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DOI: 10.3791/62030-v
Stephen A. Fleming1, Supida Monaikul2, Austin T. Mudd1, Reeba Jacob3, Ryan N. Dilger1,2,3
1Neuroscience Program,University of Illinois at Urbana-Champaign, 2Department of Animal Sciences,University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Division of Nutritional Sciences,University of Illinois at Urbana-Champaign
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article outlines a protocol for the complete removal and dissection of the pig brain, focusing on commonly studied brain regions in neuroscience. It provides detailed steps to ensure accurate and humane methods for brain extraction and region-specific dissections.
このプロトコルは、神経科学で一般的に研究されているいくつかの脳領域の完全および解剖における豚の脳の除去のための技術を詳述する。
次のビデオは、豚の脳の除去と解剖のデモンストレーションです。手順の前または中にアトラス、または繊維解剖ガイドを参照すると役立つ場合があります。大きな肉屋のナイフは、アトラスと軸の間の1つのきれいなカットを可能にするので、切断に最適です。
新しい被写体から始める前に、ナイフが鋭くなっていることを確認してください。肉フックは頭蓋骨を取り除くために使用されます。メスのハンドルのような長い細い用具は、頭蓋骨から脳を取り除くために使用される。
頭蓋骨を切断しながら頭を固定するためにネジや突起を持つ悪徳が必要です。一旦動物が人道的に安楽死させられたら確立されたプロトコルに従って次のように進む。首のうなじのすぐ上、肩と頭の上の間を切ります。
豚を確保し、切断中に道の外に年を移動します。メスを使って頭蓋骨から皮膚を切開します。頭の後部に続く頭蓋骨の真ん中に最初のカットを行います。
2番目の横切りは、頭の後部にする必要があります。3番目のカットはまた、このスナッの後部から始まり、頭蓋骨への容易なアクセスを確保するために目でインラインになります。骨のこぎりを使用して、正中線に横切り後部に前部に作ります。
カットの領域を鋸で軽くマークすることから始め、頭蓋骨からの抵抗が少なくなるまでソーイングを開始します。これは頭蓋骨の最も薄い部分を切断していることを確認するように切断しながら、中間線に向かってわずかに鋸をベベル。切り傷が耳に近すぎると、頭蓋骨を取り除くのが難しくなります。
しかし、カットが正中線に近すぎる場合、開口部は脳を取り除くにはあまりにも小さくなります。この手順を垂直な辺で繰り返して、長方形の窓を作成します。窓の各コーナーが完全に切断されていることを確認し、頭蓋骨の一部を取り除き、下の脳を明らかにすることができます。
次に、肉フックまたは湾曲した器具を使用して、長方形の頭蓋骨セクションを位置からこじります。まず、フックをコーナーの1つに入れ、圧力をかけて頭蓋骨を飛ばします。場合によっては、髄液は脳に残ります。
そして、これが発生した場合は、慎重に鉗子と鈍いはさみを使用するか、または代わりに脳を切断することなく、髄液を除去するためにメス。参考のために、脳は髄膜層が除去される前後に次のように見えるべきである。頭の後部の筋肉と脂肪を切り抜き、小脳の暴露に備える。
小脳を露出するには、頭蓋骨の後部に沿って2つの横断カットを行います。これらのカットを行うときは、露出した脳にカットしないように注意してください。.切り傷が作られたら、スナに片手を置き、頭蓋骨に片手を置き、後方の圧力を加え、頭蓋骨の後部を頭の残りの部分から引き離します。
ここで強調されているように、小脳は残りの髄膜層の後ろに隠れています。メスハンドルのような鈍い器具の端を使用して、頭蓋骨から脳を慎重に分離し、その過程で脳を損傷しないように注意してください。頭をわずかに反転させて頭蓋骨から脳をなだめ、優しいスクープモーションを使用して頭蓋神経を切断し、脳を取り除きます。
このプロセスは、脳と頭蓋腔間の残りのすべての接続を排除するために忍耐と練習を必要とします。豚の頭を反転すると、このプロセス中に役立ちます。脳を解放するために鈍い楽器でスイープモーションを使用し続けます。
ここで強調されているように、小脳と脳幹は頭蓋骨腔に押し込まれるので取り除くのが難しいかもしれません。小脳や髄質、または脳幹を取り除くときに注意してください。頭蓋骨から完全に切り離された場合、脳は単独で脱落するはずです。
頭蓋骨腔は、脳の除去後に示すように見えるはずです。脳領域解剖の準備のために、事前標識された容器が組織され、近接していることを確認してください。保存方法の例としては、液体窒素中の凍結サンプルをスナップするか、保存液に沈めます。
頭蓋腔から抽出されると、脳全体は次のようになります。髄質または脳幹を取り除くために、小脳にコロナカット尾体を作る。小脳を取り除くために、皮質の後部にコロナカットを作ります。
半球を分離するには、損傷を防ぐために連続的な動きを使用して、縦方向の裂け目に沿って中頭座を切断します。このビデオの目的のために、我々は右半球からの切除のみを示します。中脳を取り除くために、上司を探し、脳の後部に2つの隆起である劣ったコリカリ。
これらの領域に腹側の脳組織の所望の量を削除します。.海馬の位置を取り除くために、脳梁の後部のメスのハンドルを取り除き、海馬をそっと転がします。海馬の角全体がビーンの形になります。
海馬は、後部脳梁から始まるjモーションで指をすくい上げるとき、簡単にロールアウトする必要があります。線条体またはコーデート核を除去するために、コーパスカロサムの前部を取り除く。caudate核は、灰色と白で、コーパス梁のすぐ下に位置する縞模様または縞模様の領域です。
メスハンドルの角度を角度付けすると、主に尾内核を含むこの領域を除去します。この組織を除去した後、あなたは脳領域が配置されていた線条パターンを見ることができるはずです.内側前頭前野を取り除くために、前頭回から、そのセクションの最も内側の部分を取る頸部の梁に組織を解剖する。
右皮質は、内側前頭前野の除去後に残るべきである。視床を取り除くために、中座頭面の中心にある電球のような構造を取り除きます。視床は明らかな球形をしており、周囲の組織よりもわずかに暗く見えます。
解剖組織サンプルの完了時に、特定の実験結果に基づいて適切に保存する必要があります。ここに示されているのは、若い豚と一緒に作業する際に予想される相対的な大きさと形状を含む解剖された脳領域です。これらの技術を習得すると、脳の抽出全体、解剖手順は被験者1人につき15分未満で、一貫した結果を生み出します。
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