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October 24, 2019
DOI:
10.3791/60090-v
このプロトコルは、開胸手術に基づく血行力学的評価であり、マウスなどの小動物における右心室および肺動脈圧の評価に有用である。この手順の利点は、VP パラメータと PAP パラメータの両方を同時に生成できることです。したがって、PAHモデルの評価に好ましい。
手術用の機器を設定して開始します。圧力トランスデューサカテーテルを、血行力学実験の前に少なくとも30分間室温で0.9%生理食い物に浸します。次に、カテーテルを圧力量システムに接続します。
キャリブレーションノブを0と25ミリメートルの水銀に変えて圧力トランスデューサをキャリブレーションし、検証圧力信号をデータ取得ソフトウェアに送信し、キャリブレーション設定を設定します。ノブをトランスデューサに回し、バランスバルブをゼロベースラインに調整します。標準的なステレオ顕微鏡、温度制御された小さい動物の外科テーブルおよびマイクロ外科のためのライト照明システムを設定しなさい。
マウスが適切に麻酔されたら、剃毛と脱毛ローションを使用して胸と首の毛皮を取り除きます。温度制御された外科テーブルの上のsupineの位置でマウスを固定する。麻酔が有効であることを確認した後、首の皮膚に中線切開を行います。
湾曲した鉗子を使用して骨格筋を解剖し、気管を露出させる。22ゲージの静脈内シースカテーテルで口腔内挿管を行い、チューブが鉗子で気管内にあることを確認する。チューブを小さな動物用人工呼吸器に接続し、テープを使用して換気のために固定します。
その後、胸部の皮膚に中線切開を行い、焼灼器のツールを使用して胸部の筋肉を慎重に解剖します。中央にはさみを使用して胸骨をカットし、胸腔を露出します。焼灼ツールを使用して出血を防ぐことを確認してください。
右心室をレトラクターで露出させ、25ゲージ針で作られた小さなトンネルを通して生理的に浸した圧力トランスデューサーカテーテルを右心室圧(RVP)を測定します。カテーテルケーブルを保持し、肺動脈と同軸的に肺弁を横切る。圧力波形を観察し、安定した肺動脈圧またはPAP信号を得る。
次に、データ取得ソフトウェアを使用して血行力学データを記録します。慎重に右心系からカテーテルを除去し、1%消化酵素溶液を含む1ミリリットルの注射器に入れます。このプロトコルは、右心室と肺動脈に圧力トランスデューサーカテーテルを挿入することによって、マウスのRVPおよびPAP波形を得るために成功しました。
人工的なデータの生成を避けるために、ノイズを含むセグメントはデータ分析から除外され、カテーテルのゼロレベルがドリフトした場合に補正が行われました。RVPおよびPAPは、誘発された慢性低酸素症を有するマウスで測定し、その結果を対照群から得たものと比較した。シストリックPAP、拡張期PAP、平均PAP、および右心室収縮期圧は、いずれも慢性低酸素基において有意に増加した。
覚えておくべきことは、圧力トランスデューサーのカテーテルを慎重に右心室に挿入し、カテーテルの損傷を避け、滑らかなRVP波形が画面に表示されていることを確認することです。
ここでは、開胸手術アプローチを用いてマウスにおける右心室および肺動脈の侵襲的な形乱態評価を行うプロトコルを提示する。
10:20
Right Ventricular Systolic Pressure Measurements in Combination with Harvest of Lung and Immune Tissue Samples in Mice
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Read Article
Cite this Article
Luo, F., Wang, X., Luo, X., Li, B., Zhu, D., Sun, H., Tang, Y. Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice. J. Vis. Exp. (152), e60090, doi:10.3791/60090 (2019).
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