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DOI: 10.3791/64765-v
Sarah R. Ocañas*1,2,3, José V. V. Isola*1,3, Tatiana D. Saccon1, Kevin D. Pham2, Ana J. Chucair-Elliott2, Augusto Schneider4, Willard M. Freeman2,3, Michael B. Stout1,3
1Aging and Metabolism Research Program,Oklahoma Medical Research Foundation, 2Genes & Human Disease Research Program,Oklahoma Medical Research Foundation, 3Oklahoma City Veterans Affairs Medical Center, 4Nutrition College,Federal University of Pelotas
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study optimizes the translating ribosome affinity purification (TRAP) and isolation of nuclei tagged in specific cell types (INTACT) methods for paired interrogation of the ovarian transcriptome and epigenome in a mouse model. The approach enables analysis of specific ovarian cell populations without cell sorting, facilitating insights into cell type-specific changes associated with aging.
このプロトコルでは、翻訳リボソームアフィニティー精製(TRAP)法と特定の細胞タイプでタグ付けされた核の単離(INTACT)法が、Cyp17a1-Creマウス系統に交配されたNuTRAPマウスモデルを使用して、細胞特異的卵巣トランスクリプトームとエピゲノムのペアインプロゲーション用に最適化されました。
この方法は、細胞ソーティングを必要とせずに、同じマウスの特定の卵巣細胞集団から核酸を単離する技術を提供します。この手法は、特定の細胞集団がさまざまな条件下でどのように変化しているかを特定するのに役立ちます。たとえば、加齢とともに。
この技術の主な利点は、細胞選別を必要とせずに、特定の卵巣細胞型からのエピゲノム解析とトランスクリプトーム解析のペアを可能にすることです。これにより、スループットが大幅に向上し、コストが削減され、卵巣組織から細胞種特異的分析を実行する際に特殊な機器が不要になります。ここでの目標は、生殖老化前の卵巣老化に伴って起こる細胞型特異的変化を特定することであり、これは女性の不妊症の治療に影響を及ぼします。
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