Name: 果肉をふるいにかけて畑で未熟なテフリチドショウジョウバエを検出する (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 21 s
Description: 学ぶ、果肉をふるいにかけて未熟なテフリチドショウジョウバエを検出する方法。砂糖水浮遊法により早期幼虫の発見率を向上させ、緊急防除プログラムでの害虫管理を強化する効率的な現場技術です。

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フロリダ大学でグアバの処理を支援してくれたシルビア・デュラン、テリ・アレン、ホセ・アレグリア、アレハンドラ・キャノン、ハワイで人工的に蔓延している果物の評価に協力してくれたリック・クラシマ、ジャン・オースト、ブルース・イナフク、そして原稿の以前のバージョンについて有益なコメントをしてくれたマイケル・スタルバーグに感謝します。このプロジェクトは、USDA APHISとフロリダ大学協力協定によって部分的に資金提供され、USDA-ARS(プロジェクト2040-22430-027-00D)によって部分的に支援されました。この予備出版物の調査結果と結論は、USDAによって正式に配布されたものではなく、政府機関の決定または方針を表すと解釈されるべきではありません。この出版物での商号または商用製品の言及は、特定の情報を提供することのみを目的としており、USDAによる推奨または承認を意味するものではありません。USDAは機会均等の提供者および雇用者です。

1.フルーツセレクション
<ol><li>調査する地域で利用可能な果物を決定します。</li>
	<li>標的テフリチド種の既知の宿主のリストに基づいて宿主果実を選択する。</li>
	<li>マンゴー、パパイヤ、グアバなどの柔らかい果肉の熟した果実を選びましょう。トロピカルアーモンドなどの熟していない果物や硬い果肉の果物は、果物の切断などの別の方法で検査する必要があります。</li>
	<li>損傷の兆候、産卵痕、およびソフトスポットがある木の落ちた、熟しすぎた果物、または熟した果物を選択します。</li>
	<li>一度に約2Lの果物を処理します(たとえば、5つのグアバまたは5つの中型のマンゴーがこの方法の適切なサンプルを構成します)。一度に処理できる果物の数は、果物のサイズによって異なります(図1A)。</li>
</ol>2.マッシュ
<ol><li>果物を大きく切り、4Lのジップロック収納バッグに入れます(図1B)。</li>
	<li>水が刻んだ果物を25〜50 mm覆うまで、袋に水を加えます(図1C)。</li>
	<li>すべての果肉が皮から外れ、滑らかな粘稠度(つまり、大きな塊がない)になるまで、果物を手でそっと絞ります(図1D)。</li>
</ol>3.後期の収集のためのふるい分け
<ol><li>ふるいを積み重ねます。大量の果物(~一度に5つの果物)を処理するには大きなふるい(直径457 mm)を使用し、個々の果物または小さなサンプル(<5つの果物)には小さなふるい(直径305 mm)を使用します。</li>
	<li>小さなメッシュ(No.20;0.85 mm)のふるいの上に大きなメッシュ(No.8;2.36 mm)のふるいでふるいを重ねます。初期の齢を検出するために、スタックの下部に3番目のふるい(No.45;0.35 mm)を置きます(図1E)。</li>
	<li>パルプを上部のふるいに注ぎます(図1F)。</li>
	<li>細かいパルプがふるいを通過するまで、蛇口、ホース、またはボトルからの水を使用して、ふるいの積み重ねを通してパルプを完全に洗浄します(図1G)。</li>
	<li>上部のふるいを視覚的にスキャンして、皮または大きな果物片で保持されている可能性のある晩齢幼虫を探します(図1H)。</li>
	<li>後期幼虫について2番目のふるいを注意深く調べます。細かいパルプが多い場合は、追加のすすぎが必要になる場合があります。</li>
	<li>幼虫の鉗子でふるいから幼虫を集め、70%EtOHを含むバイアルに入れます。</li>
</ol>4.初期のインスターコレクションのための砂糖の浮遊
<ol><li>453 g(1箱)のダークブラウンシュガーを2 Lの水道水に溶かして砂糖溶液を事前に混合すると、Brixの読み取り値は19°10になります。</li>
	<li>細かいメッシュのふるい(例:No.20およびNo.45)からふるいの端までパルプを水道水で洗い、材料をプラスチック製の皿(11 L)に移動します。</li>
	<li>パルプが25〜50 mm覆うまで黒糖溶液を加え、消泡剤を2滴加えます。パルプを黒糖溶液に約5分間置きます。</li>
	<li>幼虫の鉗子で溶液の表面に浮遊する幼虫を70%EtOHを含むバイアルに集める。</li>
</ol>5.幼虫のキュレーション
<ol><li>後で検査して識別できるように、収集場所、日付、果物の種類、コレクターをバイアルにラベル付けします。</li>
</ol>

ショウジョウバエの幼虫を検出するためのMushing、Sieving、およびFloating Method

<ol><li>White, I. M., Elson-Harris, M. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhite%2C+IM+%22Fruit+Files+of+Economic+Significance%3A+Their+Identification+and+Bionomics%22">Fruit Files of Economic Significance: Their Identification and Bionomics</a>. , CAB International. Wallingford, UK. (1992).</li>
<li>Papadopoulos, N. T., Plant, R. E., Carey, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+trickle+to+flood%3A+the+large-scale%2C+cryptic+invasion+of+California+by+tropical+fruit+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">From trickle to flood: the large-scale, cryptic invasion of California by tropical fruit flies.</a> Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 280 (1768), 20131466(2013).</li>
<li>Suckling, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eradication+of+tephritid+fruit+fly+pest+populations%3A+outcomes+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Eradication of tephritid fruit fly pest populations: outcomes and prospects.</a> Pest Management Science. 72 (3), 456-465 (2016).</li>
<li>Mcinnis, D. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+polyphagous+invasive+tephritid+pest+populations+escape+detection+for+years+under+favorable+climatic+and+host+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22American+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Can polyphagous invasive tephritid pest populations escape detection for years under favorable climatic and host conditions.</a> American Entomologist. 63 (2), 89-99 (2017).</li>
<li>Mutamiswa, R., Nyamukondiwa, C., Chikowore, G., Chidawanyika, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+oriental+fruit+fly%2C+Bactrocera+dorsalis+%28Hendel%29+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+in+Africa%3A+From+invasion%2C+bio-ecology+to+sustainable+management%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Overview of oriental fruit fly, Bactrocera dorsalis (Hendel) (Diptera: Tephritidae) in Africa: From invasion, bio-ecology to sustainable management.</a> Crop Protection. 141, 105492(2021).</li>
<li>Steck, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oriental+fruit+fly+eradication+in+Florida+2015-2016%3A+program+implementation%2C+unique+aspects%2C+and+lessons+learned%5BTitle%5D)+AND+%22American+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Oriental fruit fly eradication in Florida 2015-2016: program implementation, unique aspects, and lessons learned.</a> American Entomologist. 65 (2), 108-121 (2019).</li>
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<li>Gould, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probability+of+detecting+Caribbean+fruit+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+infestation+by+fruit+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Florida+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Probability of detecting Caribbean fruit fly (Diptera: Tephritidae) infestation by fruit dissection.</a> Florida Entomologist. 73 (3), 502-507 (1995).</li>
<li>Yee, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Rhagoletis+indifferens+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+larvae+using+brown+sugar+flotation+and+hot+water+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Detection of Rhagoletis indifferens (Diptera: Tephritidae) larvae using brown sugar flotation and hot water methods.</a> Journal of Applied Entomology. 136 (7), 549-560 (2012).</li>
<li>Yee, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+brown+sugar%2C+hot+water%2C+and+salt+methods+for+detecting+western+cherry+fruit+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+larvae+in+sweet+cherry%5BTitle%5D)+AND+%22Florida+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Comparison of the brown sugar, hot water, and salt methods for detecting western cherry fruit fly (Diptera: Tephritidae) larvae in sweet cherry.</a> Florida Entomologist. 97 (2), 422-430 (2014).</li>
<li>Van Timmeren, S., Diepenbrock, L. M., Bertone, M. A., Burrack, H. J., Isaacs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+filter+method+for+improved+monitoring+of+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+larvae+in+fruit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Integrated+Pest+Management%22%5BJournal%5D)">A filter method for improved monitoring of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) larvae in fruit.</a> Journal of Integrated Pest Management. 8 (1), 23(2017).</li>
<li>Van Timmeren, S., Davis, A. R., Isaacs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+a+larval+sampling+method+for+monitoring+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+in+blueberries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Optimization of a larval sampling method for monitoring Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) in blueberries.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (4), 1690-1700 (2021).</li>
<li>Balagawi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+brown+sugar+flotation+for+detecting+Queensland+and+Mediterranean+fruit+fly+%28Diptera%3A+Tephritidae%29+infestation+in+Australian+cherries%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Protection%22%5BJournal%5D)">Evaluation of brown sugar flotation for detecting Queensland and Mediterranean fruit fly (Diptera: Tephritidae) infestation in Australian cherries.</a> Crop Protection. 151, 105823(2022).</li>
<li>CFIA (Canadian Food Inspection Agency). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directive+D-02-04%3A+The+Blueberry+Certification+Program+and+domestic+phytosanitary+requirements+to+prevent+the+spread+of+blueberry+maggot+%28Rhagoletis+mendax%29+within+Canada.+2+Revision+10%5BTitle%5D)+AND+%22CFIA+%28Canadian+Food+Inspection+Agency%29%22%5BJournal%5D)">Directive D-02-04: The Blueberry Certification Program and domestic phytosanitary requirements to prevent the spread of blueberry maggot (Rhagoletis mendax) within Canada. 2 Revision 10.</a> CFIA (Canadian Food Inspection Agency). , Ottawa, Canada. (2020).</li>
<li>Kendra, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gas+chromatography+for+detection+of+citrus+infestation+by+fruit+fly+larvae+%28Diptera%3A+Tephritidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Postharvest+Biology+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Gas chromatography for detection of citrus infestation by fruit fly larvae (Diptera: Tephritidae).</a> Postharvest Biology and Technology. 59 (2), 143-149 (2011).</li>
<li>SAS Institute Inc. SAS 9.4 Guide to Software Updates and Product Changes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22SAS+Institute+Inc%22">SAS Institute Inc</a>. , (2013).</li>
</ol>

著者は、利益相反がないことを宣言します。

私たちの目標は、野外でテフリットの幼虫を見つけるための効率的かつ効果的な方法を開発することでした。根絶プログラムを開始したり、検疫エリアを設定したりする動機は、繁殖個体群を示す交配した雌または幼虫6の検出です。果物を切断して視覚的に検索する現在の方法は、通常、個別に検査できるよりもはるかに多くの宿主果実が存在するため、幼虫を見つけるのに非効率的です。さらに、テフリチドの個体数は、新たな侵入の地域では少ない可能性が高く、大量の果物で幼虫を見つける可能性は非常に困難です。たとえば、フロリダでの2015年の バクトセラ背部 根絶プログラムでは、54の異なる宿主種が特定され、4,000を超える果物がカットされました。この根絶プログラムでは、マンゴーには数匹の幼虫しか見つからず、他の宿主が蔓延していることは見つかりませんでした6。その結果、MSF/MS法は、果肉(マンゴー、グアバ、パパイヤ)を大量に含む果実を大量に加工する場合、果実の切断と比較して、A. suspensa および B. dorsalisの 幼虫の検出において、より感度が高く、高速であることがわかりました。マッシュアンドふるい分け法を使用して検査できる宿主果実の量が多いほど、まれな幼虫の検出の増加と相まって、侵入が早期に発見される可能性が高くなる可能性があります。繁殖個体群の早期発見は、根絶の可能性を高め、プログラムのコストを削減する可能性があります。
私たちの実験は、果物を切って目視検査する労働者によって検出された幼虫の数がかなり異なることを示しました。果物を切る労働者は、マンゴーとパパイヤにそれぞれ置かれた B.dorsalis 幼虫の50%と75%を逃しました。対照的に、マンゴーとパパイヤの果実を処理するためにMS法を使用して見逃された幼虫は、それぞれ5%と15%だけでした。同様に、入国港での果物の切断を評価した研究では、検査官によって発見された感染した果物と幼虫の数にかなりのばらつきがあることが示されました8。この研究では、経験豊富な港湾検査官が、果物をカットして目視検査したときに、 A.サスペンサ 幼虫の64%〜99%、感染した果物の16%〜82%を見逃したことが示されました8。私たちの結果は、マッシュアンドふるい分け法が、労働者が感染した果物の検出を見逃す可能性を減らす可能性があることを示唆しています。
砂糖とお湯の浮遊は、サクランボとブルーベリーにショウジョウバエがいないことを保証するためのシステムアプローチ方法で受け入れられているプロトコルです14。貨物のサブセットが溶液に粉砕され、検査官が砂糖溶液の表面を卵と幼虫の存在について視覚的にスクリーニングします。個々の果物を切るよりも多くの果物を処理できますが、これらの技術を使用して幼虫を見つける確率は、検査官の能力、存在する幼虫の段階と数、および果物の種類によって影響を受けます8。我々は、他のテフリチドと同様に、B. dorsalisとA. suspensaが果肉から外れて表面に浮かぶことを見出しました。興味深いことに、形態学的に同定できるため、緊急および除菌プログラムの対象となるより大きな後期幼虫では、糖の浮遊を含めて、方法の精度が向上しないことが判明しました。実際、浮遊法を追加すると、パパイヤで90%、マンゴーで48%の処理時間が長くなりました。処理時間の増加と追加の材料(つまり、水、ビン、砂糖など)は、フィールドで大きな齢を検索するときにこのステップを追加することを運用上サポートしていません。砂糖の浮遊法は、入港地や梱包所など、初期の齢を含むすべての段階を検出することが目的である場合に適している可能性があります。細かいメッシュのふるいで砂糖溶液をろ過すると、卵と初期の幼虫の幼虫を最も正確に検出できる可能性があります11,12。
MSおよびMSF技術は、簡単にすりつぶされ、大量の果肉を含む果物に適しています。テフロイドの幼虫は果肉に穴を掘る傾向があり、視覚的な検出が困難になります。MSおよびMSF法の重要な側面は、幼虫を果肉から分離することです。ふるい分けプロセスはパルプを除去し、幼虫をふるいスクリーンにさらします。同様に、砂糖水法は、幼虫を浮かせることによって幼虫を果肉から分離し、果肉は鍋の底に沈む。MSまたはMSF法によってパルプから分離された幼虫は、ふるいスクリーンまたは水面上を移動するのを容易に観察される。マッシュ、ふるい分け、およびオプションで浮遊する方法は、重要な宿主果実のテフリチド幼虫の検出速度と精度を大幅に改善しましたが、このプロセスはすべての果物に適しているとは限りません。たとえば、グリーンアボカドなどの硬い果肉を含む宿主の果物や、トロピカルアーモンドなどの種子/ピットが大きく、果肉の量が比較的少ない果物は、手作業による切断や目視検査による処理が容易になる場合があります。
MS法とMSF法は、比較的少数の果物(5〜10個)を処理すると高速であることがわかりました。大量の果物が処理された場合、その差は大きくなる可能性があり、これは緊急ショウジョウバエプログラムに必要かつ典型的である可能性があります。浮遊ステップを取り除くと、大きなテフリチド幼生(>3 mm)を見つける精度を損なうことなく、検出速度がさらに向上しました。これらの手法を現場に持ち込むことができることを示し、緊急ショウジョウバエプログラム中に労働者が経験する状況をシミュレートしました。私たちの研究は、MS法が後期幼虫のタイムリーな検出とその後のテフリチド繁殖集団の根絶を可能にする可能性があることを示しています。MSFは、現在根絶プログラムの対象となっていない卵子や初期齢の検出に利用できる可能性がある。

テフリットショウジョウバエは最も破壊的な農業害虫の1つであり、アナストレファ属、バクトロセラ属、およびセラチス属が最もリスクが高い1。1)歴史的な侵入とそれに関連する境界画定および根絶プログラム、2)入国港でのショウジョウバエ宿主材料の高い到着率、および3)繁殖個体群の確立に有利な気候条件に基づいて、多くの地域がエキゾチックなショウジョウバエの定着のリスクが高い。カリフォルニア州では、毎年複数のテフリチドの侵入と検出が発生しています2。前世紀にわたって世界中でテフリチドに対する200以上の侵入と根絶プログラムがあり、これはここ数十年で大幅に加速しています3。これらのプログラムの大部分は、侵入するショウジョウバエを根絶することに成功していますが3,4、これらの侵入の経済的および環境的負担は依然として高く、確立の可能性は常に存在します。最近の壊滅的な例は、アフリカ大陸5でのバクトセラ背部の感染です。
緊急ショウジョウバエプログラムでは、侵入種の繁殖個体群を検出して制御するために協調的な努力が払われます。たとえば、フロリダ州は、(実を結ぶ宿主植物の滴下)土壌ドレンチを適用し、交尾した雌および/または幼虫が見られる場所の半径200 mの宿主果実を除去することによって、テフリチドの侵入に対応します6。これらの行動と戦術は、土壌中の幼虫と蛹を殺し、その地域内の果物から卵と幼虫を取り除くのに役立ちます。いくつかの根絶プログラムでは、かなりの量の宿主果実が除去されます。2015年には、フロリダ6でのB.背筋根絶プログラム中に100,000kg以上の果物が破壊されました。隔離地域だけでも、生産者と関連産業への経済的損失は1,070万ドルを超えると推定されました7。
検疫エリアでテフリチドの幼虫を見つけるために、昆虫学者の小さなチームが、メスのハエの検出エリアの半径200 mで宿主の果実を収集し、幼虫6について各果物を切断して目視検査します。限られたスタッフリソースと数百の可能なホストでは、特に商業生産地域と住宅ヤードの両方で植物の多様性が高い地域では、タスクは困難になります。さらに、宿主の果実を切るときに幼虫が見逃されることがあります。入国地での果実の切断を評価した研究では、感染した果実を数週間保持し、蛹化基質に見られる幼虫と蛹を数える場合と比較して、果実を切ることはA.サスペンサの検出にそれほど効果的ではないことがわかりました8。
蔓延を検出するための果物の切断に代わるものがあります9,10,11,12,13。例えば、ブラウンシュガーの浮遊と温水法はどちらも、収穫されたサクランボ9,10で西洋のサクランボバエを検出するために使用される受け入れられた手順です。黒糖法は、砕いた果実を砂糖水溶液に入れ、上に浮かぶ幼虫を集めることです。ブラウンシュガーフローテーション法は、ショウジョウバエの害虫を検疫するためにパッキングハウスを必要とする輸出サクランボの規制規則を満たすために特別に開発されました。植物衛生をサポートするための黒糖水浮遊、塩水浮遊、または沸騰を含む承認された米国-カナダブルーベリー認証プログラムもあります14。砂糖とお湯の浮遊の精度をテストするとき、研究者はふるい分け法を使用して、何匹の幼虫が見逃されているかを判断しました9,10,11,12,13。ある研究では、砕いたブルーベリーを塩溶液に混ぜ、再利用可能なコーヒーフィルターで溶液をろ過すると、塩と砂糖の溶液の表面を視覚的に検査するよりもショウジョウバエの鈴木幼虫の検出に4倍優れていることが示されました14。さらに、ガスクロマトグラフィーは、カンキツ15中のA.サスペンサ幼虫の検出に使用された。これらのアプローチは、現地調査での適用性についてテストされていません。
私たちの目標は、ふるい分けと砂糖水浮遊を使用して野外でテフリチド幼生を見つける方法を開発し、テストすることでした。この方法は、従来のフルーツカット方法よりも未熟なショウジョウバエの検出を可能にし、ショウジョウバエ根絶プログラム中の繁殖個体群のタイムリーな制御をサポートします。

<table><tbody><tr><td>消泡剤</td><td>MicroLubrol</td><td>ML200-50-4</td><td>MicroLubrol 2000フルイド純粋なシリコーンオイル、https://www.microlubrol.com</td></tr><tr><td>ブラウンシュガー</td><td>ドミノ1</td><td></td><td>ポンドボックス&nbsp;ダークブラウンシュガークリスタル https://www.dominosugar.com/products/dark-brown-sugar</td></tr><tr><td>まな板</td><td>キッチンエイド</td><td>KE703NOSMGA</td><td>キッチンエイドクラシック滑り止めプラスチックまな板 12x18インチ https://www.amazon.com/KitchenAid-Classic-Nonslip-Plastic-11x14-Inch/dp/B09117L774/ref=sxin_24_ac_d_mf_brs?ac_md=2-1-S2l0Y2hlbkFpZA%3D%3D-ac_d_mf_brs_brs&content-id=amzn1.sym.1ad31f34-ba12-4dca-be4b-f62f7f5bb10d%3Aamzn1.sym.1ad31f34-ba12-4dca-be4b-f62f7f5bb10d&crid=UXMLNC72BL0 エム&cv_ct_cx=cutting%2Bboards&keywords=cutting%2Bboards &pd_rd_i=B091118V8T&pd_rd_r= 4C48B4AD-4D-4B4B-8799-FC7313 2F8E34&pd_rd_w=li862&pd_rd_wg =KogbB&pf_rd_p=1AD31F34-BA12-4DCA-BE4B-F62F7F5BB10D&pf_rd_r=9ATJD6W QBF9DVRY889MP&qid=1673911 429&リフレッシュ=1&sprefix=cutting%2Bboards%2Caps%2C198&SR=1-2-8B2F235A-DDDF-4202-BBB9-592393927392&th=1</td></tr><tr><td>ディッシュパン</td><td>ステリライト</td><td>06578012</td><td>ホワイト 12 qrt ディッシュパン、https://www.amazon.com/STERILITE-06578012-Sterilite-White-Dishpan/dp/B0039V2G5E/ref=sr_1_1?crid=2SMBMLFJF18U&keywords= ホワイト+12+qt+ディッシュパン+ステリライト&qid=1673911729&s=home -garden&sprefix=白+12+qr+皿+スターライト%2Cgarden%2C184&sr=1-1</td></tr><tr><td></td><td>EthOH フィッシャー・サイエンティフィ</td>ック・サイエンティフィック・<td>BP8202500エ</td><td>タノール溶液 96%、分子生物学グレード、https://www.fishersci.com/shop/products/ethanol-solution-96-molecular-biology-grade-fisher-bioreagents/BP8202500</td></tr><tr><td>ガラス・バイアル</td><td>フィッシャー・サイエンティフィ</td>ック <td>0333921H</td><td>フィッシャーブランド&nbsp;クロージャー付きクラスB透明ガラスねじバイアル、</td></tr><tr><td>https://www.fishersci.com/shop/products/class-b-clear-glass-threaded-vials-with-closures-packaged-separately/0333921H ナイフ</td><td>Zyliss</td><td>31380</td><td>5.25 "ユーティリティナイフ、https://www.amazon.com/ZYLISS-Utility-Kitchen-5-5-Inch-Stainless/dp/B00421ATJK/ref=sr_1_7?crid=2U27KE1HTG5N1&keywords= フルーツ%2Bcutting%2Bknives&qid=1673911609&s= ホームガーデン&sprefix=fruit%2Bcutting%2Bknives%2Cgarden%2C145&sr=1-7&th=1</td></tr><tr><td>No. 20 メッシュふるい</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4221</td><td>U.S. Standard&nbsp;篩のテスト、https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr><tr><td>No. 45 メッシュふるい</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4226</td><td>U.S. Standard&nbsp;篩(Testing Sieves)、https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr><tr><td>No. 8 メッシュふるい</td><td>Hogentogler & Co. Inc.</td><td>4215</td><td>U.S. Standard&nbsp;ふるい、https://www.hogentogler.com/sieves/18-inch-sieves.asp</td></tr><tr><td>軟鉗子</td><td>DRインスツルメント</td><td>DRENTF01</td><td>DRインスツルメンツフェザー級昆虫学鉗子、https://www.amazon.com/DR-Instruments-DRENTF01-Featherweight-Entomology/dp/B008RBLO8Q</td></tr><tr><td>ジッパーロック収納バッグ</td><td>ジップロック</td><td>682254</td><td>ジップロックブランド2ガロンクリアフリーザーバッグ、https://www.amazon.com/Ziploc-Freezer-Bag-Gallon-100/dp/B01NCDWR8A/ref=sr_1_1_sspa?crid=3SQFBT64Z76ES&keywords = ジップロック+フリーザー+バッグ+2+ガロン&qid=1674504602&</td></tr></tbody></table>

果肉をふるいにかけて畑で未熟なテフリチドショウジョウバエを検出する

Sieving Fruit Pulp to Detect Immature Tephritid Fruit Flies in the Field

テフリチダエ科のショウジョウバエは、世界で最も破壊的で侵略的な農業害虫の一つです。多くの国は、初期の人口を排除するために高価な根絶プログラムを実施しています。根絶プログラムでは、繁殖個体群を強く示し、侵入の空間的範囲を確立するのに役立つため、幼虫を検出するために協調した努力が払われます。未熟なライフステージの検出は、害虫のさらなる拡大を封じ込め、防止するための追加の管理および規制措置を引き起こします。伝統的に、幼虫の検出は、個々の宿主の果実を切り取り、それらを視覚的に調べることによって達成されます。この方法は、限られた数の果物しか処理できず、幼虫を見逃す可能性が高いため、労働集約的です。i)宿主果実をビニール袋に入れてつぶす、ii)一連のふるいを通してパルプを濾す、iii)保持した果肉を黒糖水溶液に入れる、iv)表面に浮かぶ幼虫を集めることを組み合わせた抽出技術を試験した。この方法は、 アナストレファ・サスペンサが自然に蔓延している野外で収集されたグアバを使用してフロリダで評価されました。ショウジョウバエ根絶プログラムをより代表する低個体群を模倣するために、ハワイのマンゴーとパパイヤには、既知の少数の バクトロセラ背部幼虫 が蔓延していました。この方法の適用性は、 B. dorsalis が自然に蔓延するグアバの野外でテストされ、緊急ショウジョウバエプログラム中に労働者が経験した条件下で方法を評価しました。野外試験と実験室試験の両方で、果肉のマッシュアップとふるい分けは、果物を切るよりも効率的(必要な時間が短く)で、感度が高かった(より多くの幼虫が見つかりました)。パルプを黒糖水溶液に浮遊させることは、初期の幼虫を検出するのに役立ちました。重要なテフリチド宿主の果肉をマッシュアップしてふるいにかけると、緊急プログラム中に幼虫を検出する可能性が高くなる可能性があります。

野外での未熟なテフリチドショウジョウバエの検出を増やすことは、これらの破壊的な害虫の個体数を排除するためのタイムリーな努力を引き起こす可能性があります。晩齢幼虫の検出は、宿主果実を袋に入れてマッシュアップし、果肉を一連のふるいに通す方が、手作業で切断して目視検査を行うよりも速く正確です。

Fruit flies of the Tephritidae family are among the most destructive and invasive agricultural pests in the world. Many countries undertake expensive ...

テフリット類ショウジョウバエの幼虫を、現在の各果実の切断・目視検査方法よりも迅速かつ正確に発見する方法を開発しています。大量の果物を加工する畑で使える簡単な技術を開発したい。この研究の課題は、緊急または根絶プログラム中に見られるものを表す可能性が高い、蔓延の少ない果物を見つけることでした。果実が見えないため、幼虫の数が少ない主要な宿主に人工的に寄生する方法を使用します。野外試験と実験室試験の両方で、果肉のマッシュアップとふるい分けにかかる時間は短く、果物を切るよりも多くの幼虫が見つかりました。パルプを黒糖水溶液に浮かべると、初期の幼虫を検出するのに役立ちました。重要なテフリチド宿主の果肉をマッシュアップしてふるいにかけると、緊急プログラム中に幼虫を検出する可能性が高くなる可能性があります。引き続きプロトコルを最適化して、規制対象のショウジョウバエのさまざまな種に最適なふるいサイズを決定し、果実の種類、果実の量などの基準を確立して、幼虫破壊法または標準的な果実切断の使用が正当化されるかどうかを判断するのに役立ちます。

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Research

JoVE Journal

Biology

生物学

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果肉をふるいにかけて畑で未熟なテフリチドショウジョウバエを検出する

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