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DOI: 10.3791/59743-v
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記載は、エチルメタンスルホネート(EMS)をミュータゲンとして使用する小さな穀物作物における標的誘導局所病変(TILLING)集団を開発するためのプロトコルである。また、Cel-1アッセイを用いて変異検出するためのプロトコルも提供される。
このプロトコルは、小穀物作物におけるEMS突然変異誘発による突然変異頻度の高い堅牢な耕作集団の開発を詳述する。TILLING集団は、機能的ゲノミクス、ならびに小さな穀物作物における前方遺伝的空間遺伝子発見に使用することができる。この技術を用いて開発されたTILLING集団は、高い突然変異頻度を有し、このプロトコルは任意の遺伝子型に適用することができる。
Cel-1アッセイベースの変異検出は、基本的なラボ機器を使用して行うことができます。最も重要なステップは最適なEMS濃度を決定することです。したがって、EMS投与曲線は、個々の集団のために特別に行われるべきである。
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