Name: DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボロームで同定された代謝物の可視化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-16T14:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: 学ぶ DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボローム解析法。Salvia miltiorrhizaの根と葉を用いた試料調製とイメージング技術により、植物の代謝物分布と環境ストレス応答を可視化する革新的アプローチです。

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この研究は、四川省自然科学財団(第2022NSFSC0171号)および成都TCM大学の興林人材プログラム(第030058042号)の支援を受けました。

1. サンプル調製
<ol><li>2年生の サルビアミルティオルリザ 植物(図1A)からきれいにした根と葉を集め、手で約3〜5 mmの断面の厚さで直接スライスします。次に、両面テープを使用してサンプルを接着顕微鏡スライドガラス上に貼り付けます(図1B)。 注意: 両面テープのサイズがサンプルよりも大きいことを確認してください。ティッシュが乾燥している場合は、スライスする前に水または4%パラホルムアルデヒドに一晩浸します。</li>
	<li>別の顕微鏡スライドガラスをサンプルの上に置き、2つのスライドガラスをサンドイッチのようなシーリングフィルムで包みます(図1C)。サンドイッチサンプルを-80°Cで少なくとも4時間凍結し、次に次の設定パラメータを使用して2時間空気真空にさらします(図1D):トラップ温度は-75〜-82°C、真空計は2.5〜3.7Paです。 注意: サンプルの表面を無傷に保つために、シーリングフィルムを包むときは、2つのスライドガラスが平行であることを確認してください。植物組織の水分含有量が高い場合は、空気真空の時間を3時間に延長します。5時間を超えないでください、そうでなければ組織は容易に骨折します。</li>
	<li>サンドイッチサンプルは、分析されるまで-80°Cで保存します。サンプル表面の結露を避けるために、デシケーターでサンプルを室温に戻します。次に、サンプルをマトリックスアプリケーションにかけます。</li>
</ol>2. 脱離エレクトロスプレーイオン化(DESI)装置の設置
<ol><li>検出器のセットアップと機器の質量校正をESIモードで実装します。水-アセトニトリル(1:1 v / v)溶液中のロイシンエンケファリン(LE)を使用して検出器のセットアップを実行し、水-イソプロパノール(1:1 v / v)溶液中のギ酸ナトリウム(NaFA)を使用して質量校正を実行します。</li>
	<li>ESIソースを取り出し、DESIユニットを質量分析計に取り付けます。N2 ガス供給をDESIユニットに接続し、ガス圧力を約0.5MPaに調整します(図2A)。ソースを交換するときに機器をベントする必要はありません。</li>
	<li>5 mLシリンジに水-メタノール(1:9 v/v)溶液中のLEとギ酸を満たし、シリンジを高性能シリンジポンプに取り付けて、サンプル中の化学物質をイオン化するための溶媒を供給します(図2B)。</li>
	<li>シリンジとDESI噴霧器に毛細管を提供する溶媒を取り付けます(図2C)。溶媒供給キャピラリーは、標準的な内径75μm、外径375μmのキャピラリーです。それはかなり狭く、不純物によって簡単にブロックされるため、スキャンプロセスで使用される溶媒はMSグレードであり、閉塞のリスクを減らすために使用前にろ過する必要があります。</li>
	<li>シリンジポンプを始動し、注入速度を2 μL/minに設定して、溶媒の流れとスプレーを一定にします(図2B)。N2 ガスバルブをオフにし、約15秒後にオンにします。溶剤の小さな滴がステージに吹き出され、溶剤の流れが一定の状態にある場合はスプレーが見られます。</li>
	<li>スプレー角度、XYZ軸、突起、および高さの観点から噴霧器の位置を調整します(図2D)。赤と黒のマーカーを基準として使用して質量分析信号を最適化し、感度モードで1 x 105 を超える信号強度を取得します(図2E)。<ol><li>噴霧器の突出は、信号強度に影響を与える最も重要な要因です。N2 ガスガードを5mmレンチで交換して突起を調整します。スプレー方向はマス画像の品質に影響します。スプレーがまっすぐになるまでスプレーを回転させます。突起を最適な信号強度位置に調整したら、ソースを交換するときに変更しないようにしてください。</li>
	</ol></li>
	<li>上記のすべての手順を完了すると、セットアップは実験の準備が整い、セットアップは通常、初期設定後に観察される>3週間の使いやすさで安定しています。</li>
</ol>3. DESI-MS画像取得
<ol><li>DESI-MSIの場合、サンプルの前処理は行いません。すでに前処理が行われているサンプルの場合は、前処理ステップをできるだけ最小限に抑えます。たとえば、一部のサンプルは封入剤でしか作成できないため、可能であればスライド上の余分な媒体を取り除きます。</li>
	<li>スライド上のサンプルの画像を撮ります(図3A)。不純物の取り込みを防ぐため、サンプルの表面に触れないでください。</li>
	<li>DESIステージのプレート位置にスライドを置きます。ステージには、AとBの2つのプレート位置があります。正しい位置を覚えておくことが重要です。標準のスライド(75 mm x 25 mm)またはフルスライドを使用すると、スライドがその位置に収まらず、安定して保持できなくなります。フルスライド(120 mm x 80mm)は最大4つのスライドを収容できるため、実験用の領域がはるかに大きくなります。</li>
	<li>高精細マス画像処理ソフトウェアを開き、[取得]タブで新しいプレートを設定し、正しいプレート位置(AまたはB)とプレートタイプを選択します。画像選択ページで、スライドの四隅を選択すると、画像が正しい向きに自動調整されます(図3A)。</li>
	<li>MSパラメータを設定します。一般的に使用される実験タイプはDESI-MSモードで、親イオンのみが検出されます。機器は1回の実験で1つの極性しか使用できません。したがって、極性を正または負として選択してください。少量の化学物質に関する詳細情報を取得するには、感度モードを適用します(図3B)。</li>
	<li>長方形を描画して、[パターン]タブでスキャン領域を定義し、ピクセルサイズを設定します。一般に、DESI-MS モードでは、ピクセルの X サイズと Y サイズを等しく保ちます。スキャンレートをピクセルサイズの5倍以下に設定します(図3C)。</li>
	<li>プロジェクトを保存し、質量分析取得ソフトウェアのワークシートをエクスポートします。</li>
	<li>質量分析取得ソフトウェアを開き、ワークシートをインポートして、新しいサンプルリストとして保存します。[ 実行の開始 ]を押して、MSIスキャンを開始します。さらにワークシートをインポートすることで、複数の画像を実験キューに追加できます。</li>
</ol>4. DESI-MSIデータの処理と可視化
<ol><li>サンプルのデータファイルを大量画像処理ソフトウェアにロードし、DESI画像処理のパラメータを設定します(図3D)。ロイシンエンケファリンは内部ロック質量に使用され、ロック質量は実験の極性を識別する唯一のポイントであるため、正しいロック質量を設定することが非常に重要です。次の値を設定します:ポジティブモードの場合:556.2772;負のモードの場合:554.2620。</li>
	<li>ターゲット化学物質のリストを作成することは可能であり、その場合、処理結果はターゲットリスト内の化学物質に焦点を当てます。処理されたデータファイルをロードして、サンプルのDESI画像を視覚化します。「正規化」ボタンをクリックしてトータルイオンクロマトグラフィー(TIC)でデータを正規化し、特定の化学物質の基準に対する相対強度を取得すると、異なるサンプルを相互に比較できます(図3E)。</li>
	<li>関心領域(ROI)を描画し、サンプル画像にいくつかのコピーをコピーします。ROIは、さまざまな画像にわたって作成できます。すべてのROIを選択し、多変量解析(MVA)をエクスポートして、MVAのすべてのROIからMS情報を抽出します(図3F)。</li>
</ol>

<ol><li>Buchberger, A. R., DeLaney, K., Johnson, J., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+spectrometry+imaging%3A+a+review+of+emerging+advancements+and+future+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Mass spectrometry imaging: a review of emerging advancements and future insights.</a> Analytical Chemistry. 90 (1), 240-265 (2018).</li>
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</ol>

著者は開示するものは何もありません。

MS技術の出現は、近年の分子レベルでの天然物研究に新しい洞察を開きました24。高感度と高スループットを備えたMS装置は、微量濃度25でも天然物中の代謝物の標的分析と非標的分析を可能にします。したがって、MSは現在、伝統的な漢方薬(TCM)化学の分野で広く使用されています。TCMの化学組成に関する定性的および定量的研究は、医薬品の成分とその関連化合物に関する情報を提供することができ、薬理学的研究に適した参照を提供するだけでなく、TCM26の品質基準システムを構築するための基礎も提供します。その上、天然物では、代謝シグネチャは通常、形態学的および組織学的特徴に関連しています27;したがって、in situ 分析を実施して、さまざまな生物的および非生物的ストレス条件に対する植物のメカニズムと応答を特定することは非常に価値があります28。ただし、従来のMS分析のサンプルは、特定の天然物または...

代謝物分布の可視化は、植物科学、特に漢方薬において、植物内の特定の代謝物の形成過程を明らかにする重要なトピックとなっています。伝統的な漢方薬(TCM)を参照して、有効成分に関する情報を提供し、製薬用途における植物部品の応用をガイドします。通常、代謝物の可視化はin situハイブリダイゼーション、蛍光顕微鏡、免疫組織化学などによって行われますが、これらの実験で検出される化合物の数では、限られた化学情報しか伝えられません。組織染色と組み合わせることで、質量分析イメージング(MSI)は、ミクロンレベル1の組織スライスをスキャンして分析することにより、大量のデータを提供し、化合物の空間分布情報を提供できます。MSIは、サンプル表面からの脱離とイオン化に分析物を使用し、その後、得られた気相イオンの質量分析とイメージングソフトウェアの適用により、情報を統合し、特定のイオン存在量を記録した2次元画像をプロットします。この技術は、標的組織および器官における薬物およびそれらの誘導代謝産物の特徴的な分布を検出することにより、外因性分子および内因性分子の両方を決定することができる2,3,4,5。
さまざまなイメージングMSモダリティがここ数十年にわたって開発されてきました。その中で最も顕著なのは、脱離エレクトロスプレーイオン化ベースのMSI(DESI-MSI)、マトリックス支援レーザー脱離/イオン化(MALDI)、および二次イオン質量分析(SIMS)6です。DESI-MSIは、大気中での操作、高いスループット、およびより高い精度により、生物学研究でよく使用されます7。MALDIは、トランスサイレチンフラグメントをゲンタマイシンの潜在的な腎毒性バイオマーカーとして特定し、マウス脳における1-メチル-4-フェニル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジンの管理後の神経毒性代謝物1-メチル-4-フェニルピリジニウムの分布を分析するために適用されています8,9。MALDIおよびDESIは、投与されたウサギの腎臓における薬物誘発性結晶様構造の組成を決定するために使用されています。これらの構造は、主に薬物10の脱メチル化および/または酸化によって形成される代謝産物から構成される。さらに、MSIは、標的臓器における薬物毒性の代謝分布の局在化に適用されています。ただし、植物組織の細胞はさまざまであり、動物とは異なり、特別な切片作成手順が必要です。
植物では、MALDIイメージングを用いて、これまでに、コムギ(Triticum aestivum)茎、ダイヤ豆(Glycine max)、イネ(Oryza sativa)種子、シロイヌナズナの花と根、および大麦(Hordeum vulgare)種子における異なる化合物の分布が分析されている11,12,13,14,15,16,17,18.最近の研究では、DESI-MSIが天然の薬物および製品の代謝物分析、特にイチョウ葉、フジ、アルテミシアアヌアL 19,20,21などのTCMで出現していることが報告されています。これらの研究では、植物材料サンプルの調製のためのプロトコルが異なり、凍結ミクロトームのようなより複雑な装置を必要とするものもあります。DESI-MSIには、検出されたサンプルの表面平坦性に関する厳しい要件があります。動物の臓器または組織を分析する場合、サンプルは通常、凍結切片22によって作製される。ただし、凍結切片作成の手順は複雑で費用がかかり、一般的に使用される接着剤最適切断温度(OCT)法は、イメージング時に強い信号を示します。さらに、TCMの薬用組織はさまざまです。たとえば、中国語で丹生として知られるサルビアミルティオルリザの根は薬用に使用されますが、Zisu(シソフルテッセンス)では葉が使用されます23,24。したがって、TCMの代謝物分析におけるDESIの利用を促進するために、サンプル調製手順を改善する必要があります。
多年生のハーブおよび一般的に使用されるTCMとして、 S. miltiorrhiza は最初に最も古い医学モノグラフである神農のマテリアメディカの古典(中国語で神農ベンカオジンとして知られている)に記録されました。この研究では、切片作成とDESIイメージング手順を最適化し、 S. miltiorrhizaの組織中の分布を特定し、化合物を分類するためのより費用効果の高い方法を開発しました。この方法はまた、乾燥組織に関連する欠点(通常は窒素ブローで容易に骨折する)を克服し、TCMの発症を促進することができます。本研究では、研究関連技術のためのTCM/民族医学の標準化を推進します。

<table><tbody><tr><td>2-プロパノール</td><td>フィッシャーCAS</td><td>:67-63-0</td><td>HPLCグレード</td></tr><tr><td>アセトニトリル</td><td>Sigma-aldrich</td><td>Number-75-05-8</td><td>LC-MSグレード</td></tr><tr><td>接着顕微鏡スライド</td><td>Citotest scientific</td><td>80312-3161</td><td>顕微鏡ガラススライド&nbsp;に接着できる&nbsp;</td></tr><tr><td>空冷式ドライ真空ポンプ</td><td>EYELA</td><td>FDU-2110</td><td>-80°Cの空気真空装置。C</td></tr><tr><td>ギ酸</td><td>ACS</td><td>F1089 | 64-18-6</td><td>LC-MS グレード</td></tr><tr><td>LE (ロイシン エンケファリン)</td><td>Waters</td><td>186006013-1</td><td>LC-MS グレード</td></tr><tr><td>メタノール</td><td>Sigma-aldrich</td><td>Number-67-56-1</td><td>LC-MS グレード</td></tr><tr><td>パラフィルム&nbsp;</td><td>Bemis Company</td><td>sc-200288</td><td>ラボ用シーリング フィルム</td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>Sigma-aldrich</td><td>V900894</td><td>試薬グレード</td></tr><tr><td>Q-TOF 質量分析計 ( DESI ソース</td>付き) <td>Waters</td><td>Synapt XS</td><td></td></tr></tbody></table>

desi-msiを用いた漢方薬の空間メタボロームで同定された代謝物の可視化

Visualization of Metabolites Identified in the Spatial Metabolome of Traditional Chinese Medicine Using DESI-MSI

伝統的な漢方薬の薬用使用は、主にその二次代謝産物によるものです。これらの代謝産物の分布の可視化は、植物科学において重要なテーマとなっています。質量分析イメージングは、組織スライスを分析することにより、膨大な量のデータを抽出し、これらに関する空間分布情報を提供できます。高スループットと高精度の利点により、脱離エレクトロスプレーイオン化質量分析イメージング(DESI-MSI)は、生物学研究や伝統的な漢方薬の研究でよく使用されます。ただし、この研究で使用される手順は複雑で手頃な価格ではありません。この研究では、切片作成とDESIイメージング手順を最適化し、代謝物の分布を特定し、植物組織中のこれらの化合物を分類するためのより費用効果の高い方法を開発しました。本研究では、代謝物分析におけるDESIの活用と、研究関連技術のための伝統的な漢方薬/民族医学の標準化を促進します。

このプロトコルは、植物サンプル中の化合物の同定と分布につながる可能性があります。特定のm/zのMS画像では、各ピクセルの色はm/zの相対強度を表しているため、サンプル全体の自然分布と代謝物イオンの存在量に関連付けることができます。収集位置での化学物質の量が多いほど、色は明るくなります。写真のバー(図4A-D)は、色のグラデーションを示しています。ここでは、S. miltiorrhizaの薬用使用に価値のある2つの化合物を選択しました。図4A-Dに示すように、目的化合物であるタンシノンIIA(m/z:333.0893、M+H)とロスマリン酸(m/z:705.1848、2M+H-O)の分布は、根のさまざまな領域で見られます。一方、図4E-Hに示す...

本研究では、プラントからDESI-MSIサンプルを調製するための一連の方法を提示し、DESIアセンブリの設置、MSIデータの取得、および処理の手順を詳細に説明します。このプロトコルは、植物における空間メタボローム情報を取得するためのいくつかの条件に適用することができる。

DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボロームで同定された代謝物の可視化

The medicinal use of traditional Chinese medicine is mainly due to its secondary metabolites. Visualization of the distribution of these metabolites has ...

この記事では、主にDESI-MSIを使用して植物サンプルを調製し、イメージングする費用対効果の高い方法について説明し、窒素が吹き込むと簡単に破壊される乾燥組織に関連する欠点を克服できます。根はクライオスタットミクロトーム上で凍結切片されたが、葉は刷り込みによって調製されたが、これは高価な機械を必要とするか、または信号強度を失う。私たちの方法はこれらの制限を克服することができます。この方法は、非生物的および生物的ストレス下にある植物における毒物の分布および移動などの植物の空間メタボロミクスに使用することができる。はじめに、2歳のサルビアmiltiorrhiza植物からきれいにされた根と葉を取り、約3〜5ミリメートルの断面の厚さで直接スライスします。次に、両面テープを使用してサンプルを接着顕微鏡スライドガラス上に貼り付けます。サンプルの上に別の顕微鏡スライドガラスを置き、サンドイッチのようにシーリングフィルムで包みます。次に、サンドイッチサンプルを摂氏マイナス80度で少なくとも4時間凍結し、トラップされた温度を摂氏マイナス75〜マイナス82度、真空計を摂氏2.5〜3.7パスカルで2時間空気真空にします。分析のために、冷蔵倉庫からサンプルを取り出した後、サンプルをマトリックスアプリケーションにかける前に、サンプル表面の結露を避けるためにデシケーターで室温に持っていきます。エレクトロスプレーイオン化(ESI)モードで機器検出器のセットアップと質量校正を実装します。水中のアセトニトリル中のロイシンとセファリンを1対1の比率で使用して検出器のセットアップを実行し、ギ酸ナトリウムと水イソプロパノールを1対1の比率で質量校正を実行します。ESIソースを取り出し、DESIユニットを質量分析計に取り付けます。窒素ガス供給をDESIユニットに接続し、ガス圧力を約0.5メガパスカルに調整します。5ミリリットルのシリンジにロイシンとセファリンとギ酸を水メタノールに1対9の比率で充填し、シリンジを高性能シリンジポンプに取り付けて、サンプル中の化学物質をイオン化するための溶媒を供給します。次に、溶媒供給キャピラリーをシリンジとDESI噴霧器に取り付けます。溶媒供給キャピラリーは、内径75マイクロメートル、外径375マイクロメートルの寸法の標準キャピラリーです。シリンジポンプを始動し、注入速度を毎分2マイクロリットルに設定して、溶媒の一定の流れとスプレーを得る。窒素ガスバルブをオフにし、約15秒後にオンにします。溶剤の小さな滴がステージに吹き出し、溶剤の流れが一定の状態にある場合はスプレーが見られます。次に、噴霧角度、XYZ軸、突起、高さの観点から噴霧器の位置を調整します。赤と黒のマーカーを基準として使用して質量分析信号を最適化し、感度モードで約10〜5倍の信号強度を取得します。噴霧器の突起は信号強度に影響を与える最も重要な要因であるため、5ミリレンチを使用して窒素ガスガードを交換して突起を調整します。スプレー方向は、マス画像の品質に影響します。したがって、スプレーがまっすぐになるまでスプレーを回転させます。これらすべての手順を完了すると、セットアップは実験の準備が整い、初期設定後、通常、約 3 週間の使いやすさで安定しています。DESI-MSイメージングでは、サンプルの前処理は必要ありません。ただし、可能であれば、スライド上の余分なメディアを取り除きます。スライド上のサンプルの画像を撮ります。不純物を避けるためにサンプルの表面に触れることなく、AとBの2つのプレート位置があるDESIステージのプレート位置にスライドを置き、標準スライドまたはフルスライドを使用して位置に収まります。フルスライドは最大4つのスライドを収容できるため、実験用の領域がはるかに大きくなります。高精細大量画像処理ソフトウェアを開きます。[取得]タブで新しいプレートを設定し、正しいプレート位置(AまたはB)とプレートタイプを選択します。[イメージの選択] ページで、スライドの四隅を選択すると、イメージが正しい向きに自動調整されます。MSパラメータを設定するには、親イオンのみが検出される一般的に使用されるDESI-MSモードとして実験タイプを選択します。次に、機器は実験で1つの極性しか使用できないため、極性を正または負のいずれかとして選択します。次に、感度モードを適用して、少量の化学物質に関する詳細情報を取得します。次に、[パターン]タブでスキャン領域を定義する長方形を描画し、ピクセルのXサイズとYサイズを等しくしてピクセルサイズを設定します。スキャン速度をピクセルサイズの5倍以下に設定します。プロジェクトを保存し、MS取得ソフトウェアのワークシートをエクスポートします。次に、ワークシートをMS取得ソフトウェアにインポートし、新しいサンプルリストとして保存します。[実行の開始]を押してMS画像スキャンを開始し、さらにワークシートをインポートすることで複数の画像を実験キューに追加できます。サンプルのデータファイルを大量画像処理ソフトウェアにロードし、DESI画像処理のパラメータを設定します。ロイシンとセファリンが内部ロック質量に使用され、ロック質量が実験の極性を特定する唯一のポイントであるため、正しいロック質量を設定することが重要です。正モードの場合は556.2772、負モードの場合は554.2620に設定します。ターゲット化学物質のリストを作成するには、処理されたデータファイルをロードして、サンプルのDESI画像を視覚化します。[正規化]ボタンをクリックして、トータルイオンクロマトグラフィーでデータを正規化し、特定の化学物質の基準に対する相対強度を取得すると、異なるサンプルを相互に比較できます。関心領域 (ROI) を描画し、サンプル画像に複数のコピーをコピーします。次に、すべてのROIを選択し、多変量解析をエクスポートして、すべてのROIからMS情報を抽出します。根および葉全体の切片の質量分析イメージングは、選択された化合物の空間分布を示す。各ピクセルの色は、質量電荷比の相対強度を表しているため、サンプル全体の自然分布と代謝物イオンの存在量に関連付けることができます。標的化合物であるタンシノンIIAとロスマリン酸の分布は、根のさまざまな領域で見ることができます。葉切片でタンシノールAが検出された化合物 再現性を目指すプロトコールとして、噴霧器の位置を多次元に調整して信号強度を最適化することが最も重要なことである。

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医学

質量分析イメージング（MSI）は、生物学的プロセスに新たな洞察を提供することができ、ネイティブ環境で化合物を保持し、無傷の組織内の様々な化学種を発見し、識別するために使用することができる強力なツールです。本明細小分子の分析のために開発MSI方法が記載されている。...

代謝産物の調査のためのMALDI-質量分析イメージング<em&gt;ウマゴヤシtruncatula</em&gt;ルート結節

大気圧で動作する質量分析イメージング(MSI)光源は、中赤外レーザー脱離とエレクトロスプレーポストイオン化を組み合わせることによって開発されました。外因性氷マトリックスは、組織関連物質の共鳴脱着を促進するためのエネルギー吸収マトリックスとして使用されました。この原稿は、全身新生児マウスのIR-MALDESI MSIを実施するための段階的なプロトコルを提供します。...

赤外線マトリックス支援レーザー脱離エレクトロスプレーイオン化することにより、全身質量分析イメージング（IR-MALDESI）

このプロトコルの目的は、生物学的サンプル中の代謝および分子検出を最大化するためにMALDI MSIを使用した実験を計画する際のサンプル調製に関する詳細なガイダンスを提供することです。...

MALDI質量分析イメージングを用いた代謝プロファイリングのサンプル調製

XY-MetaとmetaXを統合した非標的メタボロミクスワークフローを構築しました。このプロトコルでは、XY-Metaを使用してオープンアクセススペクトルリファレンスからデコイスペクトルライブラリを生成する方法を示し、FDR制御を行い、メタボロミクススペクトルを同定した後、metaXを使用して代謝産物を定量しました。...

FDR制御ベースの非標的メタボロームにおける同定と定量化の統合ワークフロー

ここでは、チベット医学における複雑な天然物製剤(マトリックス)中の微量および微量成分を特定するために適用できる一般的なプロトコルと設計について説明します。...

イオントラップ質量分析と多段階フラグメンテーション分析を用いたチベット医学における化合物構造の標準化された同定

高分解能質量分析分析と分子ドッキングを伝統的な漢方薬研究に統合する一般的なプロトコールについて説明します。...

Gynura bicolor DCの化学成分を研究するための高分解能タンデム質量分析

本プロトコルは、脱着エレクトロスプレーイオン化を用いてOVCAR-8細胞の単一細胞質量分析画像化を用い、Orbitrap質量分析器と結合して高空間分解能のメタボロミクス解析を行うことを説明しています。...

脱着電気噴霧イオン化を用いた単細胞質量分析イメージングとオービトラップ質量分析計

ここでは、ロディオラ顆粒(RG)のin vitroでの溶解をテストし、超純水中でのサリドロシド、没食子酸、没食子酸エチルの溶解曲線を描き、その曲線をさまざまな数学モデルに適合させます。このプロトコルは、RGのin vivo生物学的同等性およびin vivo-in...

チベット医学ロディオラ顆粒におけるマルチインデックス成分の in vitro 溶解測定

浣腸は、重度の急性膵炎(SAP)の治療に使用される伝統的な漢方薬(TCM)療法の一種です。治療では、TCM液を肛門から直腸と結腸に注入して、液体を腸内に保ち、腸粘膜から吸収します。この研究は、SAP患者の浣腸手順を標準化することを目的としています。...

重症急性膵炎患者に対する漢方薬の浣腸

本プロトコルは、ネットワーク薬理学予測およびメタボロミクス検証に基づいて、高脂血症に対するFructus...

ネットワーク薬理予測とメタボロミクス 高脂血症に対するフルクタス・フィランティのメカニズムの検証

学ぶ DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボローム解析法。Salvia miltiorrhizaの根と葉を用いた試料調製とイメージング技術により、植物の代謝物分布と環境ストレス応答を可視化する革新的アプローチです。

DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボロームで同定された代謝物の可視化

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