Name: 家畜豚脳の抽出と解剖 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: 学ぶ家畜豚脳の摘出と解剖法。ヒトとの類似性から神経科学研究に有用な脳領域を正確に分離する技術を解説。適切な道具と手順で組織の損傷を防ぎ、教育や実験に活用できる標本を確保する方法を紹介します。

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著者らは、農業・消費者・環境科学情報通信大学のジム・ノブラウチとマーティン・ブース・ホッジスが、オーディオとビデオの撮影、録音、編集に関する専門知識を認めたいと考えています。

イリノイ大学アーバナ・シャンペーン校の施設動物管理・使用委員会(IACUC)によって動物の被験者に関する手続きが承認されました。
注:安楽死の前に、 豚は、テラゾールの組み合わせと筋肉内注射を介して麻酔された:ケタミン:キシラジン(50.0 mgのタイルタミンHClプラス50.0 mgのゾラゼパムHCl再構成 ケタミンHClの2.50 mL(100 g/L)および2.50 mLのキシラジン(100 g/L)で、0.06 mg/kg BWで投与した。麻酔が行われた後、ピグはペントバルビタールナトリウム(390mg/mLを1mL/5 kg BWで投与する)の心臓内投与を介して安楽死させた。脳の解剖のために、組織の所望の分析手順に基づいて安楽死の方法を選択することが推奨される。安楽死の方法は、脳にできるだけ少ない損傷を引き起こすはずです。
1. 豚の脳の抽出
<ol><li>人道的安楽死に続いて、首のうなじの上、第1椎骨と第2椎骨(それぞれアトラスと軸)の間で切断することによって豚の首を切断する。</li>
	<li>スパイクを含むように変更された固定化されたベンチバイスでヘッドを固定します。続行する前に、ヘッドが完全に固定されていることを確認してください。<ol>
<li>メスを使用して、頭の後部に続く頭蓋骨の正中線に沿って矢状のカットを行います。</li>
		<li>頭の後部に2番目の(横)切り傷を加えてください。</li>
		<li>スナッの後端に3番目の(横)カットを行い、目に沿って行きます。頭蓋骨に簡単にアクセスできるように、頭蓋骨からできるだけ遠くに皮膚をカットします。</li>
	</ol>
</li>
	<li>骨のこぎりを使用して、目から頭蓋骨の頂点まで伸びる2つの前部から後部への切り傷を正中線に向けて行う。中線に向かって鋸をベベルし、頭蓋骨を貫通するのに十分な深さをカットします。<ol>
<li>垂直な側面で上記のプロセスを繰り返し、頭蓋骨に長方形の「窓」を作成します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>肉のフックを使用して、頭蓋骨の長方形のセクションを詮索。セクションのコーナーの1つにフックを置くことから始め、頭蓋骨の部分を緩めるために上向きの圧力を加えます。誤って脳組織を貫通するのを防ぐために、頭蓋骨のレベルにのみ肉のフックを置くように注意してください。</li>
	<li>髄膜層が脳に残っている場合は、鉗子と鈍いはさみ(またはメス)を使用して、脳に切り込まずに優しく層を取り除きます。</li>
	<li>頭の後部で筋肉と脂肪を切り取り、頭蓋骨の後部を露出させるためにメスを使用してください。<ol>
<li>頭蓋骨の後部に沿って2つの横断カットを行います。脳組織に切り込まないで下るようにしてください。</li>
		<li>スナッズにしっかりと手を置いて頭を固定し、後方の圧力を加え、頭蓋骨の後部を引き離し、小脳を露出させます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ベンチの悪徳から頭を取り出し、外科用マットの上に置きます。</li>
	<li>頭脳を取り除くために、メスの鈍い端のような長い細いツールを使用してください。頭を反転し、脳の表面を損傷することなく、頭蓋骨から脳を同化するために穏やかなスクープ運動を使用しています。 注:脳を取り除くために頭蓋神経を切断する必要があります。穏やかにそうし、強制的に脳を引き出そうとしないでください。脳は、頭蓋骨と背骨から適切かつ完全に切り離されると、単独で脱落します。</li>
</ol>2. 豚の脳の解剖
注:解剖手順中の視覚表現として脳アトラスまたは繊維解剖ガイド14 を使用すると役に立つ場合がある。解剖された組織サンプルは、各サンプルの除去時にプロジェクト固有のニーズに応じて適切に保存されていることを確認してください(以下で詳しく説明)。さらに、このビデオの目的のために、示されたすべての脳領域は右半球から解剖されたが、これは実験目的に基づいて実験室によって異なるかもしれないことに注意してください。
<ol><li>脳幹(主に髄質)を取り除くために、小脳にコロナカット尾体を作る。</li>
	<li>小脳を取り除くために、皮質の後部にコロナカットを作ります。このサンプルから小脳の所望の領域(例えば、ベルミ、フロックルなど)を分離する。このサンプルには脳幹の一部を含めないようにしてください。</li>
	<li>縦方向の裂け目に沿って中矢状の切り取りを行うことによって、脳の2つの半球を分離します。皮質に損傷を引き起こすのを防ぐために連続的な動きとしてこのカットを行います.</li>
	<li>中脳を取り除くために、所望の量の組織を単に腹側と下のコリリに解剖する。</li>
	<li>海馬を取り除くために、頭体の梁の後部にメスの鈍い端を置き、体頭肉の後部から始まる「J」運動を使用して海馬をそっと転がします。海馬の角全体が「ビーン型」です。</li>
	<li>線条体(主にcaudate核が示されている)は、海馬の前部と海馬のちょうど下の灰色および白色物質縞の領域である。メスをベベルし、この領域を除去し、除去時に縞組織を明らかにする。</li>
	<li>内側前頭前野を除去するために、前頭回から脳梁に組織を解剖し、そのセクションの最も内側の部分を取り除く。右皮質は、内側前頭前野の除去後に残るべきである。</li>
	<li>視床を取り除くために、脳の中頭座面の中心にある球根のような構造を取り除き、中脳にrostralを取り除きます。視床は球形をしており、周囲の組織よりも少し暗く見えます。</li>
</ol>3. 解剖後
<ol><li>解剖が完了したら、その後の分析のために組織サンプルを適切に保存します。このステップを省略すると、わずか20分以内に大幅な自己分解と劣化が発生します。</li>
	<li>構造解析が行われる場合は解剖時に各脳領域をそのままにするか、組織をミンチして保存前に均質な組織サンプルを作成する。脳組織の一般的なサンプル保存方法には、架橋剤15を用いた凍結保存および化学固定が含まれる。</li>
	<li>標準的なラボアッセイ(例えば、遺伝子またはタンパク質発現)については、-80°Cで長期保存する前に遺伝物質を安定化させる液体窒素または溶液に浸し、便利で費用対効果の高い保存方法を提供します。</li>
	<li>組織構造を維持することが優先事項である場合、従来の固定法(例えば、アルデヒドベースの固定剤を使用して架橋タンパク質を使用する)を通じて脳組織を保存し、組織解剖前に目的の動物または臓器を灌流することなく、または灌流する。</li>
</ol>

<ol><li>Hughes, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swine+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Swine in cardiovascular research.</a> Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).</li>
<li>Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYen%2C+J+%22Biology+of+the+Domestic+Pig%22">Biology of the Domestic Pig</a>. , 31-63 (2001).</li>
<li>Pond, W. G. Of Pigs and People. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPond%2C+WG+%22Swine+Nutrition%22">Swine Nutrition</a>. , 3-24 (2001).</li>
<li>Odle, J., Lin, X., Jacobi, S. K., Kim, S. W., Stahl, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Suckling+Piglet+as+an+Agrimedical+Model+for+the+Study+of+Pediatric+Nutrition+and+Metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Animal+Biosciences%22%5BJournal%5D)">The Suckling Piglet as an Agrimedical Model for the Study of Pediatric Nutrition and Metabolism.</a> Annual Review of Animal Biosciences. 2 (1), 419-444 (2014).</li>
<li>Larsen, M. O., Rolin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+G%C3%B6ttingen+minipig+as+a+model+of+diabetes%2C+with+special+focus+on+type+1+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of the Göttingen minipig as a model of diabetes, with special focus on type 1 diabetes research.</a> ILAR Journal. 45 (3), 303-313 (2004).</li>
<li>Lehmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+minipig+in+general+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">The minipig in general toxicology.</a> Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 25, 59-62 (1998).</li>
<li>Richer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sacrococcygeal+and+transsacral+epidural+anesthesia+in+the+laboratory+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Radiologic+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Sacrococcygeal and transsacral epidural anesthesia in the laboratory pig.</a> Surgical Radiologic Anatomy. 20, 431-435 (1998).</li>
<li>Lind, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31 (5), 728-751 (2007).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt%5BTitle%5D)+AND+%22Early+Human+Development%22%5BJournal%5D)">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 311, 79-83 (1979).</li>
<li>Aurich, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microsurgical+training+model+with+nonliving+swine+head.+Alternative+for+neurosurgical+education%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Microsurgical training model with nonliving swine head. Alternative for neurosurgical education.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 29 (6), 405-409 (2014).</li>
<li>Bassi, T., Rohrs, E., Fernandez, K., Ornowska, M., Reynolds, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+brain+excision%3A+An+easier+method+to+harvest+the+pig%27s+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Interdisciplinary+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Direct brain excision: An easier method to harvest the pig's brain.</a> Interdisciplinary Neurosurgery. 14, 37-38 (2018).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+pig+CNS+for+histological+analysis%3A+A+manual+for+decapitation%2C+skull+opening%2C+and+brain+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Exposure of the pig CNS for histological analysis: A manual for decapitation, skull opening, and brain removal.</a> Journal of Visualized Experiments. 122, e55511(2017).</li>
<li>Pascalau, R., Szabo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibre+dissection+and+sectional+study+of+the+major+porcine+cerebral+white+matter+tracts%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomia%2C+Histologia%2C+Embryologia%22%5BJournal%5D)">Fibre dissection and sectional study of the major porcine cerebral white matter tracts.</a> Anatomia, Histologia, Embryologia. 46, 378-390 (2017).</li>
<li>McFadden, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion+fixation+in+brain+banking%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Perfusion fixation in brain banking: a systematic review.</a> Acta Neuropathologica Communications. 7, 146(2019).</li>
<li>Félix, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+atlas+of+the+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic atlas of the pig brain.</a> Brain Research Bulletin. 49, 1(1999).</li>
</ol>

著者らは、競合する財政的利益はないと宣言している。

本明細書に記載された技術は、約4週齢の豚のために設計された。特に、その後の生化学的アッセイを検討する場合、脳組織構造の完全性を維持するために、豚が人道的に安楽死させた直後にこれらのステップを実行することが重要である。最初に技術を学ぶときにアトラスまたはファイバー16 解剖ガイドを使用すると便利です。実験者は、データ収集のためのサンプルを取得する前に、いくつかの脳の抽出と解剖を練習することをお勧めします。最も困難なステップは、頭蓋骨の除去です。このステップは、頭蓋骨のどこに見て、いつ頭蓋骨が切り取られたかを知るために直接練習する必要が大きいため、経験が容易になります。この手順は、Bassi et al.12によって記述されたものと同様ですが、六角形の頭蓋ウィンドウを作成する必要はないが、技術を実行する方法の視覚的なチュートリアルを提供します。
この技術の限界は、古い豚と一緒に働くとき、年齢とともに著しく厚くなるので、頭蓋骨を取り除くのにより多くの時間がかかることである。鋸を使用すると、より...

豚は十分に文書化され、心血管系1、胃腸系2、栄養3、4、糖尿病5、毒物学6、および外科技術7の研究のための翻訳可能な動物モデルとして受け入れられています。PubMedが「豚の脳動物モデル」というキーワードを検索すると、1996年から2005年にかけて、前の10年の期間8よりも4倍多くの結果が得られ、現在はさらに多くの結果が得られるため、神経科学における豚の使用は増加し始めています。豚モデルの人気が拡大している主な理由は、人間と比較した場合の脳の成長、構造、機能の類似性によるものです。人間の脳と比較して、豚の脳は同様のジャイラルパターニング、血管化および灰色および白色物質の分布を示す9.また、ブタ脳は、神経イメージング手順、電位記録を誘発し、脳神経外科技術8,9を確立する際に用いられている。しかし、他の動物モデルとは異なり、豚と人間の経験は、出生前または出生後の成長スパートとは対照的に、周産期脳の成長が噴出する。出生時に、人間と豚の脳は、成人の脳体重の12%、成人体重の76%のアカゲザル脳と比較して、それぞれ成人の脳体重の約27%と25%の重さである。
豚が神経科学の動物モデルとしてゆっくりと採用されている理由の1つは、多くの研究者がこの文脈で動物に精通していないからです。研究者は、現場での潜在的な用途を認識していないか、そのようなモデルを使用するために必要な適切な技術を知らないかもしれません。生物医学的および前臨床モデルとしての豚の使用が注目を集め、神経科学で使用されるように、研究間のデータの正確な比較を確実にするために組織除去の標準化された手順を確立する必要があります。ブタの脳を含む解剖と外科技術は他の場所で公開されています11,12,13,豚の脳組織を収集するための簡単で標準化されたプロトコルの必要性があります, 特に生化学的アッセイで使用するため.そのため、このビデオの目的は、研究者が標準化された脳抽出と解剖を行うために必要な知識を提供することです。このビデオは、皮質と脳幹をそのまま維持しながら豚の脳を除去する1つの適切な技術を示し、その後、いくつかの主要な脳領域を解剖する方法を見直す。

<table><tbody><tr><td>#22 #4ハンドル用メスブレード</td><td>テッド・ペラ社</td><td>549-4S-22</td><td></td></tr><tr><td>11 1/2 "サタリーボーンソー</td><td>ライカバイオシステムズ</td><td>38DI13425</td><td></td></tr><tr><td>5 1/2 "チゼルエンド(ミートフック)付き頭蓋骨ブレーカー</td>ライ<td>カバイオシステムズ</td><td>38DI37636</td><td></td></tr><tr><td>5インチヘビーデューティワークショップベンチバイス</td><td>ポ</td><td>ニー29050</td><td></td></tr><tr><td>ブッチャーナイフ25cm</td><td>ビクトリノックス</td><td>5.7403.25</td>使用<td>前に研ぐ</td></tr><tr><td>CM40ライトデューティドロップ鍛造 C クランプ</td><td>ベッシー</td><td>00655BC3120</td><td></td></tr><tr><td>ダイヤモンド ホーン ナイフ シェイパー</td><td>シェフs Choice</td><td>436-3</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Stainless-Steel Scalpel Blade Handle #4</td><td>ThermoScientific</td><td>5334</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Forceps</td><td>Henry Schein</td><td>101-5132</td><td></td></tr><tr><td>ビニール解剖パッド</td><td>Carolina</td><td>629006</td><td></td></tr></tbody></table>

家畜豚脳の抽出と解剖

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

前臨床および翻訳可能な動物モデルとしての豚の使用は、心血管系、胃腸系、栄養を調査する研究分野で十分に文書化され、受け入れられ、豚は神経科学における大型動物モデルとしてますます使用されています。さらに、豚は人間に起こることと同様の脳の成長と発達パターンを表示するので、神経発達を研究するために受け入れられたモデルです。神経科学のあまり一般的でない動物モデルとして、豚の外科的および解剖手順は、研究者の間でそれほど身近またはよく実践されていないかもしれません。したがって、一貫した抽出および解剖方法を詳述する標準化された視覚プロトコルは、豚と協力する研究者にとって価値があることを証明するかもしれない。次のビデオは、皮質と脳幹をそのまま維持しながら豚の脳を取り除く技術を紹介し、脳幹、小脳、中脳、海馬、線条体、視床、内側前頭前野を含むいくつかの一般的に調査された脳領域を解剖する方法をレビューしています。このビデオの目的は、研究者に一貫して4週齢の豚の脳抽出と解剖を行うために必要なツールと知識を提供することです。

このセクションでは、4週齢の豚の脳の正しい抽出と解剖の後に得られた結果の例を説明します。 図1 は、解剖時のガイドとして使用する各脳領域の形状を概説する。脳幹の一部は、小脳の除去後に頭蓋骨に残ることがある(図1B)。これは、小脳の所望の領域を単離しながら除去することができる。 表1 は、解剖された脳領域(n=5)の平均重量(平均±平均の標準誤差)を示しています。
<img alt="脳の解剖学図;小脳、海馬を含む標識された脳領域。神経科学研究。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62030/62030fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> 図1:摘出...

このプロトコルは、神経科学で一般的に研究されているいくつかの脳領域の完全および解剖における豚の脳の除去のための技術を詳述する。

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

次のビデオは、豚の脳の除去と解剖のデモンストレーションです。手順の前または中にアトラス、または繊維解剖ガイドを参照すると役立つ場合があります。大きな肉屋のナイフは、アトラスと軸の間の1つのきれいなカットを可能にするので、切断に最適です。新しい被写体から始める前に、ナイフが鋭くなっていることを確認してください。肉フックは頭蓋骨を取り除くために使用されます。メスのハンドルのような長い細い用具は、頭蓋骨から脳を取り除くために使用される。頭蓋骨を切断しながら頭を固定するためにネジや突起を持つ悪徳が必要です。一旦動物が人道的に安楽死させられたら確立されたプロトコルに従って次のように進む。首のうなじのすぐ上、肩と頭の上の間を切ります。豚を確保し、切断中に道の外に年を移動します。メスを使って頭蓋骨から皮膚を切開します。頭の後部に続く頭蓋骨の真ん中に最初のカットを行います。2番目の横切りは、頭の後部にする必要があります。3番目のカットはまた、このスナッの後部から始まり、頭蓋骨への容易なアクセスを確保するために目でインラインになります。骨のこぎりを使用して、正中線に横切り後部に前部に作ります。カットの領域を鋸で軽くマークすることから始め、頭蓋骨からの抵抗が少なくなるまでソーイングを開始します。これは頭蓋骨の最も薄い部分を切断していることを確認するように切断しながら、中間線に向かってわずかに鋸をベベル。切り傷が耳に近すぎると、頭蓋骨を取り除くのが難しくなります。しかし、カットが正中線に近すぎる場合、開口部は脳を取り除くにはあまりにも小さくなります。この手順を垂直な辺で繰り返して、長方形の窓を作成します。窓の各コーナーが完全に切断されていることを確認し、頭蓋骨の一部を取り除き、下の脳を明らかにすることができます。次に、肉フックまたは湾曲した器具を使用して、長方形の頭蓋骨セクションを位置からこじります。まず、フックをコーナーの1つに入れ、圧力をかけて頭蓋骨を飛ばします。場合によっては、髄液は脳に残ります。そして、これが発生した場合は、慎重に鉗子と鈍いはさみを使用するか、または代わりに脳を切断することなく、髄液を除去するためにメス。参考のために、脳は髄膜層が除去される前後に次のように見えるべきである。頭の後部の筋肉と脂肪を切り抜き、小脳の暴露に備える。小脳を露出するには、頭蓋骨の後部に沿って2つの横断カットを行います。これらのカットを行うときは、露出した脳にカットしないように注意してください。.切り傷が作られたら、スナに片手を置き、頭蓋骨に片手を置き、後方の圧力を加え、頭蓋骨の後部を頭の残りの部分から引き離します。ここで強調されているように、小脳は残りの髄膜層の後ろに隠れています。メスハンドルのような鈍い器具の端を使用して、頭蓋骨から脳を慎重に分離し、その過程で脳を損傷しないように注意してください。頭をわずかに反転させて頭蓋骨から脳をなだめ、優しいスクープモーションを使用して頭蓋神経を切断し、脳を取り除きます。このプロセスは、脳と頭蓋腔間の残りのすべての接続を排除するために忍耐と練習を必要とします。豚の頭を反転すると、このプロセス中に役立ちます。脳を解放するために鈍い楽器でスイープモーションを使用し続けます。ここで強調されているように、小脳と脳幹は頭蓋骨腔に押し込まれるので取り除くのが難しいかもしれません。小脳や髄質、または脳幹を取り除くときに注意してください。頭蓋骨から完全に切り離された場合、脳は単独で脱落するはずです。頭蓋骨腔は、脳の除去後に示すように見えるはずです。脳領域解剖の準備のために、事前標識された容器が組織され、近接していることを確認してください。保存方法の例としては、液体窒素中の凍結サンプルをスナップするか、保存液に沈めます。頭蓋腔から抽出されると、脳全体は次のようになります。髄質または脳幹を取り除くために、小脳にコロナカット尾体を作る。小脳を取り除くために、皮質の後部にコロナカットを作ります。半球を分離するには、損傷を防ぐために連続的な動きを使用して、縦方向の裂け目に沿って中頭座を切断します。このビデオの目的のために、我々は右半球からの切除のみを示します。中脳を取り除くために、上司を探し、脳の後部に2つの隆起である劣ったコリカリ。これらの領域に腹側の脳組織の所望の量を削除します。.海馬の位置を取り除くために、脳梁の後部のメスのハンドルを取り除き、海馬をそっと転がします。海馬の角全体がビーンの形になります。海馬は、後部脳梁から始まるjモーションで指をすくい上げるとき、簡単にロールアウトする必要があります。線条体またはコーデート核を除去するために、コーパスカロサムの前部を取り除く。caudate核は、灰色と白で、コーパス梁のすぐ下に位置する縞模様または縞模様の領域です。メスハンドルの角度を角度付けすると、主に尾内核を含むこの領域を除去します。この組織を除去した後、あなたは脳領域が配置されていた線条パターンを見ることができるはずです.内側前頭前野を取り除くために、前頭回から、そのセクションの最も内側の部分を取る頸部の梁に組織を解剖する。右皮質は、内側前頭前野の除去後に残るべきである。視床を取り除くために、中座頭面の中心にある電球のような構造を取り除きます。視床は明らかな球形をしており、周囲の組織よりもわずかに暗く見えます。解剖組織サンプルの完了時に、特定の実験結果に基づいて適切に保存する必要があります。ここに示されているのは、若い豚と一緒に作業する際に予想される相対的な大きさと形状を含む解剖された脳領域です。これらの技術を習得すると、脳の抽出全体、解剖手順は被験者1人につき15分未満で、一貫した結果を生み出します。

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

我々は、神経内分泌機能と遅延の長期的、誇張された恐怖反応、PTSD患者の特性に永続的な変化を明らかにする心的外傷後ストレス障害（PTSD）のラットモデルを記述します。動物モデルとここで説明する方法は、機械論的であるが、末梢白血細胞におけるバイオマーカーと、患者で測定することができない脳核中のバイオマーカー、缶を相関させるために有用である。...

PTSDの、ニューラル血液学的および行動的相関関係を明らかにするための動物モデルにおけるバイオマーカー

このビデオは、ラットの子犬の脳から有機型の海馬スライス培養を準備する方法を示しています。海馬の解剖、スライス、および海馬スライスの細胞生存率と成長を促進し、最終的に器官型スライス培養を生成するために必要な培養条件に関与するステップを概説しています。...

ラットの子犬の海馬からの器官型スライス培養物の調製

このビデオは、海馬組織からのニューロスフェア形成とその拡大のプロセスを示しています。出生後のマウス歯状回組織由来の神経幹細胞と前駆細胞が増殖して一次ニューロスフェアを形成し、その後、再播種されて二次ニューロスフェアを形成します。...

海馬組織からのニューロスフェアの形成と拡大

麻酔誘発性発達神経毒性（AIDN）研究は、ヒトに広く適用されないげっ歯類に焦点を当てている。非ヒト霊長類モデルはより関連性が高いが、費用がかかり、実験に使用することは困難である。対照的に、仔ブタは、麻酔性神経毒性の研究に理想的な、臨床的に関連性のある実用的な動物モデルである。...

麻酔誘発性発達神経毒（AIDN）研究のための子豚モデルの使用：翻訳神経科学的アプローチ

本論文や教育ビデオの目標は、その後の肉眼および組織学的分析に適したそのままの状態で死後のブタの脳と下垂体を露出して削除する方法を説明することです。...

組織学的分析のための豚CNSの露出：斬首、スカルオープニングのためのマニュアル、および脳の取り外し

この記事では、哺乳類の皮質から接線方向の平坦化されたセクションを取得し、皮質モジュールによる組織化学的および免疫組織化学的方法を視覚化する詳細な方法について説明します。...

平坦化された哺乳類の皮質皮質モジュールの可視化

我々は、新鮮な脳組織からの離散領域のマウス脳除去および解剖のための実践的な、段階的、迅速なプロトコルを提示する。分子解析のために脳領域を取得することは、多くの神経科学研究室で日常的になっています。これらの脳領域は直ちに凍結され、システムレベルの解析のための高品質のトランスクリプトームデータが得られます。...

機能的および解剖学的に異なる領域へのマウス脳の微小解剖

この記事では、豚の水槽マグナに直接カニューレ移植のためのステップバイステップのプロトコルを提示します。<br...

豚のシスターナマグナにおける直接カニューレ移植

ここでは、ミニブタモデルにおける軟硬膜下電極アレイの長期的な性能と安全性を評価する方法を提示し、手術方法とツール、術後の磁気共鳴画像法、聴覚皮質の電気生理学、インプラントの電気化学的特性、および死後の免疫化学について説明します。...

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このプロトコルでは、生後3か月のデンマークランドレース豚に高速空気圧ドリルを使用して頭蓋切除術を行う方法について説明します。アクセスは前頭骨を介して行われ、腹側硬膜とその下にある大脳半球が明らかになります。この手順により、ブタの脳の大部分にアクセスできます。...

高速空気圧ドリル頭蓋切除術によるブタ脳へのアクセス

新生児の子豚に適用するために、冠状または矢状面を切断する拡張可能な脳マトリックスを構築する革新的な方法が記載されています。この予算に優しいアプローチは、アガロースゲル脳成形のテンプレートを使って彫刻したアクリル板を使用し、複数の種に適用でき、脳の成長に対応するための拡張を可能にします。...

発達段階を超えてカスタマイズ可能な拡張可能な脳マトリックスの製作

学ぶ家畜豚脳の摘出と解剖法。ヒトとの類似性から神経科学研究に有用な脳領域を正確に分離する技術を解説。適切な道具と手順で組織の損傷を防ぎ、教育や実験に活用できる標本を確保する方法を紹介します。

家畜豚脳の抽出と解剖

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