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DOI: 10.3791/63338-v
Matheus H. Tempone1, Hercules R. Freitas2, Clarissa S. Schitine3, Ricardo A. de Melo Reis1
1Laboratory of Neurochemistry, Institute of Biophysics Carlos Chagas Filho,Universidade Federal do Rio de Janeiro, 2Laboratory of Neuroenergetics and Inborn Errors of Metabolism, Institute of Medical Biochemistry Leopoldo de Meis,Universidade Federal do Rio de Janeiro, 3Laboratory of Neurochemistry and Cell Biology, Institute of Life Sciences,Universidade Federal da Bahia
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study focuses on cell calcium imaging as a method to monitor cytosolic calcium concentration changes in live cells. Using a chicken retina culture, the work differentiates responses of neurons and glial cells to potassium chloride and ATP stimuli, highlighting the involvement of calcium dynamics in signaling processes.
細胞カルシウムイメージングは、ユニークな機能的シグネチャを与えるカルシウム透過性チャネル/受容体の発現に基づいて、培養中の混合集団、または覚醒した動物でさえも、個々の細胞の動的シグナル伝達を研究するための汎用性の高い方法論です。
この手順の全体的な目標は、塩化カリウムまたはATP刺激に基づいてニューロンまたはグリア応答を分化させるために、生細胞における細胞質ゾルカルシウム濃度の変化を監視することである。カルシウムは、神経伝達、可塑性、およびアポトーシスを含むいくつかの細胞プロセスに関与する重要なセカンドメッセンジャーである。Fura-2 AMなどの高選択的蛍光カルシウム色素の出現は、より優れた蛍光顕微鏡および計算方法の開発に関連して、生きた細胞および生物上のカルシウムシグナル伝達を画像化するために、高度の空間的および時間的分解能を有する高解像度光学データをもたらした。
このプロトコルは、富化ニューロン、精製グリア、または混合集団培養物に適応可能である。これは、塩化カリウムおよびATPに対する差動応答に基づいて、どの細胞型が決定的な刺激に応答したかを追跡する。塩化カリウムは細胞の膜電位を変化させます。
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