Name: 寄生性ガナスピス・ブラジリエンシスの飼育方法、侵襲性ショウジョウバエの有望な生物学的防除剤 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: 学ぶ、寄生性Ganaspis brasiliensisの飼育プロトコル。侵襲性Drosophila suzukiiを宿主とする生物学的防除剤の小規模・大規模飼育法を解説。最適な温度・湿度管理と効率的な繁殖技術を紹介する。

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著者らは、G1 G. brasiliensisを親切に提供してくれたLukas SeehausenとMarc Kenis(スイス、CABI)に感謝します。イタリアでは、イタリアのトレント州Provincia Autonoma di Trentoが、米国では、National Institute of Food and Agriculture、USDA Specialty Crops Research Initiative賞(#2020-5118-32140)、USDA Animal and Plant Health Inspection Service(Farm Bill、fund 14-8130-0463)、およびUSDA ARS CRIS 基本資金(Project 8010-22000-033-00D)によって資金提供されました。USDAは機会均等のプロバイダーおよび雇用主であり、この出版物に記載されている製品を推奨していません。

1. G3ガナスピス・ブラジリエンシスの小規模実験室飼育方法
<ol><li>ホストダイエットを準備します。<ol>
<li>1,500mLのガラス容器に蒸留水600mLを加え、ホットプレートで水を加熱する。</li>
		<li>市販の乾燥飼料(寒天、ブルワー酵母、コーンミール、メチルパラベン、およびスクロース製)を88.6g加えるか、Daltonらによって公表された式を使用して飼料を準備する28 (ステップ2.1.2を参照)。</li>
		<li>乾燥飼料に300mLの蒸留水を加え、食事混合物を完全にかき混ぜる。</li>
		<li>混合物を沸騰水に加える。</li>
		<li>ホットプレートの上の流動食を10分間沸騰させながら、定期的に混合物をかき混ぜて燃焼を防ぎます。</li>
		<li>食事を室温で30分間冷やしながら、時々かき混ぜて熱の放出を均等に分配し、食事が表面に固まるのを防ぎます。</li>
		<li>1 つの容器に 6.7 mL の 95% EtOH を、別の容器に 3.5 mL の 1 M プロピオン酸溶液を測定します。</li>
		<li>食事が冷えたら、EtOHを加え、次にプロピオン酸溶液を加え、各添加後に十分に攪拌する。</li>
		<li>ブルーベリー(地元の市場から購入)を冷水ですすぎ、次亜塩素酸ナトリウム漂白剤溶液(5%に希釈)に入れ、再度冷水で準備します。</li>
		<li>ペーパータオルで果物を乾かし、各果物の皮が壊れて果物のジュースと肉が露出するまで手動でマッシュアップします。</li>
		<li>25〜30gのマッシュブルーベリーを各250mLフラスコに加える。フラスコの側面をタップして、フラスコの内部の底部がマッシュブルーベリーの均一な層で覆われていることを確認します。</li>
		<li>準備した食事を各フラスコに注ぎ、マッシュブルーベリーの上部を覆うだけです。</li>
		<li>フラスコの首に泡栓を加え、室温で食事が固まるようにします(図1)。</li>
		<li>食事が固まったら、すぐに使用するか、5°Cで最大3週間保存してください。</li>
	</ol></li>
	<li>リアホスト ショウジョウバエスズキイ。
	<ol>
<li>保存した食事を冷蔵庫から取り出し、周囲の室温に平衡にするか、作りたての食事を使用してください。</li>
		<li>吸収性ペーパータオル(例:5 cm x 20 cm)を切り取り、中央にひねります。ペーパータオルのねじれた中央部分をフラスコに置きます(図1)。</li>
		<li>ペーパータオルと食事の表面を蒸留水で濡らして水分を保持します。</li>
		<li>性的に成熟した成体のハエを現在のコロニーフライフラスコから新しいダイエットフラスコに移すには、古いフラスコのストッパーを慎重に取り外し、フラスコを素早く反転させ、古いフラスコの開口部を新しいフラスコに合わせます。</li>
		<li>古いフラスコの側面を軽く叩いて、ハエが新しいフラスコに落ちるように誘導します。新しいフラスコに D. suzukii の〜25〜30組の交配ペアがあることを確認してください。新しいフラスコに十分なハエが入ったら、すぐに古いフラスコを直立させ、両方のフラスコのストッパーを交換します。</li>
		<li>古いフラスコにハエが残らなくなるまで、ハエの移動を繰り返します。必要に応じて、複数の古いフラスコから新しいフラスコにハエを結合または収集して、フラスコあたり十分なハエ(20〜30ペア)があることを確認します。</li>
		<li>ハエの出現のために、成虫のハエに1週間さらされた後、新しいフラスコを適切な条件(21°C、16L:8D光周期、60%〜80%相対湿度[RH%])の環境チャンバーに3週間保持する。</li>
	</ol></li>
	<li>宿主幼虫を寄生生物にさらす。<ol>
<li>フラスコから成虫のハエとねじれたペーパータオルを取り除いた後、ハエの卵と幼虫が入ったフラスコ(ステップ1.2.7を参照)を取ります。</li>
		<li>吸収性ペーパータオルを半分に折り、寄生幼虫の蛹化基質としてフラスコに入れます。</li>
		<li>G3 G.ブラジリエンシス の6組の女性と男性のペアを各フラスコに吸引する(図1)。泡栓の底に蜂蜜の薄い層を縞模様にします。</li>
		<li>寄生虫をフラスコに5日間放置する。</li>
		<li>5日間の曝露後、寄生虫を除去し、上記の条件下でフラスコを環境チャンバーに保持し、予想されるワタが出現するまで35日間保持する。</li>
	</ol></li>
	<li>大人の寄生虫を集めて保管する。<ol>
<li>インキュベーションの第2週目と第3週目の間に、毎週フラスコをチェックして宿主の早期出現を確認し、成体のハエを取り除きます。</li>
		<li>成虫の寄生生物が出現し始めたら、週に3回吸引し、ショウジョウバエのバイアル(例えば、2.5 cm x 9.5 cm)に保持します(図1)。</li>
		<li>バイアルの底に蒸留水で湿らせたが飽和していないペーパータオルの小さな部分を置きます。</li>
		<li>各バイアルに〜60個の寄生生物を追加し、出現日でバイアルにラベルを付けます。泡栓の底に蜂蜜の薄い層を週に2回縞模様にします。上記の条件下で成虫寄生虫を含むバイアルを環境室に保管し、早く使用しない場合は最大1ヶ月間保管してください。</li>
		<li>4〜7日に1回バイアルに紙を湿らせるか、カビの兆候がある場合はペーパータオルを交換してください。</li>
	</ol></li>
</ol>2. G1ガナスピス・ブラジリエンシスの大規模飼育方法
<ol><li>宿主ショウジョウバエ・スズキイの大規模飼育を実施する。
	<ol>
<li>後部鈴木 D. 鈴木 (D. suzukii ) は、それぞれ 1,500 ~ 2,000 匹の性的に成熟した成虫のハエ (性比 50:50) を含む、編み込まれたメッシュで覆われた大きなケージ (例: 50 cm x 50 cm x 100 cm) の中に収められています(図 2)。</li>
		<li>標準ショウジョウバエ培地(SDM)を、混合物を定期的に攪拌しながら、すべての成分(細菌学的寒天6g、コーンミール75g、栄養酵母17g、サッカロース15g、大豆粉10g、プロピオン酸10mL)を1Lの蒸留水で10分間沸騰させて調製する28。</li>
		<li>混合物を5分間冷やし、アスコルビン酸5gを加える。</li>
		<li>調理したてのSDMを9cmのペトリ皿に注ぎ、プレートを閉じる前に培地を室温で固化させます。</li>
		<li>SDMペトリ皿を積み重ね、アルミホイルで包み、4°Cで最大2週間保存します。</li>
		<li>各飼育ケージ内に、水に浸した綿のプレートとSDM付きのペトリ皿4~6個を置きます(図2)。</li>
		<li>週に2回、出没したSDMペトリ皿を新鮮なものと交換してください。</li>
		<li>ふたのないSDMペトリ皿をプラスチックカップ(直径13.3cmまたは800mL)に個別に置き、細かいメッシュ(<0.5mm)のカバーで各カップを閉じ、23°Cおよび75%RHで12〜15日間インキュベートします(図2)。</li>
		<li>新しく孵化した D.鈴木井 成虫をプラスチックカップから飼育ケージに移す。</li>
	</ol></li>
	<li>宿主幼虫を準備する。<ol>
<li>ブルーベリーを冷水で1分間すすぎ、漂白剤溶液(5%に希釈)で満たされた洗面器に果物を3分間浸します。</li>
		<li>漂白剤溶液を排水し、ブルーベリーをすすぐために冷たい水で洗面器を満たします。少なくとも30秒間手で優しく混ぜる。</li>
		<li>淡水でステップ2.2.2を少なくとも3回繰り返して、果物に存在する可能性のある漂白剤残渣および他の節足動物(ダニ、アザミウマなど)を除去する。</li>
		<li>果物を何層かの吸収性ペーパータオルでトレイの上に置き、トレイを前後に慎重に傾け、果実を転がして乾かします。</li>
		<li>いくつかの9cmのペトリ皿(上半分または下半分、上向き)を準備し、それぞれに洗浄されたブルーベリー(果物のサイズに応じてプレートあたり15〜25個の果物)を入れます。</li>
		<li>午後遅くに、ペトリ皿を宿主飼育ケージ内の性的に成熟した成虫のハエにさらし(ステップ2.1を参照)、一晩放置する。</li>
		<li>翌朝、ペトリ皿を宿主飼育ケージから取り出し、静かに吹き飛ばしたり叩いたりして果実のハエを取り除き、寄生生物の飼育に寄生した果実を使用します(ステップ2.4を参照)。</li>
	</ol></li>
	<li>大規模な寄生育種を実施する。<ol>
<li>寄生虫を後付けするために2種類のケージを使用してください:1つは寄生用、もう1つはワタの出現用です。</li>
		<li>寄生ケージが立方体(例えば、各辺45cm)であり、昆虫の活動を観察するための前面に透明なプラスチックパネル、昆虫の追加または除去および食品材料の交換のためのフロントパネルの2つの18cmスリーブ開口部、および換気のための上部および側面に細かいポリエステル網(例えば、96 x 26メッシュ)があることを確認する。</li>
		<li>出現ケージを小さくし(たとえば、各側面30 cm)、反対側の2つに単一のスリーブ開口部、前面に透明なプラスチックパネルを設置して視認性を高めます(図2)。</li>
		<li>両方のケージタイプに、1~数個のフィーダーを吊り下げるための天井の下に垂れ下がった細いひもがあることを確認します(図2)。 メモ:フィーダは、飛散した蜂蜜の液滴で覆われた大きな円筒形の泡ストッパー(直径9 cm)で構成され、ケージの床に置くか、ケージの天井から吊り下げることができます(図2)。</li>
		<li>各ケージ内で、RHに応じて5〜7日ごとにセルロースアセテートプラグ(直径2.5cm)で密封されたまっすぐな壁ショウジョウバエバイアル(2.5 cm x 9.5 cm)に水を供給します。バイアルをケージの天井から逆さまに吊り下げます(図2)。</li>
	</ol></li>
	<li>宿主幼虫を寄生生物にさらす。<ol>
<li>ペトリ皿内の宿主が蔓延した果実を、D. 鈴木井の一晩の侵入直後にG1 G. brasiliensisに曝露する(ステップ2.2.7参照)。</li>
		<li>1,500〜2,000匹のワタを含む寄生ケージに、蔓延した果物の10〜15個のペトリ皿を2〜3日間放置する。</li>
		<li>底に吸収紙を重ねたプラスチックカップ(直径13.3cmまたは800mL)を使用して、寄生した宿主を含む果実を回収します(図2)。</li>
		<li>開いたカップをエクロシオンケージに入れ、21°Cおよび65%RHで少なくとも28日間インキュベートします(図2)。</li>
		<li>インキュベーションの第2週目と第3週目の間に、ケージを毎週チェックして早期宿主のエクロシオンを確認し、寄生虫の連続的な収集を容易にするために成体のハエを除去する。</li>
		<li>インキュベーションの第4週の終わりに、フィーダーと水源をケージに追加します。</li>
	</ol></li>
	<li>大人の寄生剤を集めて保管する。<ol>
<li>寄生性の出現が始まったら、成人の一部(10%〜15%)を集めて寄生ケージに戻して、古い非生産的な個人を置き換えます。</li>
		<li>残りの寄生生物を集めてプラスチックカップ(直径13.3cmまたは800mL)に保管します(図3A)。</li>
		<li>カップの底に、水を満たし、歯科用コットンロール(1 cm x 3.8 cm)で密封したチューブ(2 mL)を置きます(図3A)。</li>
		<li>フィーダー基材として取り外し可能なフォームストッパー(直径3.5cm)と通気用のメッシュで覆われた穴を取り付けた修正された蓋でカップを閉じます(図3B)。</li>
		<li>各カップに最大700人の成人を加算し(性比50:50)、カップに出現日をラベル付けし、使用するまで、または最大1ヶ月間、環境チャンバー(17°C;65%RH)に保管します(図3B)。</li>
	</ol></li>
	<li>大人の寄生生物を出荷する。<ol>
<li>円錐形のチューブ(50mL)を使用して、成虫の寄生生物を出荷します。</li>
		<li>キャップに通気孔(直径8mm)をあけ、細かいメッシュネットで覆います(図3C)。</li>
		<li>キャップの内側にセルロースアセテート供給リングを追加します(図3C)。</li>
		<li>蒸留水を使用して飽和スクロース溶液を調製し、給餌リングに数滴を塗布し、液体を吸収させる。</li>
		<li>扇形の吸収性ペーパータオルをチューブ内に置きます(図3D)。</li>
		<li>各チューブに約200匹の大人の寄生生物を追加し、チューブをアイスパックと一緒に断熱された輸送コンテナに入れます。</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+%28Drosophila+suzukii%29%3A+a+global+perspective+and+future+priorities%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li>
<li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%3A+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li>
<li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Suárez, L., Ovruski, S. M. The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKirschbaum%2C+DS+%22Drosophila+suzukii+management%22">Drosophila suzukii management</a>. Garcia, F. R. M. , Springer. Cham. 41-92 (2020).</li>
<li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22CAB+Reviews%22%5BJournal%5D)">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054(2020).</li>
<li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%3A+Current+and+pending+tactics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Integreated+Pest+Management%22%5BJournal%5D)">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13(2019).</li>
<li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A. Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWang%2C+XG+%22Drosophilia+suzukii+management%22">Drosophilia suzukii management</a>. Garcia, F. R. M. , Springer. Cham. 143-167 (2020).</li>
<li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li>
<li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li>
<li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839(2018).</li>
<li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii%2C+a+relative+of+D.+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721(2012).</li>
<li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+%28Ihering%2C+1905%29%2C+new+combination+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29%2C+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+%28Matsumura%2C+1931%29%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Procedings+of+the+Entomoogical+Society+of+Washington%22%5BJournal%5D)">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li>
<li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+%28Hymenoptera%3A+Braconidae%29towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Behavior%22%5BJournal%5D)">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li>
<li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species%3A+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li>
<li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li>
<li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li>
<li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li>
<li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila%2C+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Generalis%22%5BJournal%5D)">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li>
<li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000(2019).</li>
<li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li>
<li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li>
<li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li>
<li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096(2020).</li>
<li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29+from+East+and+Southeast+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li>
<li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecological%2C+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29+attacking+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li>
<li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo%2C+central+Japan%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li>
<li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+records+of+Leptopilina%2C+Ganaspis%2C+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America%2C+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hymenoptera+Research%22%5BJournal%5D)">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li>
<li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611(2020).</li>
<li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Managagement+Science%22%5BJournal%5D)">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li>
</ol>

著者らは、開示すべき利益相反はありません。

生物学的防除剤の長期研究およびその後のフィールドリリースは、効果的で経済的な飼育技術の利用可能性に依存する。この研究で記載された方法は、 Ganaspis brasiliensisの小規模および大規模飼育の両方のための効率的なプロトコルであることが証明されています。小規模飼育プロトコルは、労働量を最適化し、寄生生物コロニーと宿主コロニーを同時に維持するために必要な特殊機器を減らすために、数年間にわたって開発されました。実験室での研究やバイオアッセイのためのコロニーを維持するのに適しています。同様の方法が、この寄生生物の検疫評価のためにこの寄生剤を後付けするために著者らによって使用されている。大規模な飼育プロトコルは、最近イタリアで行われたように、野外放出のために多数のワタを生産することを可能にする。これらの技術は、近い将来に大規模な飼育のために他の研究所、生産者、または企業に簡単に移転することができ、方法論のさらなる改善の基礎として機能します。
Ganaspis brasiliensisとL. japonica...

東アジア原産の、斑点を付けられた翼のショウジョウバエ、ショウジョウバエ鈴木井(松村)(双翅目:ショウジョウバエ科)は、アメリカ大陸、ヨーロッパ、アフリカの一部に広く定着している1,2。ハエは非常に多食性であり、その原産地および侵入地域で柔らかく薄い皮を持つ様々な栽培および野生の果実を利用することができる1,2,3。この害虫の現在の管理戦略は、影響を受けやすい果実が熟しているときに作物畑の成虫のハエを標的とする殺虫剤の頻繁な使用に大きく依存している。繰り返しスプレーがしばしば使用されるが、これはおそらく、非作物生息地からの貯水池ハエ個体群の一貫した波及効果および侵入地域に居住する有効な天敵の欠如によるものである1,4。生物学的防除は、特に自己永続性の特殊な寄生生物による、景観レベルでのハエの個体群を抑制するのに役立ち、この非常に移動性および多食性の害虫の持続可能な地域全体の管理に重要な役割を果たす可能性がある4,5,6。
過去10年間、研究者は、東アジアのハエの原産地7,8,9でショウジョウバエの共進化した寄生生物と、南北アメリカとヨーロッパのハエの侵略地域で効果的だが新しく関連する寄生生物を発見するための努力に焦点を当ててきました4,5,6。ハエの新しく侵入した地域では、アソバラc.f.タビダ(Nees)(膜翅目:Braconidae)、Leptopilina boulardi(Barbotin et al)、L. heterotoma(Thompson)(膜翅目:Figitidae)などの一般的に発生する幼虫ショウジョウバエ寄生生物は、ハエの強い免疫抵抗のためにD. suzukiiから発達したり、寄生レベルが低いりすることができない10。北米およびヨーロッパのパキクレポイデウス・ヴィンデミア(ロンダニ)(膜翅目:Pteromalidae)およびトリコプリア・ショドジョウバエ(パーキンス)(膜翅目:Diapriidae)および南米のトリコプリア・アナストレファエ・リマ(Trichopria anastrephae Lima)のようないくつかのコスモポリタンでジェネラリストの蛹寄生虫のみがこのハエから容易に発達することができる4。対照的に、東アジアの探査では、D. suzukii 4,5,6から多くの幼虫寄生生物が発見されている。その中で、Asobara japonica Belokobylskij、Ganaspis brasiliensis Ihering、およびLeptopilina japonica Novković & Kimuraは、優勢な幼虫寄生虫である7,8,9,11。特に、2つのフィジティッド(L. japonicaとG. brasiliensis)は、D. suzukiiおよび/または他の密接に関連したショウジョウバエが自然植生で寄生する新鮮な果物に主に見られる主要な寄生生物であった7,8,9。これら3種のアジアの幼虫寄生虫を米国と欧州の検疫施設に輸入し、その相対効率12、13、14、15、16、17、気候適応性18、潜在的な種間競合相互作用19、そして最も重要なことに、宿主特異性8,20,21について評価した。、22。
検疫評価では、Ganaspis brasiliensisは他の試験済みのアジアの幼虫寄生虫よりもショウジョウバエの鈴木井に宿主特異的であることが示されたが、宿主特異性が異なる異なるバイオタイプまたは謎の種からなる可能性が高い8,21,22,23,24。Nomano et al.22は、ミトコンドリアシトクロムオキシダーゼI遺伝子断片の分子解析に基づいて、異なる地理的領域からのGanaspis個体を5つの遺伝子群(G1-G5と命名)にグループ化した。G2およびG4グループは、南アジアのいくつかの熱帯地域からのみ報告され、G5グループは、未知の宿主(バフィントン、個人観測)からアジアおよび他の地域(例えば、アルゼンチン、ブラジル、ハワイ、メキシコ)から報告された。韓国7、中国8、日本9、23、25でD. suzukiiが寄生した野生の果物の野外コレクションは、G1単独またはグループG1とG3を表す標本の混合物を発見しました。この2つのグループは交感神経のようで、D. suzukiiや他の近縁の宿主ハエが生息する同じ宿主植物に共存している。それにもかかわらず、2つのグループ間ではいくつかの違いが観察されており、G1はG3よりもD. suzukiiに対する宿主または宿主の生息地特異性が高いように見えるが、検疫試験では多くの近縁種を攻撃している21,22。さらに詳細な分子分析は、特にG1およびG3群の種の状態を決定するのに役立つ可能性がある。この研究は、それらをG1 G.ブラジリエンシスおよびG3 G.ブラジリエンシスと呼ぶ。いくつかの初期の研究では、G1 G. brasiliensisをGと名付けた。 ブラジリエンシス14,21,22参照。G1 G. brasiliensisは最近、米国とイタリアでD. suzukiiに対してフィールドリリースが承認されました(他のいくつかのヨーロッパ諸国も現在その導入を検討しています)、G3 G. brasiliensisは近い将来にフィールドリリースが検討される可能性があります。最近の調査では、カナダのブリティッシュコロンビア州(カナダ26)と米国のワシントン州(Beers et al., unpublished data)のL. japonicaとG1 G. brasiliensisの両方の冒険的な集団と、イタリアのトレント州での冒険的なL. japonicaの個体群27も発見されました。
ショウジョウバエの鈴木井管理のための生物学的防除プログラムの開発への大きな関心と、ガナスピス・ブラジリエンシスの冒険的かつ意図的な導入の実質的な生物学的防除の可能性を考えると、将来の長期研究および/または野外放出のために、この幼虫寄生生物の効率的な飼育方法を開発する必要がある。このプロトコルと関連するビデオ記事では、この寄生生物の2つの飼育方法のセットを説明しています:(1)ホストフルーツ(ブルーベリー)とD. suzukiiの培養のための人工食の混合物を使用したフラスコでの小規模実験室飼育。この方法は、もともと昆明、中国8から収集されたG3材料を使用して開発されました。(2)D.すずきの培養に宿主果実(ブルーベリー)を用いた大型ケージでの野外放流のための大量飼育。大規模飼育に使用された遺伝子群は、東京、日本9,22で生まれたG1株でした。両方のグループにバイアルや小さな容器を使用するなど、飼育方法の他のスケールについても簡単に説明します。

<table><tbody><tr><td>活性ドライイースト</td><td>Fleischmanns酵母、シンシナティ、オハイオ州、米国</td><td>なし</td><td>カビの成長を減らし、ハエへのフルイの魅力を高めるために果物を覆うために使用されます</td></tr><tr><td>細菌学的寒天</td><td>Merk Life Science S.r.l.、ミラノ、イタリア</td><td>A1296 - 5KG</td><td>標準ショウジョウバエ中型</td></tr><tr><td>漂白剤溶液</td><td>クロロックス社、オークランド、カリフォルニア州、米国</td><td>なし</td><td>果肉果実</td></tr><tr><td>の消毒に使用されますブルーストッパー</td><td>Azer Scientific, Morgantown, PA, USA</td><td>ES3837</td><td>昆虫の換気を可能にしながらチューブを密封するために使用</td></tr><tr><td>Blueberries</td><td>Grocery Store, Newark, DE, USA</td><td>なし</td><td>ハエの宿主果実として提供(他の様々な果物も使用可能)</td></tr><tr><td>BugDorm 昆虫飼育ケージ (W24.5 x D24.5 x H63.0 cm)</td><td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td><td>4E3030</td><td>寄生虫の飼育に使用(寄生ケージ)</td></tr><tr><td>BugDorm 昆虫飼育ケージ(W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td><td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Taiwan</td><td>4E4590</td><td>ハエの飼育に使用</td></tr><tr><td>BugDorm 昆虫飼育ケージ (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td>Mega <td>View Science Co. Ltd., 台中, 台湾</td><td>4E4545</td><td>寄生虫の飼育に使用(卵形ケージ)</td></tr><tr><td>金網(0.64 cm, 19ゲージ)</td><td>エバービルト、オハイオ州、米国</td><td>308231EB</td><td>最大の寄生虫産卵を可能にするために果物を持ち上げるために使用</td></tr><tr><td>コーンミール</td><td>食料品店、トレント、テネシー州、イタリア</td><td>なし</td><td>標準ショウジョウバエミディアム</td></tr><tr><td>デンタルコットンロール(1 x 3.8 cm)</td><td>Gima S.p.A.、Gessate、MI、イタリア</td><td>35000</td><td>貯蔵容器内の寄生虫に水を供給するために使用されます</td></tr> ショ<tr><td>ウジョウバエダイエット</td><td>フロンティアサイエンティフィック、ニューアーク、デラウェア</td><td>、米国TF1003</td><td>ショ</td></tr><tr><td>ウジョウバエのバイアルナロー、ポリスチレン(2.5 x 9.5 cm)</td><td>VWR International、LLC.、Radnor、PA、US</td><td>75813-160</td>ケージ<td>内の寄生虫に水を供給するために使用されます</td></tr><tr><td>ショウジョウバエバイアルプラグ、酢酸セルロース(2.5 cm)</td><td>VWR International、LLC.、Radnor、PA、US</td><td>89168-886</td>ケージ<td>内の寄生虫に水を供給するために使用されます</td></tr><tr><td>三角フラスコ(250mL)</td><td>Carolina Biological, Burlington, NC, USA</td><td>731029</td><td>ハエや寄生虫の飼育に使用</td></tr><tr><td>ファルコン型遠心チューブ(50mL)</td><td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td><td>VWRI525-0611</td><td>成虫の寄生虫を出荷するように改造</td></tr><tr><td>泡止め</td><td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, USA</td><td>L800-C</td><td>昆虫の換気を可能にしながらフラスコを密封するために使用</td></tr><tr><td>ハニー</td><td>食料品店、ニューアーク、デラウェア</td>州<td>、米国 なし</td><td>寄生虫の食品として提供</td></tr><tr><td>Identi-Plug プラスチックフォームストッパー</td><td>フィッシャーサイエンティフィックカンパニーLLC、ピッツバーグ、ペンシルベニア州、US</td><td>14-127-40E</td><td>寄生虫のフィーダーとして使用され、保管容器を密封するために使用されます</td></tr><tr><td>工業用ペーパータオル</td><td>食料品店、ニューアーク、デラウェア</td>州、米国 <td>なし</td><td>蛹の蛹化基質として提供され、水分が軽減されました</td></tr><tr><td>ミクロンメッシュ生地(250 mL)</td><td>工業用ネット、メープルグローブ、ミネソタ州、米国</td><td>WN0250-72</td><td>昆虫の換気蓋を作るために使用</td></tr><tr><td>栄養酵母(フレーク)</td><td>食料品店、トレント、テネシー州、イタリア</td><td>なし</td><td>標準ショウジョウバエミディアムペーパー</td></tr><tr><td>コースター(10.2 cm)</td>の準備に使用 ホ<td>フマスター、ウィスコンシン州、米国</td><td>35NG26</td><td>ハエと寄生した蛹</td></tr><tr><td>の蛹化基質として移植プラスチックカップ (&Oslash; 13.3 cm, 800 mL)</td><td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td><td>Unipak 5134</td><td>成虫の寄生虫を保存するように変更</td></tr><tr><td>プラスチックの蓋 (&Oslash; 13.3 cm)</td><td>Berry Superfos, Taastrup, Denmark</td><td>PP 2830</td><td>成虫の寄生虫を保存するように変更</td></tr><tr><td>Propionic acid</td><td>Merk Life Science S.r.l., Milan, Italy</td><td>P1386 - 1L</td><td>スタンダードショウジョウバエミディアム</td></tr><tr><td>サッカロースの</td><td>調製に使用食料品店、トレント、テネシー州、イタリア</td><td>なし</td><td>標準ショウジョウバエ中型</td></tr>スープカップ(蓋付き)の準備に使用<tr><td>(475 mL)</td><td>StackMan、ベトナム</td><td>DC1648</td><td>寄生した幼虫が蛹になるのに使用</td></tr><tr><td>大豆粉</td><td>食料品店、トレント、テネシー州、イタリア</td><td>なし</td><td>標準ショウジョウバエミディアム</td></tr>ホワイト<tr><td>フェルトワッシャー(厚さ0.64 cm、内径5 mm x 外径20 mm)</td>の調製に使用 <td>Quiklok、 リンカーン、ニューハンプシャー州、米国</td><td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td><td>寄生虫の供給リングとして使用</td></tr></tbody></table>

寄生性ガナスピス・ブラジリエンシスの飼育方法、侵襲性ショウジョウバエの有望な生物学的防除剤

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

東アジア原産のスポッティングされた翼のショウジョウバエ、 ショウジョウバエの鈴木井 (松村)(双翅目:ショウジョウバエ)は、過去10年間にアメリカ大陸、ヨーロッパ、アフリカの一部に広く定着し、侵略地域でさまざまな柔らかい皮の果物の壊滅的な害虫となっています。生物学的防除は、特に自己永続性および特殊な寄生生物による、この非常に移動性の高い多食性害虫の持続可能な地域全体の管理のための実行可能な選択肢であると期待されている。 ガナスピス・ブラジリエンシス Ihering(膜翅目:Figitidae)は、東アジアに広く分布している幼虫寄生生物であり、 D. suzukiiの最も効果的な寄生生物の1つであることがわかっている。
その有効性と潜在的な非標的リスクの厳格な導入前評価の後、この種のより宿主特異的な遺伝子群の1つ(G1 G. brasiliensis)が最近、米国およびイタリアでの導入および野外放出のために承認されました。東アジアでD. suzukiiを攻撃するために一般的に見出された別の遺伝子群(G3 G. brasiliensis)は、近い将来に導入が検討されるかもしれない。現在、G. brasiliensisを研究のために飼育したり、D. suzukiiに対する野外リリースのために大量生産したりすることに大きな関心が寄せられています。このプロトコルと関連するビデオ記事では、研究のための小規模と大量生産とフィールドリリースのための大規模の両方で、この寄生虫の効果的な飼育方法について説明しています。これらの方法は、この世界的な侵略的害虫の有望な生物学的防除剤としてのこのアジア原産の寄生生物のさらなる長期研究および使用に利益をもたらす可能性がある。

図4は、USDA-ARS有益な昆虫導入ユニット(デラウェア州ニューアーク)の検疫施設で、2つの異なる寄生密度(6または10ペア)と2つの異なる曝露時間(5または10日)を使用して、G3 Ganaspis brasiliensisの小規模実験室飼育の代表的な結果を示しています。寄生生物密度とばく露時間の組み合わせごとに14回の反復があった。合計で、64フラスコは4,018匹のワタ(フラスコあたり71.7±4.9匹の子孫)を産み、49.5%±1.9%の雌の子孫であった。21°Cで、成虫寄生虫は産卵後約30〜35日で出現した。寄生生物密度および曝露時間は、反復(フラスコ)当たりに産生される子孫の総数に有意に影響を及ぼさず(一元配置分散分析、F3,52 = 0.379、P = 0.769)、雌の子孫の割合にわずかな影響しか及ぼさなかった(一元配置分散分析、変動を安定化するために必要に応じて分析前にロジット変換されたデータ、F3,52 = 2.796、 ...

ショウジョウバエの幼虫寄生生物であるGanaspis brasiliensis(世界的な侵略的な果樹害虫)は、この害虫の生物学的防除のために承認されているか、またはヨーロッパおよび米国への導入が検討されています。この記事では、この寄生生物の小規模および大規模飼育の両方のプロトコルを提供します。

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

バイオコントロール剤の長期的な研究と使用は、効果的で経済的な飼育技術の利用可能性に依存しており、このプロトコルはこの寄生虫を飼育するのに効率的であることが証明されています。現在、研究や野外放出のためにこの寄生生物を飼育することに大きな関心が寄せられており、このプロトコルは、この有望なバイオコントロール剤の将来の長期的な研究と使用に利益をもたらすでしょう。最初のユーザーは、記事で提供されている関連する参考文献と方法のいくつかの実践を読むことによって、関連する昆虫のいくつかの基本的な生物学を理解する必要があるかもしれません。宿主食を作製するために、まず、原稿に記載されているように食餌の液体部分を準備する。次に、空の250ミリリットルのフラスコに25〜30グラムのマッシュブルーベリーを加えます。次に、マッシュブルーベリーの上部を覆うだけの液体でフラスコに液体を注ぎます。次に、宿主のショウジョウバエの鈴木を育てるために、まず吸収性ペーパータオルを切って中央にひねります。次に、ペーパータオルのねじれた中央部分をダイエットフラスコに入れます。水分を保持するために、蒸留水を使用してペーパータオルと食事を濡らします。次に、性的に成熟した成体のハエを移すには、ハエコロニーフラスコのストッパーを慎重に取り外し、ダイエットフラスコに反転させます。この暴露の1週間後、ハエの出現のためにハエを環境室に3週間保持する。宿主幼虫を寄生生物にさらすには、まずフラスコから成虫のハエとペーパータオルを取り出し、ハエの卵と幼虫を残します。幼虫の蛹化基質として機能するには、新しい吸収性ペーパータオルを折り畳んでフラスコに挿入します。次に、寄生生物G3 Ganaspis brasiliensisの6つの女性と男性のペアをフラスコに吸引し、泡栓の底に蜂蜜の薄い層を縞模様にします。寄生生物を収集して保存するために、5日後に成虫を除去する。その後、フラスコを前述の条件下で35日間環境室に保管する。成虫のワタの出現により、週に3回吸引する。ワタを保持するには、まず、2.5×9.5平方センチメートルのショウジョウバエバイアルの底に、湿らせたが蒸留水で飽和していないペーパータオルを置く。次に、約60匹のワタをバイアルに移し、出現日をマークします。バイアルを環境チャンバーに保管してください。週に2回、バイアルの泡栓の底に蜂蜜の薄い層を縞模様にします。まず、ショウジョウバエの大規模な飼育を手配し、1,500〜2,000匹の性的に成熟した成体のハエを50:50の性比で大きな編み物で覆われたケージに入れます。次に、水に浸した綿と標準的なショウジョウバエ培地を含む4〜6個のペトリ皿を入れたプレートをケージに入れます。毎週2回、露出したペトリ皿を新鮮なものと交換してください。蓋のないペトリ皿を800ミリリットルのプラスチックカップに入れ、細かいメッシュでカップを覆います。その後、カップを摂氏23度、相対湿度75%で12〜15日間インキュベートします。孵化後、新たに孵化した成体のショウジョウバエ鈴木を飼育ケージに移す。次に、ブルーベリーを冷水で1分間すすぎ、5%に希釈した洗面器に果物を3分間浸して、宿主幼虫の準備を開始します。その後、9センチメートルのペトリ皿に洗ったブルーベリーを入れます。午後遅くに、ペトリ皿を飼育ケージに入れ、一晩放置します。翌朝、ペトリ皿を優しく叩いて果物からハエを取り除き、飼育ケージから果物を取り除きます。その間、寄生性G1 Ganaspis brasiliensisのための寄生ケージとワタ出現ケージを準備します。両方のケージには、1つ以上のフィーダーを吊り下げるための天井の下に細いひもが必要です。各ケージに、水を入れたショウジョウバエのバイアルを吊り下げ、相対湿度に応じて5〜7日ごとにセルロースアセテートプラグを天井から逆さまにして密封します。ショウジョウバエの鈴木ケージから出没したブルーベリーを取り出した直後に、1,500〜2,000匹のGanaspis brasiliensisワタを2〜3日間寄生ケージに入れます。次に、底に吸収紙が入った800ミリリットルのプラスチックカップに果物を集めます。開いたカップを出現ケージまたはエクロシオンケージで摂氏21度、相対湿度65%で少なくとも28日間インキュベートします。インキュベーションの第2週目および第3週目の間に、ケージを毎週チェックして、宿主の早期侵食がないか確認する。連続した寄生生物の収集を容易にするために、成虫のハエを除去する。インキュベーションの第4週の終わりに、ケージにフィーダーと水源を提供する。成虫のワタの約10〜15%を収集し、それらを寄生ケージに移して、古くて非生産的なワタを交換します。エクロシオンケージの残りのワタから、水で満たされた2ミリリットルのチューブを含む800ミリリットルのプラスチックカップで、50:50の性比で最大700人の成人を保管し、カップの底に歯科用コットンロールで密封します。顕著な出現状態のカップを環境室に最大1ヶ月間保管してください。寄生生物を出荷するには、約200人の成人を50ミリリットルの円錐形チューブに入れます。次に、すべてのチューブをアイスパックと一緒に断熱輸送コンテナに入れます。このプロトコルは、実験室での農業害虫ショウジョウバエ鈴木に対する寄生剤であるG3 Ganaspis brasiliensisの小規模飼育に成功しました。子孫の生産は、寄生生物密度および曝露時間の違いによって影響を受けなかった。G1 Ganaspis brasiliensisの大規模生成も達成することができ、宿主ショウジョウバエ鈴木への最初の曝露から5週間後に生産が開始された。8週目から22週目まで、寄生生物の生産は、それらにさらされた果物の量に比例した。適切な飼育温度を維持し、湿度を制御し、常に成虫の昆虫に食物を提供することは非常に重要です。この方法は、宿主および寄生生物の飼育密度を最適化してワタの繁殖を最大化し、この寄生生物を代替宿主で飼育する可能性を探ることによって、さらに改善することができる。

methods-for-rearing-parasitoid-ganaspis-brasiliensis-promising

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

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