位根の膜境界に従ってください(図 3 II,IV を参照)。</li>
		<li>この輪郭(Ctrl +C、Ctrl+V)をコピーし、中央のスライスの両側に配置された5つのスライスに応じて調整します。</li>
		<li>各サンプルにマークされた輪郭の組織体積を計算するには、μCT評価の下でタスクを選択し、3D評価をクリックします。3D評価のウィンドウでタスクの近くを選択し、組織の体積(テレビ)を計算するフィルタを選択します。</li>
	</ol></li>
	<li>組織<ol>
<li>マイクロCTスキャナから組織を除去した後、各サンプルを1mLのエチレンディアミンテトラセチン酸(EDTA)0.5M pH 8.0でマイクロ遠心チューブに入れて10日間組織をデカール化します。EDTA ソリューションを 3 日ごとに変更します。</li>
		<li>脱水:組織学的カセットにサンプルを入れ、エタノール濃度を1時間ずつ増やす:70%エタノール(この時点で、試料がエタノールに保持されている限り、プロセスを数週間停止することができます)、90%エタノール2x、100%エタノール2x、キシレン2x(注意:化学フードにキシレンを使用し、そのMSDSガイドラインに従って)。<ol>
<li>液体パラフィン(60°C)にカセットを移し、キシレンが蒸発するために一晩化学フードに残します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>ブロッキング: 組織学的ブロッキングマシンを使用して、サンプルをパラフィンに埋め込みます。矢状の切片を得るために、正しい位置に埋め込むように注意してください(すなわち、王冠と根は、歯が「横たわっている」方法で、金型の底部に平行に向いている必要があります)。サンプルはマイクロトームで切断する準備ができました。</li>
		<li>セクションを切断する:組織の関連部分に到達するまで〜20 μmの厚いスライスを切断することによって開始します。歯の任意の部分(王冠または根)を認識したら、6 μmのセクションに変更し、前のセクションに従って切断の角度を変更します。<ol>
<li>たとえば、前のセクションにリューズが含まれていて根が含まれていない場合は、マイクロトーム内のブロックの角度を変更して、根がナイフに近づき、クラウンが戻ります(歯の部分はブロック自体に肉眼で認識できます)。</li>
			<li>冠状動脈および放射状パルプ、および頂点のフォルメンを含む矢状のセクションを得るまで角度を調整し続けます。関連する組織がすべてカットされるまで、できるだけ多くのスライスをこの向きでカットします。</li>
		</ol>
</li>
		<li>染色プロトコル(例えば、ヘモトキシリンおよびエオシン染色(H&E)、ブラウン&ブレン染色、タルトレート耐性酸ホスファターゼ(TRAP)染色、免疫組織化学)については、20、21を参照してください。</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Azuma, M. M., Samuel, R. O., Gomes-Filho, J. E., Dezan-Junior, E., Cintra, L. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+IL-6+on+apical+periodontitis%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22International+Endodontics+Journal%22%5BJournal%5D)">The role of IL-6 on apical periodontitis: a systematic review.</a> International Endodontics Journal. 47 (7), 615-621 (2014).</li>
<li>Marton, I. J., Kiss, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlapping+protective+and+destructive+regulatory+pathways+in+apical+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Overlapping protective and destructive regulatory pathways in apical periodontitis.</a> Journal of Endodontics. 40 (2), 155-163 (2014).</li>
<li>Graunaite, I., Lodiene, G., Maciulskiene, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+apical+periodontitis%3A+a+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+and+Maxillofacial+Research%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of apical periodontitis: a literature review.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Research. 2 (4), e1(2012).</li>
<li>Hussein, F. E., Liew, A. K., Ramlee, R. A., Abdullah, D., Chong, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+Associated+with+Apical+Periodontitis%3A+A+Multilevel+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Factors Associated with Apical Periodontitis: A Multilevel Analysis.</a> Journal of Endodontics. 42 (10), 1441-1445 (2016).</li>
<li>Takahashi, K., MacDonald, D. G., Kinane, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+immunoglobulin-synthesizing+cells+in+human+dental+periapical+lesions+by+in+situ+hybridization+and+immunohistochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+Pathology+Medicine%22%5BJournal%5D)">Analysis of immunoglobulin-synthesizing cells in human dental periapical lesions by in situ hybridization and immunohistochemistry.</a> Journal of Oral Pathology Medicine. 25 (6), 331-335 (1996).</li>
<li>Lin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enterococcus+faecalis+lipoteichoic+acid+regulates+macrophages+autophagy+via+PI3K%2FAkt%2FmTOR+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+Biophysical+Research+Community%22%5BJournal%5D)">Enterococcus faecalis lipoteichoic acid regulates macrophages autophagy via PI3K/Akt/mTOR pathway.</a> Biochemical and Biophysical Research Community. 498 (4), 1028-1036 (2018).</li>
<li>Wu, Y., Sun, H., Yang, B., Liu, X., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-Lipoxygenase+Knockout+Aggravated+Apical+Periodontitis+in+a+Murine+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">5-Lipoxygenase Knockout Aggravated Apical Periodontitis in a Murine Model.</a> Journal of Dental Research. 97 (4), 442-450 (2018).</li>
<li>Barreiros, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+and+mRNA+expression+of+RANK%2C+RANKL%2C+OPG%2C+TLR2+and+MyD88+during+apical+periodontitis+progression+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Oral+Science%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical and mRNA expression of RANK, RANKL, OPG, TLR2 and MyD88 during apical periodontitis progression in mice.</a> Journal of Applied Oral Science. 26, e20170512(2018).</li>
<li>Barreiros, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MMP2+and+MMP9+are+Associated+with+Apical+Periodontitis+Progression+and+Might+be+Modulated+by+TLR2+and+MyD88%5BTitle%5D)+AND+%22Brazillian+Dentistry+Journal%22%5BJournal%5D)">MMP2 and MMP9 are Associated with Apical Periodontitis Progression and Might be Modulated by TLR2 and MyD88.</a> Brazillian Dentistry Journal. 29 (1), 43-47 (2018).</li>
<li>Virtej, A., Papadakou, P., Sasaki, H., Bletsa, A., Berggreen, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGFR-2+reduces+while+combined+VEGFR-2+and+-3+signaling+increases+inflammation+in+apical+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+Microbiology%22%5BJournal%5D)">VEGFR-2 reduces while combined VEGFR-2 and -3 signaling increases inflammation in apical periodontitis.</a> Journal of Oral Microbiology. 8, 32433(2016).</li>
<li>De Rossi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cementocytes+Express+Receptor+Activator+of+the+Nuclear+Factor+Kappa-B+Ligand+in+Response+to+Endodontic+Infection+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Cementocytes Express Receptor Activator of the Nuclear Factor Kappa-B Ligand in Response to Endodontic Infection in Mice.</a> Journal of Endodontics. 42 (8), 1251-1257 (2016).</li>
<li>Rider, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+CD14+%28Cluster+of+Differentiation+14%29+and+Toll-Like+Receptor+%28TLR%29+4+Signaling+Deteriorate+Periapical+Inflammation+in+TLR2+Deficient+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomy+Records+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">Elevated CD14 (Cluster of Differentiation 14) and Toll-Like Receptor (TLR) 4 Signaling Deteriorate Periapical Inflammation in TLR2 Deficient Mice.</a> Anatomy Records (Hoboken). 299 (9), 1281-1292 (2016).</li>
<li>Martins, C. M., Sasaki, H., Hirai, K., Andrada, A. C., Gomes-Filho, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+hypertension+and+periapical+lesion%3A+an+in+vitro+and+in+vivo+study%5BTitle%5D)+AND+%22Brazillian+Oral+Research%22%5BJournal%5D)">Relationship between hypertension and periapical lesion: an in vitro and in vivo study.</a> Brazillian Oral Research. 30 (1), e78(2016).</li>
<li>Rao, N. J., Wang, J. Y., Yu, R. Q., Leung, Y. Y., Zheng, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Periapical+Diseases+in+Medication-Related+Osteonecrosis+of+the+Jaws%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Research+International%22%5BJournal%5D)">Role of Periapical Diseases in Medication-Related Osteonecrosis of the Jaws.</a> Biomedical Research International. 2017, 1560175(2017).</li>
<li>Song, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preexisting+Periapical+Inflammatory+Condition+Exacerbates+Tooth+Extraction-induced+Bisphosphonate-related+Osteonecrosis+of+the+Jaw+Lesions+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Preexisting Periapical Inflammatory Condition Exacerbates Tooth Extraction-induced Bisphosphonate-related Osteonecrosis of the Jaw Lesions in Mice.</a> Journal of Endodontics. 42 (11), 1641-1646 (2016).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxic+Preconditioning+Enhances+Dental+Pulp+Stem+Cell+Therapy+for+Infection-Caused+Bone+Destruction%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxic Preconditioning Enhances Dental Pulp Stem Cell Therapy for Infection-Caused Bone Destruction.</a> Tissue Engineering Part A. 22 (19-20), 1191-1203 (2016).</li>
<li>Eichele, D. D., Kharbanda, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dextran+sodium+sulfate+colitis+murine+model%3A+An+indispensable+tool+for+advancing+our+understanding+of+inflammatory+bowel+diseases+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Dextran sodium sulfate colitis murine model: An indispensable tool for advancing our understanding of inflammatory bowel diseases pathogenesis.</a> World Journal of Gastroenterology. 23 (33), 6016-6029 (2017).</li>
<li>Choudhary, N., Bhatt, L. K., Prabhavalkar, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+animal+models+for+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Immunopharmacology+and+Immunotoxicology%22%5BJournal%5D)">Experimental animal models for rheumatoid arthritis.</a> Immunopharmacology and Immunotoxicology. 40 (3), 193-200 (2018).</li>
<li>Shah, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clastic+cells+are+absent+around+the+root+surface+in+pulp-exposed+periapical+periodontitis+lesions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Disease%22%5BJournal%5D)">Clastic cells are absent around the root surface in pulp-exposed periapical periodontitis lesions in mice.</a> Oral Disease. 24 (1-2), 57-62 (2018).</li>
<li>Wan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MMP9+deficiency+increased+the+size+of+experimentally+induced+apical+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">MMP9 deficiency increased the size of experimentally induced apical periodontitis.</a> Journal of Endodontics. 40 (5), 658-664 (2014).</li>
<li>Bezerra da Silva, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MyD88+knockout+mice+develop+initial+enlarged+periapical+lesions+with+increased+numbers+of+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22International+Endod+Journal%22%5BJournal%5D)">MyD88 knockout mice develop initial enlarged periapical lesions with increased numbers of neutrophils.</a> International Endod Journal. 47 (7), 675-686 (2014).</li>
<li>Mehrazarin, S., Alshaikh, A., Kang, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanisms+of+Apical+Periodontitis%3A+Emerging+Role+of+Epigenetic+Regulators%5BTitle%5D)+AND+%22Dental+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanisms of Apical Periodontitis: Emerging Role of Epigenetic Regulators.</a> Dental Clinics of North America. 61 (1), 17-35 (2017).</li>
<li>Metzger, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophages+in+periapical+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Endodontics+Dentisrty+and+Traumatology%22%5BJournal%5D)">Macrophages in periapical lesions.</a> Endodontics Dentisrty and Traumatology. 16 (1), 1-8 (2000).</li>
<li>Lungova, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tooth-bone+morphogenesis+during+postnatal+stages+of+mouse+first+molar+development%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Tooth-bone morphogenesis during postnatal stages of mouse first molar development.</a> Journal of Anatomy. 218 (6), 699-716 (2011).</li>
<li>Zilberstein, L. F., Moens, Y. P., Leterrier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+local+anaesthesia+on+anaesthetic+requirements+for+feline+ovariectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Journal%22%5BJournal%5D)">The effect of local anaesthesia on anaesthetic requirements for feline ovariectomy.</a> Veterinary Journal. 178 (2), 214-218 (2008).</li>
<li>Kaufman, E., Epstein, J. B., Gorsky, M., Jackson, D. L., Kadari, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preemptive+analgesia+and+local+anesthesia+as+a+supplement+to+general+anesthesia%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+Progress%22%5BJournal%5D)">Preemptive analgesia and local anesthesia as a supplement to general anesthesia: a review.</a> Anesthesia Progress. 52 (1), 29-38 (2005).</li>
<li>Song, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+Direct+Pulp-capping+Model+for+the+Evaluation+of+Pulpal+Wound+Healing+and+Reparative+Dentin+Formation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visual+Experimentalization%22%5BJournal%5D)">Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice.</a> Journal of Visual Experimentalization. (119), (2017).</li>
<li>Yoneda, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+root+canal+treatment+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Development of a root canal treatment model in the rat.</a> Scientific Reports. 7 (1), 3315(2017).</li>
<li>AlShwaimi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+T+cells+in+mouse+periapical+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Regulatory T cells in mouse periapical lesions.</a> Journal of Endodontics. 35 (9), 1229-1233 (2009).</li>
</ol>

著者は開示するものが何もない

マウスにおける頂点歯状炎の誘導に関する方法をここで紹介する。この方法の目的は、この炎症過程のメカニズムおよび結果を研究するための頂点歯状炎の状態を利用することです。アピカル歯全歯炎は、6〜8週齢のマウスで誘発され、根が完全に発達した年齢24である。このモデルで頂点歯膜炎を引き起こすために、マウスの顎臼歯の歯パルプは、歯のバリを使用して露出する。マウスの口腔叢からの細菌(SPF条件下)は、歯のパルプおよび根管に侵入し、パルプ壊死を引き起こし、頂点炎症を引き起こす頂点組織にLPSを分泌する。
この手順を実行する場合は、次の重要な手順に注意してください。パルプ暴露中の動物の正しい位置決めは、手順の成功のために重要です。重要なステップは、パルプの適切な露出です。運河の露出が不十分な場合、デンティン橋の形成が発生し、手順の失敗やAPの作成が不可能になる可能性があります。パルプ暴露の間、副作用を引き起こす可能性のある他の領域の望ましくない痛みや炎症を避けるために、パルプ暴露中の軟部組織損傷を最小限に抑えるために注意が必要...

この方法の目的は、天然微生物叢で頂点を汚染することにより、マウスの頂点歯状炎を誘導し、その後、この病理学的プロセスの様々な特性を研究することである。
頂点歯周炎(AP)は、歯根を取り囲む歯周組織における炎症性の一般的な病理である。この歯科疾患は重度の痛みを引き起こす可能性があり、歯科医によって治療されなければなりません。治療オプションには、根管治療(一次または二次)、内因性手術、歯の抽出、または臨床および放射線学的所見に応じてフォローアップ、および臨床医の意見が含まれます。この炎症過程のメカニズムは、数十年にわたって研究されたが、1、2、3は、まだ包括的に理解されていない。この病理の重症度を考慮すると、その根本的な性質に取り組む研究の必要性は明らかである。したがって、APの研究が可能なシステムは、大きな科学的関心を持っている。
APは局所組織と免疫系を含む複雑な病理学的プロセスであるため、インビトロ研究はプロセスを完全に理解するには不十分です。この疾患の臨床サンプルの研究はまた、異なる人々と異なる臨床段階4、5との間の倫理的な制限と有意な変動性のために問題であり、したがって、生体内モデルの必要性。これらのモデルは、歯髄を汚染にさらし、体の炎症反応を周期組織6,7のこの刺激に観察するという概念に基づいている。生体内モデルで一般的には、げっ歯類または犬などの大型動物が含まれる。ミニチュア歯を持つ非常に小さな動物であるマウスの治療における臨床的課題にもかかわらず、マウスモデルの利点は重要です:実際には、マウスを使用することは、施設の面で技術的に簡単であり、最も費用対効果が高く、科学的に、マウスは容易に入手可能な遺伝的および分子ツールとよく研究されたゲノムを持つよく研究された動物モデルです。実際、以前の研究では、炎症性および骨吸収シグナルおよび頂点歯状炎に関与する細胞を研究するためのマウスモデルを使用し、8、9、10、11。したがって、AP の研究にマウス モデルを使用する方法に関する明確なプロトコルが必要です。ここでは、このようなプロトコルについて説明します。
ここで説明するプロトコルは、ノックアウト(KO)マウスを研究し、特定の遺伝子の欠如が歯の炎症7、12にどのように影響するかを学ぶのに適しているという大きな利点を有する。このプロトコルの他の有用な応用は、薬物および全身性状態の研究が頂点歯止炎13の発症に及ぶ、顎の骨壊死の発症に対する頂点歯状炎の影響14を含む。,骨再生のための15および幹細胞療法16.
このプロトコルはまた、局所炎症を研究するためのモデルとして一般化することができる。炎症過程を研究するために、いくつかのマウスモデルが開発されており、例えば誘発大腸炎または関節炎17、18を含む。これらのモデルは全身効果があり、同じ動物に組み込みの制御を持っていない。炎症のない逆対性コントロールを含む誘発性頂点歯膜炎のモデルは、これらの制限14、19を克服する利点を有する。
したがって、以下に説明するプロトコルは、局所的な炎症過程に興味を持っている研究者のために有用である。この炎症の制御された性質、特定の場所へのその閉じ込め、および反対の制御歯はすべて、このプロセスに関与するメカニズムを研究するためにこのプロトコルを貴重なものにする。さらに、このプロトコルは、周期的な炎症の臨床的側面に興味を持つ研究者にとって有用である。マウスモデルは、疾患の異なる変数を研究するのに理想的であり、マウスモデルにおいて容易に遺伝子操作を行うことができるという利点に加えて、周期的な炎症における特定の遺伝子の活性を調べることができる。
技術的には、臨床手順は、マウスの歯の小さな寸法のために行うことが困難です。位置、必要な機器、およびパフォーマンスについて学ぶために、この手順を視覚化することが有益です。

<table><tbody><tr><td>アチパメゾール塩酸塩</td><td>Eurovet動物用健康</td><td>CAS 104075-48-1</td><td></td></tr><tr><td>ATR</td><td>デンツプライ</td><td>tecnika</td><td></td></tr><tr><td>ブロッキングマシン</td><td>ライカ</td><td>EG1150H</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td>vetmarket</td><td>163451</td><td></td></tr><tr><td>臨床顕微鏡/双眼</td><td>オリンパス</td><td>Sz61</td><td></td></tr><tr><td>歯科バー</td><td>コメット歯科</td><td>ZR8801L 315 008</td><td></td></tr>歯科<tr><td>用スパチュラ</td><td>プレミア</td><td>1003737</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>J.T Baker</td><td>8993</td><td></td></tr><tr><td>entelan</td><td>mercury</td><td>1.07961</td><td></td></tr><tr><td>Eosin Y 溶液、アルコール</td><td>SIGMA</td><td>HT110116</td><td></td></tr><tr><td>ヘマトキシリン溶液、Mayer's</td><td>SIGMA</td><td>MHS 16</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン塩酸塩</td><td>ベトキノール</td><td>CAS 1867-669</td><td></td></tr><tr><td>メデトミジン塩酸塩 (セペター)</td><td>CP-pharma GmbH</td><td>CAS 86347-15-1</td><td></td></tr><tr><td>メピバカイン HCl 3%</td><td>Teva</td><td>CAS 96-88-8</td><td></td></tr><tr><td>マイクロブラシ - 調整可能な精密アプリケーター</td><td>PARKELL</td><td>S379</td><td></td></tr><tr><td>マイクロ CT スキャナー</td><td>scanco</td><td>uCT 40</td><td></td></tr><tr><td>パラフィン</td><td>ライカ</td><td>39602004</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>SIGMA</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>PFA</td><td>EMS</td><td>15710</td><td></td></tr>クロ<tr><td>ラムフェニコール眼軟膏(5%)</td><td>Rekahの薬剤</td><td>CAS 56-75-7</td><td></td></tr>ピン<tr><td>セット</td><td>WAM</td><td>Ref-CT</td><td></td></tr><tr><td>キシラジン</td><td>Eurovetの動物の健康</td><td>CAS 7361-61-7</td><td></td></tr><tr><td>キシレン</td><td>Gadot</td><td>CAS 1330-20-7</td><td></td></tr></tbody></table>

マウスにおけるアピカル歯年理炎の誘導

Inducing Apical Periodontitis in Mice

局所誘発性炎症に関与するメカニズムは、いくつかの利用可能な動物モデルを使用して研究することができる。これらの1つは、頂点歯状炎(AP)の誘導である。頂点歯周炎は、歯根を取り囲む歯周組織における炎症性の一般的な病理である。この病理の性質およびメカニズムをよりよく理解するためには、マウスで手順を実行することが有利である。この歯髄の炎症の誘導は、歯髄が露出するまでマウス歯に穴を開けることによって達成される。次に、歯パルプは、時間の経過とともに自然な口腔細菌叢によって汚染され続け、頂点歯状炎を引き起こす。この期間の後、動物を犠牲にし、歯と顎の骨を様々な方法で分析することができます。典型的な分析には、マイクロCTイメージング(骨吸収を評価する)、組織染色、免疫組織化学、RNA発現が含まれます。このプロトコルは、均一な条件を有するインインインインインインバイオ実験環境におけるこの炎症過程をよりよく理解するために、口腔生物学の分野における研究に有用である。この手順は、マウスと単離された顎の慎重な処理を必要とし、技術の視覚的なデモンストレーションが有用である。誘導されたアピカル歯全歯炎およびマウスモデルにおけるその特徴を引き起こした手順のすべての技術的側面が実証される。

実験ステップのフローチャートを図1に示します。プロトコルで述べたように、マウスは麻酔され、片側の最初の顎臼歯はパルプ暴露まで掘削され、反対側の歯はコントロールとして残される。次に、歯は口腔内細菌叢によって42日間汚染されたままになり、その間にモニタリングされ、鎮痛薬を受け取る。42日後、マウスを安楽死させ、歯と隣接する顎を分析用に採取する。
図2は、最初の右臼肉パルプ暴露後のマウスの臨床画像を示す。図2Aでは、マンダブル全体が示され、図2Bのインセットは、処理された最初の右臼の拡大を示す。左の最初のモルは、コントロールとして使用されます。メシアルと遠位の両方のパルプ角と運河への入り口の露出は図2B</...

ここで、マウスにおいて局所的に頂点歯状炎を誘導するプロトコルを提示する。マウスの歯に穴を開け、パルプを露出させ、局所的な炎症を引き起こす方法を示します。また、マイクロCTや組織学など、この炎症の性質を調べるための分析方法も実証されている。

The mechanisms involved in local induced inflammation can be studied using several available animal models. One of these is the induction of apical ...

我々のプロトコルは、アクセス可能で制御されたマウスモデルにおける近腹歯間炎の研究を可能にする。したがって、このプロトコルは、患者のサンプルまたはインビトロモデルよりも利点があります。この技術の主な利点は、マウスが十分に研究されており、方法は施設要件の面で技術的に簡単であり、費用対効果が高いということです。この手順は、歯の小さな寸法のために困難であるため、技術の位置と性能について学ぶために手順を視覚化することが有益です。つま先ピンチへの応答の欠如を確認した後、閉じたセル押出ポリスチレンフォーム表面上の支配的な手側にマウスを置き、テープで足を固定します。切歯1対1の単一のゴムバンドを使用し、長い針を閉細胞押出ポリスチレンフォーム表面にピン留めし、口を開く。右頬を引っ込めるために泡にテープで閉じた鉗子を使用してください。そして、フォームとマウスを顕微鏡と光源の下に置きます。次に、歯科ヘラを使用して舌を引き込み、27ゲージ針を使用して、第1の下顎臼歯に隣接する粘膜下垂体折り畳に25〜50マイクロリットルの局所麻酔薬を注入する。注射部位の周りの組織の腫脹は観察されるべきである。パルプを露出するには、丸い高速ダイヤモンド0.8ミリメートルの歯科用バーを1分間に800発の速度で装備した適切な歯科用モーターを使用して、パルプホーンが象牙質を通して見えるまで、最初の右下顎臼歯の咬合部を掘削します。KまたはHファイル、番号8または番号10を使用してパルプを突き刺し、角にファイルを挿入できるように、メスと遠位のパルプホーンを覆う象牙質を破ります。パルプ内のファイルを可能な限り深く使用しながら、ファイルで開口部を広げながら、パルプからの出血は、通常、歯の鋭い縁をバーで観察し、実験中の痛みを軽減するためにaclusionから歯を取り除きます。マイクロブラシを使用して、残骸を清掃してください。そして、対照的に最初の下顎臼歯を残します。処置後の最初の3日間は、動物に体重を量り、1日1回、1キログラム当たり0.1ミリグラムの腹腔内に注入する。週に2〜3回の計量と一般的な行動評価によって、今後42日間にわたって動物を監視し続けます。そして、フォローアップ期間を通してケージの床にペトリ皿に水で柔らかくした食品ペレットを提供します。実験の最後に、外科用ハサミと鉗子を使用して、治療された側と治療されていない側面の両方に3つの大臼歯を含む顎の部分を集める。そして、サンプルに主に骨と歯を残して、可能な限り柔らかい組織の多くを剥がすために鉗子を使用してください。PBSでティッシュを簡単にすすい。24〜48時間の4%パラホルムアルデヒドに固定する前に。次に、新鮮なPBSでサンプルを3回すすいだ。マイクロコンピュータ断層撮影またはマイクロCT解析では、収穫した組織を12ミリ径のチューブに入れ、1.5ミリリットルのPBSをスキャナーステージに配置します。サンプルは、歯と根の頬または言語の表面がチューブの底に平行に横たわるように向けられた。スポンジを使用してサンプルを分離します。そして、柔軟なフィルムでチューブの上部をカバーします。制御ファイルを選択し、エネルギーを70キロボルト、強度を114マイクロアンプに、解像度を6マイクロメートル立方体ボクセルサイズに設定します。[スカウトビュー]をクリックします。イメージが表示されたら、[リファレンス ライン] をクリックし、スキャンするサンプルの領域にマークを付け、各サンプルの後に [スキャンの追加] をクリックします。すべてのサンプルがマークされたら、タスク リストに移動し、[対話タスクの開始] を選択します。マイクロCTスライスの輪郭の場合、歯の近似中央を表すスライスを選択し、コロナパルプ、両管のラキュラーパルプ、および両尖語の経理面の面前部が存在する。輪郭パネルをクリックし、遠位根の頂点の遠位点から始まり、毛先根の遠位の境界に続く中間根の頂点、および遠位根の中間境界に続いて、放射状のパケの頂点領域に対して円形の境界線を点印します。作成した輪郭をコピーして貼り付け、中央のスライスの両側に配置された 5 つのスライスに合わせてコンターを調整します。各サンプルにマークされたコンターの組織容積を計算するには、マイクロCT評価で[タスク]を選択し、[3D評価]をクリックします。次に、3D評価のウィンドウで[選択]をクリックし、組織の体積を計算するフィルタを選択します。マイクロCT分析の最後に、1ミリリットルのEDTAを含むマイクロ遠心管にスキャナーから組織を10日間移します。脱灰の終わりに、エタノール濃度を増加させた組織学的カセットにサンプルを入れ、1濃度あたり1時間置きます。2番目のエタノール浸漬後、サンプルをキシレンに移して2回の1時間浸漬し、カセットを化学フード内の60°Cの液体パラフィンに移す前に、キシレンが蒸発するようにします。翌朝、フィドリュードサンプルと根を金型の底面に平行に配置し、組織学的ブロッキングマシンに入れてパラフィンにサンプルを埋め込みます。切片を得るために、パラフィンブロックサンプルをマイクロトーン切断ブロックに固定し、目的の組織に到達するまでサンプルをトリミングします。歯の任意の部分が見える場合は、6マイクロメートルの厚いセクションを取得し始め、冠動脈およびラジカルパルプおよび頭蓋の前部を含む矢状切片が得られるまで切断角度を調整する。ここでは、処理された下顎全体が示されている。処理された第1右臼歯の倍率は、軸及び遠位パルプ角および運河への入り口の両方の露出の観察を可能にする。マイクロCTイメージングは、髄質曝露、および骨再生の髄質および遠位周発光領域の可視化を可能にする。実際、組織体積の有意な骨の再投与は、コントロールと比較して、処理された歯で測定される。組織学的分析は、治療された歯において、歯髄自体が壊死を呈することを示し、これは対照組織のパルプ組織と比較してHおよびE染色後に明確に観察することができる。さらに、重要なことに、処置された歯の心房領域において、免疫細胞からなる心房が観察され、対照歯には存在しない。正しい位置決めが動物の口への良好なアクセスと最適な結果を可能にするように、パルプ露光中に正しくマウスを配置することが重要です。免疫組織組織組織染色やファクスなどの心房炎解析の追加方法や、細胞の詳細な分子解析は、このプロトコルに従って行うことができる。このプロトコルは、歯科研究だけでなく、免疫学的研究にとっても重要であり、内部統制を内蔵した局所誘発炎症のモデルを提供する。

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

動物モデルは、慢性炎症の発展に貢献宿主および病原体特異的なメカニズムを定義する上で非常に貴重なツールであることが分かっている。ここでは、ローカルおよび全身の部位での炎症の進行を評価するために、ヒト病原体ポルフィロモナス·ジンジバリスとディテールの方法論で経口感染のマウスモデルを記述する。...

局所および全身所における病原体により誘導される慢性炎症のためのマウスモデル

この記事では、複数の上顎大臼歯を含む糸字誘発モデルを確立するためのプロトコルを提示し、その後の分析と動物の使用量の減少のために関与する歯肉組織および骨のより大きな領域をもたらす。ヒト被験者に類似した方法で経口好中球を評価する技術も記載されている。...

口腔好中球評価のためのマウス歯肉炎の堅牢な合字誘発モデル

この研究では、歯周炎の誘発のラットモデルが、保持性結紮糸とポルフィロモナスジンジバリス由来のリポ多糖の反復注射の組み合わせを介して提示されます、...

ラットモデルにおける結紮糸とリポ多糖の注射 の組み合わせによる 歯周炎の誘発

この記事では、革新的なマウスギャグを使用してマウスの歯髄炎モデルを確立するための合理化されたプロトコルと、その後の組織学的分析について説明します。...

歯髄炎研究のための新規マウスギャグを用いたマウスパルプ曝露モデルの確立

本稿は、マウスにおける結紮誘発性インプラント周囲炎の実験モデルに関する報告である。動物の術前および術後の管理、抜歯、インプラント埋入、結紮誘発性インプラント周囲炎など、すべての外科的ステップについて説明します。...

マウスにおける結紮誘発性インプラント周囲炎の実験モデル

この研究では、マウスで歯周炎を誘発するための修正された6-0ナイロンライゲーション法について説明しており、再現性が高く、研究者が歯周病の発生から病理学的結果までを研究するための代替手段を表しています。...

上顎第二大臼歯のナイロン結紮による進行性歯周炎のマウスモデル

マウス異所性心臓移植モデルは、拒絶反応や免疫応答のメカニズムを研究するための重要な方法であると多くの研究者によって証明されています。しかし、関係する技術はまだ厳しいです。標準的な技術を変更することにより我々は1000以上の移植で成功を収めている。...

マウスにおける異所心臓移植

マウス小腸移植モデルは、免疫拒絶反応や画面​​新しい免疫抑制剤のmechanismesを研究するための重要なツールとして認識されている。しかし、このモデルは、関係する技術は非常に技術的な課題であるため、使用に制限されています。今は修正されたテクニックを紹介。...

マウスにおける小腸移植

マウスの横大動脈狭窄（TAC）は、心肥大や心不全の開発の基礎となるメカニズムを研究するために一般的に使用される実験的なモデルです。ここで、我々は、マウスの心肥大の再現性の学位を作成するために大動脈を収縮する手順を説明します。...

マウスの横大動脈狭窄

遠隔測定心電図は心​​臓の不整脈や心臓突然死のために動物モデルを評価する上で不可欠なツールとして浮上している。ここで、我々は、マウスの長期的、ホルター心電図モニタリングのアプリケーションのための測定ECG記録への段階的なガイドを提示する。...

マウスにおけるホルター心電図の記録

学ぶマウスにおけるアピカル歯根膜炎誘導法。外科的処置、マイクロCT、組織学的解析を用いて骨吸収と免疫応答をin vivoで評価する再現性の高いモデルです。

マウスにおけるアピカル歯年理炎の誘導

さらに動画を探す