Name: 標的薬物送達のためのドキソルビシンを装填したアプタマー-PEI-G-PEG改変金ナノ粒子の合成 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: 学ぶドキソルビシン装填アプタマー修飾金ナノ粒子の合成法。標的薬物送達によりがん細胞選択的細胞死を誘導し、ドキソルビシンの毒性を低減する治療効率向上に貢献する革新的ナノキャリア技術を習得する。

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この研究は、中国の国立自然科学財団(31700840)によって資金提供されました。河南省の主要な科学研究プロジェクト(18B430013、18A150049)。この研究は、XYNUの若い学者のための南湖学者プログラムによって支えられた。著者たちは、XYNUのライフサイエンス大学の学士学生ゼボ・クに、彼の役に立つ作品に感謝したいと思います。著者らは、XYNUの分析・試験センターが機器の使用を認めることを望んでいる。

注意: すべての化学物質を使用する前に、関連するすべての材料安全データシート(MSDS)を必ずご確認ください。コポリマーおよびナノ粒子の調製に使用される化学物質のいくつかは、急性毒性である。ナノ粒子には潜在的な危険もあります。手袋、ラボコート、フード、フルレングスパンツ、近い靴など、適切な安全対策と個人用保護具をすべて使用してください。
1. 二重カルボキシルポリエチレングリコール(CT-PEG)33の合成
<ol><li>コハク酸無水(SA)1.46g(14.6 mmol)と4-ジメチルアミノピリジン(DMAP)の209mg(1.71ミリモル)を100 mLラウンドボトムフラスコに加えます。</li>
	<li>ステップ1.1で使用したフラスコに無水テトラヒドロフラン(THF)の15mLを加え、ガラスストッパーを装着します。フラスコを0°Cで30分間おいて下します。</li>
	<li>ポリエチレングリコール(PEG)4.28g(4.28 mmol)とトリエチルアミン(TEA)の1.8 mL(12.8 mmol)を新しいフラスコに加えます。</li>
	<li>ステップ1.3で使用したフラスコに無水THFの15 mLを加え、ガラスストッパーを合わせます。ステップ1.2で使用したフラスコに溶液をゆっくりと移し、窒素雰囲気下の注射器を用いた。</li>
	<li>溶液を0°Cで2時間撹拌し、室温(RT)で一晩反応を続ける。</li>
	<li>ロータリーエバポレーター(40°C、0.1 MPa)を使用して、反応液を濃縮し、THF溶媒を除去します。</li>
	<li>RTでは、ステップ1.6から15mLの1.325g/mLジクロロメタン(DCM)を溶解し、15mLのコールドジエチルエーテル(Et2O)を加えて沈殿物(ポリエチレングリコール二酸)を得る。フィルターペーパーで溶剤を取り除きます。 注:降水ステップは3倍に繰り返すことができます。</li>
	<li>RTで真空下で沈殿物を48時間乾燥させます。</li>
</ol>2. PEI-g-PEG共重合体の合成
<ol><li>ステップ1.8および5 mLのジメチルスルホキシド(DMSO)から305.47mgのCT-PEGをフラスコに加え、RTで攪拌してCT-PEGがDMSOに完全に溶解していることを確認します。</li>
	<li>DMSOの5mLで1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド(EDC)の49.46mgを5mLに溶解し、ステップ2.1で使用されるフラスコに溶液を加え、RTで30分間かき混ぜます。</li>
	<li>29.69 mgのN-ヒドロキシスクッチイミド(NHS)をDMSOの5 mLに溶解し、ステップ2.1で使用するフラスコに溶液を加えます。RTで3時間かき混ぜ続けます。</li>
	<li>28.6 μLのポリエチレンイミン(PEI)をDMSOの10 mLに溶解し、ステップ2.1で使用するフラスコに溶液を滴下して添加します。少なくとも3日間かき混ぜます。</li>
	<li>反応した溶液をステップ2.4から透析袋(1,000分子量カットオフ[MWCO])に移します。透析袋を1 Lビーカーに入れ、500mLの超純水を透析液として入れます。超純水を12時間ごとに3日間交換します。</li>
	<li>ステップ 2.5 のソリューションを別の透析バッグ (10,000 MWCO) に移します。透析袋を1 Lビーカーに入れ、500mLの超純水を透析液として入れます。超純水を12時間ごとに3日間交換します。</li>
	<li>回転エバポレーター(40°C、0.1 MPa)を使用してステップ2.6から溶液を濃縮し、サンプルを凍結乾燥してPEI-g-PEG粉末を得る。</li>
</ol>3. PEI-g-PEG@AuNPsの合成
<ol><li>5 mgの調製した PEI-g-PEG (ステップ 2.7) を 5 mL の超純水に新しいフラスコに溶かし、ガラス栓でフィットさせます。</li>
	<li>フラスコに0.3 mM HAuCl4溶液の100 mLを加え、RTで3時間攪拌します。 注: ソリューションの色は、すぐに黄色からオレンジ色に変更されます。</li>
	<li>フラスコに1mg/mL NaBH4 溶液1 mLを加え、RTで3時間攪拌します。 注:反応溶液は即座にバーガンディを回す必要があります。</li>
	<li>ステップ2.5で説明したように3日間透析バッグ(1,000MWCO)を用いた反応生成物を透析し、PEI-g-PEG@AuNPs溶液を得た。</li>
</ol>4. DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPsの合成
<ol><li>2.2 mg/mL DOX溶液1 mLと20 mLのPEI-g-PEG@AuNPs溶液を新しいフラスコに加え、ガラス栓に合わせます。</li>
	<li>0.727 mgのEDCを1mLの超純水に溶解し、ステップ4.1で使用するフラスコにEDC溶液を加えます。</li>
	<li>1 mLの超純水に0.437mgのNHSを溶かします。フラスコにNHS溶液を加え、RTで1時間かき混ぜます。</li>
	<li>手順2.5に記載した3日間の透析袋(1,000MWCO)を用いて反応生成物を透析し、DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs溶液を得た。</li>
</ol>5. AS1411-g-DOX-g-PEI-g-g-PEG@AuNPsの合成
<ol><li>20 mL の DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs溶液と 4OD AS1411 (OD = 光学密度; 1OD ≈ 33 μg) を新しいフラスコに加えます。</li>
	<li>28.76 mgのEDCを1mLの超純水に溶解し、ステップ5.1で使用するフラスコにEDC溶液を加えます。</li>
	<li>1mLの超純水に17.27mgのNHSを溶かします。ステップ5.1で使用したフラスコにNHS溶液を加え、RTで1時間反応をかき混ぜる。</li>
	<li>透析用バッグ(1,000 MWCO)をステップ2.5に記載した3日間用いて反応生成物を透析し、AS1411-g-g-g-PEI-g-PEG@AuNPsを得た。</li>
</ol>6. サンプルの特性評価
<ol><li>CT-PEGポリマー(ステップ1.8)とPEI-g-PEG共重合体(ステップ2.7)をそれぞれ核磁気共鳴(NMR)チューブでクロロホルムdに溶解する。14.09 T超伝導磁石と5.0mm 600 MHzの広帯域Z勾配高分解能プローブを搭載した600MHz NMR分光計を用いてサンプルを分析し、化学構造34を確認する。</li>
	<li>AuNPs、DOX、およびAS1411を分散し、PEI-g-PEG@AuNPs(ステップ3.4)、DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs(ステップ4.4)、AS1411-g-DOX-g-PEI-g-g-PEG@AuNPsをそれぞれ超純水中に調製した。次に、UV-vis分光光度計を用いて、キュベットに移し、紫外線可視(UV-vis)スペクトルを記録します。</li>
	<li>両面接着剤(2mm×2mm)をアルミ箔に取り付け、サンプル溶液(PEI-g-PEG@AuNPs、DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs、AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs)をテープ全体に均一に浸します。X線光電子分光分析装置を用いてサンプルを分析します。</li>
	<li>PEI-g-PEG@AuNPs、DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs、AS1411-g-doX-g-PEI-g-PEG@AuNPs溶液をそれぞれ超純水に分散させます。次いで、キュベットに移し、動的光散乱を用いてサイズ分布を評価する。</li>
	<li>PEI-g-g-PEG@AuNPs g-PEG@AuNPs、AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs溶液を超純水(各サンプルに対して5mLあたり1滴サンプル)の超純水に分散させます。2時間の超音波処理。銅グリッドをサンプル溶液に浸し、赤外線ランプで乾燥させます。透過型電子顕微鏡を用いて形態を特徴付け</li>
	<li>AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs g-20 kda MWCO透析カセットに1mgを注入し、5%ウシ血清アルブミン(BSA)でリン酸緩衝生理食塩液(PBS)80 mLに入れます。37°Cでかき混ぜる。</li>
	<li>所定のタイムポイントで、100 μLのアリコートを収集し、新鮮なPBSに交換します。UV-vis分光光度計を使用して、アリコートのDOX蛍光強度を測定します。</li>
</ol>7. As1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPsナノ粒子のCCK-8アッセイ
<ol><li>10%の胎児ウシ血清、100 U/mLペニシリン、100 μg/mLストレプトマイシンを37°Cで95%空気、5%CO2の加湿雰囲気下で補ったダルベックコの修飾イーグル培地(DMEM)でA549細胞を増殖させます。 2日ごとに培地を交換してください。細胞増殖および細胞毒性アッセイの継代時の細胞を使用して、調製したAS1411-g-g-g-g-PEI-g-PEG@AuNPsナノ粒子の細胞毒性を定量的に評価する。</li>
	<li>ナノ粒子溶液を100μLずつ、細胞培地1mLを各ウェルに加えます。24時間と48時間培養した後、培養液を細胞培養プレートから取り出し、300μLの新鮮な培養培地と30μLの細胞計数キット-8(CCK-8)キット溶液を各ウェルに直ちに添加します。CO2インキュベーターで4時間インキュベートを37°Cでインキュベートする。</li>
	<li>ステップ7.2から96ウェルプレートに200 μLの反応溶液を移します。マイクロプレートリーダーで570 nmの各井戸の光学密度(OD)を読み取ります。</li>
	<li>顕微鏡下で24時間と48時間で細胞の形態を観察します。</li>
</ol>

<ol><li>Abad, J. M., Bravo, I., Pariente, F., Lorenzo, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-tasking+base+ligand%3A+a+new+concept+of+AuNPs+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Multi-tasking base ligand: a new concept of AuNPs synthesis.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 408 (9), 2329-2338 (2016).</li>
<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2019%5BTitle%5D)+AND+%22CA-A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2019.</a> CA-A Cancer Journal for Clinicians. 69 (1), 7-34 (2019).</li>
<li>Jang, B., Kwon, H., Katila, P., Lee, S. J., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+delivery+of+biological+therapeutics+for+multimodal+and+synergistic+cancer+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Dual delivery of biological therapeutics for multimodal and synergistic cancer therapies.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 98, 113-133 (2016).</li>
<li>Gansler, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sixty+years+of+CA%3A+a+cancer+journal+for+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22CA-A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Sixty years of CA: a cancer journal for clinicians.</a> CA-A Cancer Journal for Clinicians. 60 (6), 345-350 (2010).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanism+for+Selective+Cytotoxicity+towards+Cancer+Cells+of+Diselenide-Containing+Paclitaxel+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanism for Selective Cytotoxicity towards Cancer Cells of Diselenide-Containing Paclitaxel Nanoparticles.</a> International Journal of Biological Sciences. 15 (8), 1755-1770 (2019).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precise+ratiometric+loading+of+PTX+and+DOX+based+on+redox-sensitive+mixed+micelles+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+Surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Precise ratiometric loading of PTX and DOX based on redox-sensitive mixed micelles for cancer therapy.</a> Colloids Surfaces B: Biointerfaces. 155, 51-60 (2017).</li>
<li>Blum, R. H., Carter, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adriamycin.+A+new+anticancer+drug+with+significant+clinical+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Adriamycin. A new anticancer drug with significant clinical activity.</a> Annals of Internal Medicine. 80 (2), 249-259 (1974).</li>
<li>de Lima, R. D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-level+laser+therapy+alleviates+the+deleterious+effect+of+doxorubicin+on+rat+adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Photochemistry+Photobiology+B%22%5BJournal%5D)">Low-level laser therapy alleviates the deleterious effect of doxorubicin on rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells.</a> Journal of Photochemistry Photobiology B. 196, 111512(2019).</li>
<li>Markowska, A., Kaysiewicz, J., Markowska, J., Huczynski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doxycycline%2C+salinomycin%2C+monensin+and+ivermectin+repositioned+as+cancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorganic+%26+Medicinal+Chemistry+Letters%22%5BJournal%5D)">Doxycycline, salinomycin, monensin and ivermectin repositioned as cancer drugs.</a> Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 29 (13), 1549-1554 (2019).</li>
<li>Songbo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+injury+in+doxorubicin-induced+cardiotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+Letters%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress injury in doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> Toxicology Letters. 307, 41-48 (2019).</li>
<li>Ewer, M. S., Ewer, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiotoxicity+of+anticancer+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Cardiotoxicity of anticancer treatments.</a> Nature Reviews Cardiology. 12 (9), 547-558 (2015).</li>
<li>Gabizon, A., Shmeeda, H., Barenholz, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+pegylated+liposomal+Doxorubicin%3A+review+of+animal+and+human+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of pegylated liposomal Doxorubicin: review of animal and human studies.</a> Clinical Pharmacokinetics. 42 (5), 419-436 (2003).</li>
<li>Xu, X., Ho, W., Zhang, X., Bertrand, N., Farokhzad, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+nanomedicine%3A+from+targeted+delivery+to+combination+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cancer nanomedicine: from targeted delivery to combination therapy.</a> Trends in Molecular Medicine. 21 (4), 223-232 (2015).</li>
<li>Feng, S., Nie, L., Zou, P., Suo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+drug+and+polymer+molecular+weight+on+drug+release+from+PLGA-mPEG+microspheres%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Polymer+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of drug and polymer molecular weight on drug release from PLGA-mPEG microspheres.</a> Journal of Applied Polymer Science. 132 (6), 41431(2015).</li>
<li>Chen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+Temperature-sensitive+Hydrogel+with+VEGF+Loaded+Microspheres+for+Vascularization+and+Bone+Regeneration+of+Femoral+Head+Necrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Letters%22%5BJournal%5D)">Injectable Temperature-sensitive Hydrogel with VEGF Loaded Microspheres for Vascularization and Bone Regeneration of Femoral Head Necrosis.</a> Materials Letters. 229, 138-141 (2018).</li>
<li>Abadeer, N. S., Murphy, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+Progress+in+Cancer+Thermal+Therapy+Using+Gold+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physical+Chemistry+C%22%5BJournal%5D)">Recent Progress in Cancer Thermal Therapy Using Gold Nanoparticles.</a> The Journal of Physical Chemistry C. 120 (9), 4691-4716 (2016).</li>
<li>Riley, R. S., Day, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gold+nanoparticle-mediated+photothermal+therapy%3A+applications+and+opportunities+for+multimodal+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Nanomedicine+and+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Gold nanoparticle-mediated photothermal therapy: applications and opportunities for multimodal cancer treatment.</a> WIREs Nanomedicine and Nanobiotechnology. 9 (4), 1449(2017).</li>
<li>Fratoddi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+Hydrophilic+Gold+Nanoparticles+as+Carrier+for+Anticancer+Copper%28I%29+Complexes%3A+Loading+and+Release+Studies+for+Biomedical+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomaterials+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Highly Hydrophilic Gold Nanoparticles as Carrier for Anticancer Copper(I) Complexes: Loading and Release Studies for Biomedical Applications.</a> Nanomaterials (Basel). 9 (5), 772(2019).</li>
<li>Lee, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-loaded+gold+plasmonic+nanoparticles+for+treatment+of+multidrug+resistance+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Drug-loaded gold plasmonic nanoparticles for treatment of multidrug resistance in cancer.</a> Biomaterials. 35 (7), 2272-2282 (2014).</li>
<li>Dreaden, E. C., Alkilany, A. M., Huang, X., Murphy, C. J., El-Sayed, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+golden+age%3A+gold+nanoparticles+for+biomedicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Society+Reviews%22%5BJournal%5D)">The golden age: gold nanoparticles for biomedicine.</a> Chemical Society Reviews. 41 (7), 2740-2779 (2012).</li>
<li>Wei, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anticancer+drug+nanomicelles+formed+by+self-assembling+amphiphilic+dendrimer+to+combat+cancer+drug+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Anticancer drug nanomicelles formed by self-assembling amphiphilic dendrimer to combat cancer drug resistance.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (10), 2978-2983 (2015).</li>
<li>Galluzzi, L., Buque, A., Kepp, O., Zitvogel, L., Kroemer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+Effects+of+Conventional+Chemotherapy+and+Targeted+Anticancer+Agents%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Immunological Effects of Conventional Chemotherapy and Targeted Anticancer Agents.</a> Cancer Cell. 28 (6), 690-714 (2015).</li>
<li>Muddineti, O. S., Ghosh, B., Biswas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+trends+in+using+polymer+coated+gold+nanoparticles+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Current trends in using polymer coated gold nanoparticles for cancer therapy.</a> International Journal of Pharmaceutics. 484 (1-2), 252-267 (2015).</li>
<li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methyl+Orange+removal+by+a+novel+PEI-AuNPs-hemin+nanocomposite%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Sciences%22%5BJournal%5D)">Methyl Orange removal by a novel PEI-AuNPs-hemin nanocomposite.</a> Journal of Environmental Sciences. 53, 278-283 (2017).</li>
<li>Gu, F. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+nanoparticles+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Today%22%5BJournal%5D)">Targeted nanoparticles for cancer therapy.</a> Nano Today. 2 (3), 14-21 (2007).</li>
<li>Srinivasarao, M., Galliford, C. V., Low, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+in+the+design+of+ligand-targeted+cancer+therapeutics+and+imaging+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Principles in the design of ligand-targeted cancer therapeutics and imaging agents.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 14 (3), 203-219 (2015).</li>
<li>Liu, Z., Shi, Y., Chen, Z., Duan, L., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+progress+towards+the+use+of+aptamers+in+targeted+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Science+Bulletin+%28Chinese+Version%29%22%5BJournal%5D)">Current progress towards the use of aptamers in targeted cancer therapy.</a> Chinese Science Bulletin (Chinese Version). 59 (14), 1267(2014).</li>
<li>Ghosh, P., Han, G., De, M., Kim, C. K., Rotello, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gold+nanoparticles+in+delivery+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Gold nanoparticles in delivery applications.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 60 (11), 1307-1315 (2008).</li>
<li>Vandghanooni, S., Eskandani, M., Barar, J., Omidi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+LNA-loaded+nanoparticles+of+star-shaped+glucose-core+PCL-PEG+copolymer+for+enhanced+inhibition+of+oncomiR-214+and+nucleolin-mediated+therapy+of+cisplatin-resistant+ovarian+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Antisense LNA-loaded nanoparticles of star-shaped glucose-core PCL-PEG copolymer for enhanced inhibition of oncomiR-214 and nucleolin-mediated therapy of cisplatin-resistant ovarian cancer cells.</a> International Journal of Pharmaceutics. 573, 118729(2020).</li>
<li>Andghanooni, S., Eskandani, M., Barar, J., Omidi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AS1411+aptamer-decorated+cisplatin-loaded+poly%28lactic-co-glycolic+acid%29+nanoparticles+for+targeted+therapy+of+miR-21-inhibited+ovarian+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">AS1411 aptamer-decorated cisplatin-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles for targeted therapy of miR-21-inhibited ovarian cancer cells.</a> Nanomedicine. 13 (21), 2729-2758 (2018).</li>
<li>Palmieri, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+anti-nucleolin+recombinant+immunoagent+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Human anti-nucleolin recombinant immunoagent for cancer therapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9418-9423 (2015).</li>
<li>Pichiorri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+NCL+targeting+affects+breast+cancer+aggressiveness+through+miRNA+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">In vivo NCL targeting affects breast cancer aggressiveness through miRNA regulation.</a> Journal of Experimental Medicine. 210 (5), 951-968 (2013).</li>
<li>Hou, S., McCauley, L. K., Ma, P. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+erosion+properties+of+PEG-containing+polyanhydrides%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecular+Bioscience%22%5BJournal%5D)">Synthesis and erosion properties of PEG-containing polyanhydrides.</a> Macromolecular Bioscience. 7 (5), 620-628 (2007).</li>
<li>Nie, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+Vaginal+Hydrogels+as+a+Multi-Drug+Carrier+for+Contraception%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Sciences%22%5BJournal%5D)">Injectable Vaginal Hydrogels as a Multi-Drug Carrier for Contraception.</a> Applied Sciences. 9 (8), 1638(2019).</li>
<li>Zou, P., Suo, J., Nie, L., Feng, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-responsive+biodegradable+star-shaped+block+copolymers+for+vaginal+gels%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Temperature-responsive biodegradable star-shaped block copolymers for vaginal gels.</a> Journal of Materials Chemistry. 22 (13), 6316-6326 (2012).</li>
<li>Etrych, T., Šubr, V., Laga, R., Říhová, B., Ulbrich, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymer+conjugates+of+doxorubicin+bound+through+an+amide+and+hydrazone+bond%3A+Impact+of+the+carrier+structure+onto+synergistic+action+in+the+treatment+of+solid+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Polymer conjugates of doxorubicin bound through an amide and hydrazone bond: Impact of the carrier structure onto synergistic action in the treatment of solid tumours.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 58, 1-12 (2014).</li>
<li>Safari, F., Tamaddon, A. M., Zarghami, N., Abolmali, S., Akbarzadeh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyelectrolyte+complexes+of+hTERT+siRNA+and+polyethyleneimine%3A+Effect+of+degree+of+PEG+grafting+on+biological+and+cellular+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Cells%2C+Nanomedicine%2C+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Polyelectrolyte complexes of hTERT siRNA and polyethyleneimine: Effect of degree of PEG grafting on biological and cellular activity.</a> Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology. 44 (6), 1561-1568 (2016).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

1HNMRスペクトル(図2)は、CT-PEG共重合体とPEI-g-PEG共重合体の合成に成功したことを確認した。PEGとPEIの分子量はそれぞれ1,000と1,200であった。さらに、EDC/NHS触媒系を用い、アミド反応を介してPEI-g-PEG共重合体を合成した。なお、PEGとPEIの分子量がPEI-g-PEG共重合体を合成するために変化した場合、反応時間と触媒系を再評価する必要がある。また、AUNPs上のPEI-g-PEG共重合体コーティングの反応条件は、主にPEG-g-PEI共重合体の分子重量および構造がAuNPsのコーティング効率および直径に影響を及ぼす可能性があるため、さらに調整する必要があります。その後、共重合体機能化されたAuNPsの形態も同様に変化させることができる。PEIポリマーからのアミノ基の数は、最終的なPEI-g-PEG共重合体合成の構造に影響を与えることができ、PEIとCT-PEGの架橋作用は必然的に起こる。したがって、ステップ 2.4 は慎重に実行する必要があり、PEI ソリューションはゆっくりとドロップバイ ドロップを追加す...

世界的に主要な公衆衛生上の問題である癌は、治癒率が低く、再発率が高く、死亡率が高いとして広く特徴づけられている。現在の従来の抗癌法には、手術、化学療法、および放射線療法3が含まれており、その中で化学療法は、クリニック4における癌患者に対する主要な治療法である。臨床用抗癌剤は主に、パクリタキセル(PTX)5およびドキソルビシン(DOX)6,7を含む。DOXは、抗新生剤である、癌細胞毒性および癌細胞増殖の阻害の利点のために、臨床化学療法に広く適用されている8,9。しかし、DOXは心毒性10、11を引き起こし、DOXの短い半減期は、診療所12での適用を制限する。したがって、DOXをロードし、標的領域に制御された方法で潜伏放出するために分解性薬物キャリアが必要である。
ナノ粒子は標的薬物送達システムで広く使用されており、がん治療にはいくつかの利点があります(すなわち、大きな表面対体積比、小型、様々な薬物をカプセル化する能力、および調整可能な表面化学など)13、14、15。特に、金ナノ粒子(AuNPs)は、光熱癌治療16,17などの生物及び生物医学的用途において広く用いられている。AuNPsのユニークな特性は、ファシリティ合成や一般表面官能化など、がん治療18の臨床分野において優れた見通しを持っている。また、AuNPは、多くの研究で薬物送達戦略を特定し、腫瘍を診断し、抵抗を克服するために使用されてきました19,20.
それにもかかわらず、AuNPは、標的化およびアクセシビリティ特性などの強化された浸透および保持(EPR)を介して腫瘍病変で高い局所放出を介して薬剤耐性を克服するためにさらに調整される必要がある。ポリマー機能性のAUNPsは、疎水性抗癌剤の水溶性の改善や長期の循環時間21,22などの独自の利点を発揮している。ポリエチレングリコール(PEG)、ポリエチレンイミン(PEI)、ヒアルロン酸、ヘパリン、キサンタンガムなどの様々な生体適合性ポリマーがAuNPコーティングに使用されています。その後、AuNPsの安定性とペイロードが23を改善します。具体的には、PEIは、一次、二次、および第三級アミンの多くの繰り返し単位で構成される高度に分岐したポリマーである24。PEIは、優れた溶解性、低粘度、高い機能性を有しており、AUNP上でのコーティングに適しています。
一方、抗癌剤は、癌細胞に直接送達する必要があり、負荷効率を向上させ、原発性および進行転移性腫瘍25を治療するための毒性を低くする必要がある。標的リガンドは、抗癌剤標的送達システム26に大きな可能性を秘めている。標的分子結合に対するその選択性は、特異性を標的とする抗癌薬を付与し、疾患組織における薬物濃縮を増加させる27。よりリガンドには、抗体、ポリペプチド、および小分子が含まれる。他のリガンドと比較して、核酸アプタマーは、インビトロで合成することができ、変更が容易である。AS1411は、癌細胞28、29、30上の過剰発現標的核タンパク受容体に特異的に結合する安定な二量体G-四量体構造を形成する非修飾26bpホスホジエステルオリゴヌクレオチドチドである。AS1411は多くの癌細胞の増殖を阻害するが、健康な細胞31、32の増殖には影響しない。その結果、AS1411は理想的な標的薬物送達システムを作製するために使用されてきた。
本研究では、PEI-g-PEG共重合体をアミド反応を介して合成し、次いでPEI-g-PEG共重合体被覆金ナノ粒子(PEI-g-PEG@AuNPs)を作製した。さらに 、DOXと AS1411 は、図 1 に示すように、準備された PEI-g-PEG@AuNPsに順次リンクされています。この詳細なプロトコルは、研究者がDOXとAS1411を搭載した新しいPEI-g-PEG@AuNPsの製造に関連する多くの一般的な落とし穴を避けるのを助けることを目的としています。

<table><tbody><tr><td>4-ジメチルアミノピリジン</td><td>マックリン</td><td>D807273</td><td></td></tr><tr><td>A549細胞</td><td></td><td>ATCC CCL-185TM</td><td></td></tr><tr><td>AS1411</td><td>BBI Life Sciences Corporation</td><td></td><td>5'-d (TTTGGTGGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTGGGG) FL-AS1411 (蛍光色素標識AS1411)</td></tr><tr><td>無水テトラヒドロフラン (THF)</td> <td>SinoPharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cell counting kit-8 (CCK-8)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>96992-500TESTS-F</td><td></td></tr><tr><td>ジクロロメタン</td><td>漢方薬</td><td>80047318</td><td></td></tr><tr><td>ジエチルエーテル (Et2O)</td><td>SinoPharm Chemical Reagent Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr> ジ<tr><td>メチルスルホキシド</td><td>マックリン</td><td>D806645</td><td></td></tr><tr><td>ダルベッコの変性イーグルス培地 (DMEM)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ドキソルビシン塩酸塩</td><td>Rhawn</td><td>R017518</td><td></td></tr><tr><td>エーテル絶対</td><td>伝統的な漢方薬</td><td>80059618</td><td></td></tr><tr><td>電界放出形 透過型 電子顕微鏡</td><td>FEI Company</td><td>Tecnai G2 F 20</td><td></td></tr><tr><td>金(III) 塩化物三水和物</td><td>Rhawn</td><td>R016035</td><td></td></tr><tr><td>レーザー粒子サイズ装置</td><td>Malvern Instruments Ltd</td><td>ZetasizerNanoZS/Masterszer3000E</td><td></td></tr><tr><td>マイクロプレートリーダー</td><td>分子デバイス</td><td>SpectraMax 190</td><td></td></tr><tr><td>N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド塩酸塩</td><td>マックリン</td><td>N808856</td><td></td></tr><tr><td>N-ヒドロキシスクシンイミド</td><td>マックリン</td><td>H6231</td><td></td></tr><tr><td>NMRソフトウェア</td><td>デルタ 5.2.1</td><td></td><td></td></tr><tr><td>核磁気共鳴分光器</td><td>日本電子</td><td>JNM-ECZ600R/S3</td><td></td></tr><tr><td>Origin 8.5</td><td>OriginLab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン</td><td>Sigma Aldrich</td><td>V900929-100ML</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4417-100TAB</td><td></td></tr><tr><td>ポリ(エチレングリコール)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>81188</td><td>BioUltra, average Mn ~ 1000</td></tr><tr><td>Poly(ethyleneimine) solution</td><td>Sigma Aldrich</td><td>482595</td><td>平均Mn~1200、H2Oで50重量%</td></tr><tr><td>水素化ホウ素ナトリウム、粉末</td><td>アクロス</td><td>C18930</td><td></td></tr><tr><td>ストレプトマイシン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>85886-10ML</td><td></td></tr>無<tr><td>水コハク酸</td>漢<td>方薬</td><td>30171826</td><td></td></tr><tr><td>テトラヒドロフラン</td><td>漢方薬</td><td>40058161</td><td></td></tr><tr><td>トリエチルアミン</td><td>伝統的な漢方薬</td><td>80134318</td><td></td></tr><tr><td>UV/VIS/NIR 分光計</td><td>Lambda950</td><td>Lambda950</td><td></td></tr><tr><td>X 線光電子分光計</td><td>Thermo&ensp;フィッシャー&ensp;サイエンティフィック</td><td>K-ALPHA 0.5EV</td><td></td></tr></tbody></table>

標的薬物送達のためのドキソルビシンを装填したアプタマー-pei-g-peg改変金ナノ粒子の合成

Synthesis of Aptamer-PEI-g-PEG Modified Gold Nanoparticles Loaded with Doxorubicin for Targeted Drug Delivery

健康な細胞における薬剤耐性および毒性のために、ドキソルビシン(DOX)の使用は臨床癌治療において限られている。このプロトコルは、ポリエチレングリコール(PEI-g-PEG)共重合体機能化金ナノ粒子(AuNPs)をアミド反応を介してアプタマー(AS1411)とDOXを移植したポリ(エチレニミン)の設計を記述する。AS1411は、がん細胞上の標的ヌクレオリン受容体と特異的に結合し、DOXが健康な細胞の代わりに癌細胞を標的とするようにする。まず、PEGはカルボキシ化され、次いで分枝状PEIに移植し、PEI-g-PEG共重合体を得、これは 1HNMR分析によって確認される。次に、PEI-g-PEG共重合体被覆金ナノ粒子(PEI-g-PEG@AuNPs)が合成され、DOXとAS1411はアミド反応を介して徐々にAuNPsに共有結合される。調製されたAS1411-g-DOX-g-PEI-g-g-PEG@AuNPsの直径は、-29.3mVのゼータ電位を有する、ナノ粒子が水および細胞媒体において安定であることを示す。.細胞細胞毒性アッセイは、新たに設計されたDOX搭載AuNPsが癌細胞を殺すことができることを示している(A549)。この合成は、連続アミド反応によって達成されるAuNPs上のPEI-g-PEGコポリマー、アプタマー、およびDOXの繊細な配置を示しています。このようなアプタマー-PEI-g-PEG機能化されたAuNPsは、がん治療における標的薬物送達のための有望なプラットフォームを提供する。

1H NMR分光法は、CT-PEGポリマーとPEI-g-PEG共重合体の合成に成功したことを確認するために用いた(図2)。図2aは、δ=3.61ppmでのメチレンプロトン信号とδ=2.57ppmのカルボキシルプロトン信号がCT-PEGポリマーの合成に成功したことを確認することを示す。 図2bは、δ=2.6ppmでのPEGのメチレンプロトンシグナルと、PEIのプロトンシグナルがδ=1.66ppmでPEI-g-PEGコポリマーの合成を確認することを示す。
UV-vis分光法は、AuNPs上で調製されたコポリマーの正常な機能化を決定するために行われた(図3)。UV-visスペクトルにおいて、〜523nm、507nm、および260nmのバンドの存在は、それぞれA...

このプロトコルでは、ドキソルビシンを装填したAS1411-g-PEI-g-PEG変性金ナノ粒子は、3段階のアミド反応を介して合成される。次いで、ドキソルビシンをロードし、癌治療のために標的癌細胞に送達する。

標的薬物送達のためのドキソルビシンを装填したアプタマー-PEI-G-PEG改変金ナノ粒子の合成

Due to drug resistance and toxicity in healthy cells, use of doxorubicin (DOX) has been limited in clinical cancer therapy. This protocol describes the ...

薬剤耐性と毒性のため、ドキソルビシンの使用は臨床では制限されています。このプロトコルは、この治療薬の放出を維持するための分解性担体を提供します。この方法の利点は、合成された担体を使用して薬物を直接がん細胞に送達し、がん細胞のみに細胞死を誘導できることです。CT-PEG合成では、まず100ミリリットルの丸底フラスコに1.46グラムの無水コハク酸と209ミリグラムの4-ジメチルアミノピリジンを加えます。次に、15ミリリットルの無水テトラヒドロフランをフラスコに加え、ガラス栓をフラスコに取り付けてから、反応を摂氏0度で30分間インキュベートします。インキュベーション中に、4.208グラムのPEG、1.8ミリリットルのトリエチルアミン、および15ミリリットルの無水テトラヒドロフランを新しいフラスコに加え、ガラス栓でフラスコを閉じます。インキュベーションの終わりに、窒素雰囲気下でシリンジを使用して、2番目の溶液を最初のフラスコにゆっくりと移します。新しい溶液を摂氏0度で2時間攪拌した後、室温で一晩反応を続けます。翌朝、摂氏40度、0.1メガパスカルのロータリーエバポレーターを使用して、反応溶液を濃縮し、テトラヒドロフラン溶媒を除去します。1時間後、反応溶液を室温でジクロロメタン1ミリリットルあたり1.325グラムの15ミリリットルに溶解してから、15ミリリットルの冷たいジエチルエーテルを加えてPEG二酸沈殿生成物を得る。次に、濾紙で溶媒を取り除き、沈殿物を室温で48時間真空下で乾燥させます。PEI-g-PEG共重合体を合成するには、新しいフラスコに305.47ミリグラムのCT-PEG沈殿物と5ミリリットルのDMSOを加え、CT-PEGが完全に溶解するまで室温で反応を攪拌します。次に、49.46ミリグラムのEDCを5ミリリットルのDMSOに溶解し、溶液をフラスコに加えます。室温で30分間反応を撹拌した後、29.69ミリグラムのN-ヒドロキシスクシンイミドと5ミリリットルのDMSOを溶解し、得られた溶液をフラスコに加えます。室温で3時間反応を撹拌し続けます。インキュベーションの終わり近くで、28.6マイクロリットルのPEIを10ミリリットルのDMSOに溶解し、溶液をフラスコに滴下します。反応を室温で少なくとも3日間攪拌します。インキュベーション終了時に、反応溶液を分子量1000のカットオフの透析バッグに移し、透析液として500ミリリットルの超純水が入った1リットルのビーカーにバッグを入れます。透析の終わりに、10, 000分子量のカットオフを持つ透析バッグに溶液を移し、透析液として500ミリリットルの超純水を含む1リットルのビーカーにバッグを置きます。2回目の透析の最後に、摂氏40度、0.1メガパスカルのロータリーエバポレーターを使用して溶液を濃縮し、サンプルを凍結乾燥してPEI-g-PEG粉末を得ます。PEI-g-PEG製品による金ナノ粒子のコーティングのために、調製したPEI-g-PEGの5ミリグラムを新しいフラスコ内の5ミリリットルの超純水に溶解し、ガラスストッパーでフラスコを取り付けます。フラスコに100ミリリットルの0.3ミリモルオーラ塩化物溶液を加え、室温で3時間撹拌します。色はすぐに明るい黄色から濃い黄色に変わります。インキュベーションの終わりに、フラスコに水素化ホウ素ナトリウム溶液1ミリリットルあたり1ミリグラムの1ミリリットルを加えます。色はすぐに濃い黄色から黄金色に変わり、溶液を室温でさらに3時間攪拌します。次に、PEI-g-PEG被覆金ナノ粒子溶液を得るために実証されているように、反応生成物を1000分子量のカットオフ透析バッグで3日間透析します。PEI-g-PEG被覆金ナノ粒子へのドキソルビシンのグラフト化用。1ミリリットルあたり2.2ミリグラムのドキソルビシン溶液と20ミリリットルのPEI-g-PEGコーティング金ナノ粒子溶液を新しいフラスコに加え、ガラスストッパーでフラスコを取り付けます。次に、0.727ミリグラムのEDCを1ミリリットルの超純水に溶かし、フラスコにEDC溶液を加えます。0.437ミリグラムのN-ヒドロキシスクシンイミドを1ミリリットルの超純水に溶解し、N-ヒドロキシスクシンイミド溶液をフラスコに加え、室温で攪拌しながら1時間のインキュベーションを行います。インキュベーションの終了時に、反応生成物を1000分子量のカットオフ透析バッグで3日間透析し、ドキソルビシンg-PEI-g-PEG被覆金ナノ粒子溶液を得ることが実証されています。AS1411アプタマーをDOX-g-PEI-g-PEGに移植するため。20ミリリットルのドキソルビシンDOX-g-PEI-g-PEG被覆金ナノ粒子溶液を、AS1411の約4光学密度濃度に加える。28.76ミリグラムのEDCを1ミリリットルの超純水に溶かし、フラスコにEDC溶液を加えます。17.27ミリグラムのN-ヒドロキシスクシンイミドを1ミリリットルの超純水に溶解し、N-ヒドロキシスクシンイミド溶液をフラスコに加え、室温で攪拌しながら1時間のインキュベーションを行います。次いで、AS1411-g-ドキソルビシン-g-PEI-g-PEG被覆金ナノ粒子を得るために実証されたように、反応生成物を1000分子量カットオフ透析バッグ中で3日間透析する。プロトンNMR分光法は、CT-PEGポリマーおよびPIE-g-PEG共重合体の合成が成功したことを確認するために使用できます。紫外分光法は、金ナノ粒子上に調製された共重合体の成功した官能基化および段階的なローディングを決定するために実施することができる。X線光電子分光法は、金ナノ粒子上の共重合体の化学結合を調べるために使用できます。動的光散乱を実行して、調製したナノ粒子のサイズ分布を決定できます。この解析では、透過型電子顕微鏡により、均一な形態を持つ非クラスター化ナノ粒子が明らかになりました。細胞生存率解析では、A549細胞数が経時的に減少し、ナノ粒子の濃度の増加に応答して減少することが明らかになりました。しかし、遊離ドキソルビシン群と比較して、細胞数は増加し、毒性が減少したことを示しています。さらに、ドキソルビシン放出プロファイルの分析により、官能基化ナノ粒子からのドキソルビシンの持続的な放出がA549細胞の減少を引き起こしたことが明らかになりました。PEI-g-PEG共重合体調製とAS1411グラフトステップは、手順の実施を成功させるために重要です。薬剤を移植する前にAS1411を移植することで、同じ薬物担体を達成できますが、薬物のローディング効率が低下します。

synthesis-aptamer-pei-g-peg-modified-gold-nanoparticles-loaded-with

Research

JoVE Journal

Chemistry

化学

タイプBゼラチンベースの設計nanovectorsシステム（GENS）が膵臓癌の治療における全身遺伝子デリバリーとトランスフェクションのために開発されました。上皮成長因子受容体（EGFR）nanparticlesの表面上の特定のペプチドによる修飾により、彼らは、EGFR受容体をターゲットに可能性があり、そのような高い細胞内のグルタチオン濃度として、環境を還元条件下でプラスミド離します。...

上皮成長因子受容体をターゲットとしたゼラチンベースのエンジニアNanovectorsを使用してヒト膵臓癌細胞における遺伝子デリバリーとトランスフェクション

この記事の詳細腫瘍標的ナノ粒子、HerDoxの光学イメージング解析のための手続き。特に、ターゲティングおよび腫瘍浸透性を評価する腫瘍を検出するためのマルチモードの撮像装置の詳細な使用がここで記載されている。...

標的ウイルスタンパク質の分析はHER2 +腫瘍に配信ナノ粒子

ポリリンゴ酸に基づくナノ薬剤の例は、がんに適用可能な個別化医療の合理的な設計に向けて提示されている。これは、ヌードマウスでのHer2陽性ヒト乳癌を治療するために、ナノ薬物の合成を記載する。...

複数の腫瘍マーカーのターゲットとするためのポリリンゴ酸ベースのナノバイオポリマー：個別化医療の機会？

ここでは、強力な磁気モーメントと強い近赤外（NIR）吸光度磁気プラズモニックナノ粒子の合成のためのプロトコルを記述します。このプロトコルはまた、分子特異的な標的化を必要とするさまざまな生物医学アプリケーションのためのFc部分を介してナノ粒子への抗体結合が含まれています。...

Immunotargeted磁気プラズモニックナノクラスターの合成

私たちは、がんの光音響イメージングのための金ナノロッドを含む細胞ビヒクルの準備と実現可能性を示しています。...

ゴールドナノロッドを含む細胞車の作製と光音響分析

親油性のドキソルビシンプロドラッグの調製および特徴付けのためのプロトコルは、1,2- distearoyl- SN -glycero -3- phosphoethanolamine- Nロード- [アミノ（ポリエチレングリコール）-2000]の（DSPE-PEG）ミセルが記載されています。...

親油性ドキソルビシンプロドラッグミセルの調製とキャラクタリゼーション

液晶ナノ粒子（LCNP）ナノキャリアは、生細胞の原形質膜に疎水性の貨物の制御送達のためのビヒクルとして利用されます。...

液晶ナノ粒子キャリアにおける疎水性貨物カプセル化の標的細胞膜配達

このプロトコルは、サンプル抽出の効率的かつ便利な分析プロセスと心肺毒性 DOX 代謝物、生物学的に doxorubicinol (DOXol)、マイトマイシン C (MMC)、ドキソルビシン (DOX)...

サンプル抽出、ドキソルビシン、マイトマイシン C 以下の組み合わせへのドラッグデリバリー ナノ粒子の担癌マウスの同時のガスクロマトグラフィーによる定量

修飾表面にポリ エチレング リコールのコーティングによる生体適合性の 10 nm...

粒子の合成機能 10 nm ポリマー コーティング金対象化、血管内皮細胞とドラッグデリバリー

静脈内合成ペプチド、蛋白質キナーゼ C デルタ阻害剤は、虚血再灌流惹起急性肺傷害の減少を提供する金ナノ粒子のペプチド...

金ナノ粒子を用いた蛋白質キナーゼ C デルタ阻害ペプチド製剤

学ぶドキソルビシン装填アプタマー修飾金ナノ粒子の合成法。標的薬物送達によりがん細胞選択的細胞死を誘導し、ドキソルビシンの毒性を低減する治療効率向上に貢献する革新的ナノキャリア技術を習得する。

標的薬物送達のためのドキソルビシンを装填したアプタマー-PEI-G-PEG改変金ナノ粒子の合成

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