Name: 膵島隔離のためのブタ膵臓の外科的灌流と隔離 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-07T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: 学ぶブタ膵臓の外科的灌流と膵島隔離法。温虚血や機械的損傷を最小限に抑え、高収率・高純度の膵島を分離する技術を解説。異種移植研究への応用に役立つ。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>ブタ膵臓の外科的灌流によるブタ島の浄化

<ol><li>Gillespie, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+1+diabetes%3A+pathogenesis+and+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22CMAJ%22%5BJournal%5D)">Type 1 diabetes: pathogenesis and prevention.</a> CMAJ. 175 (2), 165-170 (2006).</li>
<li>Shapiro, A. M., Pokrywczynska, M., Ricordi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+pancreatic+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Clinical pancreatic islet transplantation.</a> Nat Rev Endocrinol. 13 (5), 268-277 (2017).</li>
<li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> N Engl J Med. 343 (4), 230-238 (2000).</li>
<li>Anazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+method+of+porcine+pancreas+procurement+with+arterial+flush+and+ductal+injection+enhances+islet+isolation+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Improved method of porcine pancreas procurement with arterial flush and ductal injection enhances islet isolation outcome.</a> Transplant Proc. 42 (6), 2032-2035 (2010).</li>
<li>Dufrane, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+favouring+successful+adult+pig+islet+isolations+for+xenotransplantation+in+pig-to-primate+models%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">Parameters favouring successful adult pig islet isolations for xenotransplantation in pig-to-primate models.</a> Xenotransplantation. 13 (3), 204-214 (2006).</li>
<li>Hilling, D. E., Rijkelijkhuizen, J. K., Tons, H. A., Terpstra, O. T., Bouwman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+islet+isolation+outcome+is+not+affected+by+the+amount+and+distribution+of+collagen+in+the+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">Porcine islet isolation outcome is not affected by the amount and distribution of collagen in the pancreas.</a> Xenotransplantation. 17 (3), 250-255 (2010).</li>
<li>Lamb, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+of+viable+islets+from+partially+digested+young+pig+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation of viable islets from partially digested young pig pancreas.</a> Cell Transplant. 23 (3), 263-272 (2014).</li>
<li>Otsuka, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreas+preservation+with+a+neutrophil+elastase+inhibitor%2C+alvelestat%2C+contributes+to+improvement+of+porcine+islet+isolation+and+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Pancreas preservation with a neutrophil elastase inhibitor, alvelestat, contributes to improvement of porcine islet isolation and transplantation.</a> J Clin Med. 11 (15), 4290(2022).</li>
<li>Vanderschelden, R., Sathialingam, M., Alexander, M., Lakey, J. R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost+and+scalability+analysis+of+porcine+islet+isolation+for+islet+transplantation%3A+comparison+of+juvenile%2C+neonatal+and+adult+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Cost and scalability analysis of porcine islet isolation for islet transplantation: comparison of juvenile, neonatal and adult pigs.</a> Cell Transplant. 28 (7), 967-972 (2019).</li>
<li>Weegman, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+profiles+of+different+cooling+methods+in+porcine+pancreas+procurement%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">Temperature profiles of different cooling methods in porcine pancreas procurement.</a> Xenotransplantation. 21 (6), 574-581 (2014).</li>
<li>Hart, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+an+adequate+perfusion+pressure+for+continuous+dual+vessel+hypothermic+machine+perfusion+of+the+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Determination of an adequate perfusion pressure for continuous dual vessel hypothermic machine perfusion of the rat liver.</a> Transpl Int. 20 (4), 343-352 (2007).</li>
<li>Tullius, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accumulation+of+crystal+deposits+in+abdominal+organs+following+perfusion+with+defrosted+University+of+Wisconsin+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Accumulation of crystal deposits in abdominal organs following perfusion with defrosted University of Wisconsin solutions.</a> Am J Transplant. 2 (7), 627-630 (2002).</li>
<li>Ching, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reliable+method+for+isolation+of+viable+porcine+islet+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">A reliable method for isolation of viable porcine islet cells.</a> Arch Surg. 136 (3), 276-279 (2001).</li>
<li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+pig+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Adult pig islet isolation.</a> J Vis Exp. (176), (2021).</li>
<li>Taylor, M. J., Baicu, S., Greene, E., Vazquez, A., Brassil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+isolation+from+juvenile+porcine+pancreas+after+24-h+hypothermic+machine+perfusion+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Islet isolation from juvenile porcine pancreas after 24-h hypothermic machine perfusion preservation.</a> Cell Transplant. 19 (5), 613-628 (2010).</li>
<li>Iwanaga, Y., Sutherland, D. E., Harmon, J. V., Papas, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreas+preservation+for+pancreas+and+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Pancreas preservation for pancreas and islet transplantation.</a> Curr Opin Organ Transplant. 13 (4), 445-451 (2008).</li>
<li>Pratschke, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+death+and+its+influence+on+donor+organ+quality+and+outcome+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Brain death and its influence on donor organ quality and outcome after transplantation.</a> Transplantation. 67 (3), 343-348 (1999).</li>
<li>vander Windt, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+islet+damage+after+direct+exposure+of+pig+islets+to+blood%3A+has+humoral+immunity+been+underestimated%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Early islet damage after direct exposure of pig islets to blood: has humoral immunity been underestimated.</a> Cell Transplant. 21 (8), 1791-1802 (2012).</li>
<li>Wright, M. J., Cavanagh, T. J., Fetterhoff, T. J., Wile, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+blood+content+on+porcine+pancreatic+dissociation+and+islet+yield%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Effect of blood content on porcine pancreatic dissociation and islet yield.</a> Transplant Proc. 26 (6), 3442(1994).</li>
<li>Toso, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+adult+porcine+islets+of+Langerhans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Isolation of adult porcine islets of Langerhans.</a> Cell Transplant. 9 (3), 297-305 (2000).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 M NaOH、100 mL</td><td>Millipore Sigma</td><td>1310-73-2</td><td></td></tr><tr><td>10x HBSS、500 mL (15 から 30 °;C)</td><td>サーモフィッシャー</td><td>14065056</td><td></td></tr><tr><td>1x D-PBS、500 mL</td><td>サーモフィッシャー</td><td>14200075</td><td></td></tr><tr><td>1x HBSS、1 L</td><td>サーモフィッシャー</td><td>14025076</td><td></td></tr><tr><td>250 mL コニカルチューブ</td><td>ミリポアシグマ</td><td>CLS430236-6EA</td><td></td></tr><tr><td>アムホテリシン B [50 mg]</td><td>ミリポアシグマ</td><td>PHR1662</td><td></td></tr><tr><td>消毒剤 ポビドン ヨウ素 10%</td><td>ミリポアシグマ</td><td>25655-41-8</td><td></td></tr><tr><td>BioRad Gradient Former</td><td>BioRad</td><td>395</td><td></td></tr><tr><td>塩化カルシウム二水和物</td><td>Thermo Fisher</td><td>10035-04-8</td><td></td></tr><tr><td>COBE Cell Processor</td><td>Ebay</td><td>317690&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>消化回路リザーバー、Gibco ボトル、1 L</td><td>サーモフィッシャー</td><td>10341001</td><td></td></tr><tr><td>ジメチルスルホキシド (DMSO)</td><td>Thermo Fisher</td><td>85190</td><td></td></tr><tr><td>ジチゾン</td><td>Thermo Fisher</td><td>60-10-6</td><td></td></tr><tr><td>グラジエントフォーマー接続キット</td><td>BioRad</td><td>1652008</td><td></td></tr><tr><td>ヘパリン [1000 U/mL]</td><td>救急医療製品</td><td>0409-2720-01</td><td></td></tr><tr><td>HEPES緩衝液(1 m)、100 mL</td><td>サーモフィッシャー</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>ヒト血清アルブミン25%、100 mL</td><td>セルプロゲン</td><td>HSA2001-25-1</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>コベトラス</td><td>アイテム#:11695067772</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン</td><td>パターソン</td><td>アイテム#:07-894-8462</td><td></td></tr><tr><td>リベラーゼ(100 mg)</td><td>ミリポアシグマ</td><td>5401020001</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEAD生存率/細胞毒性キット</td><td>サーモフィッシャー</td><td>L3224</td><td></td></tr><tr><td>リンパ液 1.1 培地 500 mL</td><td>Cedarlane Labs</td><td>CL5020</td><td></td></tr><tr><td>マスターフレックス LS 16 チューブ</td><td>マスターフル</td><td>96419-16</td><td></td></tr><tr><td>マスターフレックス 蠕動ポンプ</td><td>マスターフレックス</td><td>07522-30</td><td></td></tr><tr><td>ペンストレップ (2 mg/mL)</td><td>セルプロゲン</td><td>PS-30-002</td><td></td></tr><tr><td>プルモチーム(1 mg/mL、2.5 mL/バイアル)</td><td>Dornase Alfa</td><td>8931278</td><td></td></tr><tr><td>Recovery Medium, PIM(R)</td><td>Prodo Laboratories, Inc.</td><td>PIM-R001GMP</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Millipore Sigma</td><td>R8758-1L</td><td></td></tr><tr><td>標準培地 (株) PIM(S)</td><td>Prodo Laboratories, Inc.</td><td>PIM-S001GMP</td><td></td></tr><tr><td>Tzed&trade;(チレタミン、ゾラゼパム)注射C</td><td>パターソン</td><td>アイテム#:07-894-6240</td><td></td></tr><tr><td>ウィスコンシン大学(UW)ソリューション、3 L</td><td>グローバル移植ソリューション</td><td>1000-0046-06</td><td></td></tr><tr><td>ウォーターバス</td><td>シグマアルデリッヒ</td><td>CLS6783-1EA</td><td></td></tr><tr><td>キシラジン</td><td>パターソン</td><td>アイテム#:07-891-6165</td><td></td></tr></tbody></table>

膵島隔離のためのブタ膵臓の外科的灌流と隔離

Surgical Perfusion and Isolation of the Porcine Pancreas for Islet Isolation

手術のセットアップと正中線開腹術を 図1に示します。開腹術の切開は、泌尿生殖器の開口部を避けるために湾曲させる必要があります(図1B)。リトラクターをセットアップするときは、OmniまたはBookwalterリトラクターのポストをテーブルの左下隅に取り付けます。理想的なリトラクションには、右腹壁に2枚、左腹壁に2枚、右結腸と小腸に1〜2枚を滅菌タオルで包んだリトラクターブレードが含まれます(図1C)。体壁、内臓、または可鍛性リトラクターブレードは、アシスタントの空き状況とオペレーターの好みに応じて使用できます。OmniまたはBookwalterリトラクターが利用できない場合は、1-2個の自己保持型Balfourリトラクターを使用して、両側の腹壁を引っ込めることができます。その後、助手は滅菌タオルで包まれた右結腸と小腸にリトラクションを適用することができます。
図2で実施される後腹膜解剖は、鈍的解剖と鋭利な解剖を組み合わせて行うことができます。腎下IVCと大動脈の円周方向の制御を得ることは重要ですが、この解剖を分岐部まで続ける必要はありません。胸腔内または肝後IVCの損傷は重大な出血を引き起こし、術野を不明瞭にする可能性があるため、手技の胸腔内部分は最も技術的に困難です(図3)。下行胸部大動脈を特定するときは、親指と人差し指を使用して大動脈を食道から鈍く分離します。小さな肋間動脈の剥離とその後の出血を避けるために、下行胸部大動脈が大動脈クランプを収容するための明確に定義されたスペースでアクセス可能である限り、円周方向の制御は必須ではありません。
腎下大動脈のカニューレ挿入は、セルディンガー法を使用して行われます(図4)。これは、腎下大動脈を近位および遠位にクランプして行うか(図4A)、またはクランプせずに直接行うことができます。大動脈の後壁に針を差し込まないように注意してください。大動脈が十分なサイズであれば、より大きなシースも使用することができます。IV延長チューブから空気をパージし、UW溶液からのIVチューブを10Frシースに無菌状態で接続することが重要です。IVチャネルが開いていることを確認しますが、大動脈がクランプされるまで流れは開始されません(図4B)。腎下IVCで静脈切開を行う場合、主治医がDeBakey鉗子を使用してIVCをしっかりと握り、静脈切開の部位を失わず、大量の血液が術野に注がれるようにすることが重要です。膵臓から離れた静脈切開術は、プール吸引の迅速な配置により、膵臓切除術のための明確な組織面を備えた無血手術野を維持します(図4C)。最初のドレナージは暗静脈血ですが、ブタが放血され、UW溶液が内臓を通して灌流されると、これは明るくなります。手順のこの部分には、必ず大きな吸引キャニスターを使用してください。
内臓、特に膵臓は、UW溶液が灌流されるとますます青白くなります(図5A)。膵管は、十二指腸葉の経過をたどって十二指腸に入ることで識別できます。腸溶性内容物による汚染を避けるために、ダクトは2つのシルクタイの間で分割する必要があります(図5B)。膵臓実質は青白く血が流れていないように見えるはずですが、膵臓を囲む残りの結合組織は、膵島を分離する前に洗浄する必要があります(図5C)。
その後、採取された膵臓は、多段階の膵島単離および精製プロセスを経ることができます(図6)。 図7A は、膵島単離および精製プロセス後の代表的な膵島サイズ分布を示しています。 図7B は、明視野顕微鏡を用いた精製された膵島、および生死染色後を示しており、緑色および赤色の染色はそれぞれ生存可能な膵島細胞および非生存膵島細胞を表しています。膵島の収量と純度は、膵島セルカウンターを使用して評価できます。代表的な収量は、3つの独立したブタ膵臓単離から得られ、 図7Cに要約されています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig01.jpg"> 図1:手術のセットアップ(A)腹部を無菌的に準備した状態で仰臥位に位置したブタ。(B)剣状突起から恥骨まで作られた正中線開腹術。(C)オムニリトラクターを所定の位置に設置して露出した後腹膜。スケールバー= 2 cm。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig02.jpg"> 図2:後腹膜解離 (A)腎下IVCおよび腎静脈の円周方向の制御を伴う後腹膜解剖。黄色の四角形は 、図 2B で拡大されています。(B)腎下IVCおよび腎静脈の拡大画像。(C)腎静脈が結ばれています。スケールバー= 2 cm。略語:IVC =下大静脈。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig03.jpg"> 図3:頓挫上コントロールの獲得(A)右半横隔膜を切開した。黄色の四角形は図 3B で拡大されています。(B)胸腔内IVCおよび下行胸部大動脈を露出させるための右半横隔膜切開の延長。(C)胸腔内IVCの円周制御が得られました。スケールバー= 2 cm。略語:IVC =下大静脈。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig04.jpg"> 図4:腎下大動脈カニューレ挿入、内臓隔離、および灌流(A)腎下大動脈の近位および遠位制御が得られました。(B)セルディンガー法により腎下大動脈に配置された10Frシース。(C) 腎下大動脈シースによる内臓灌流および腎下 IVC における静脈切開術およびプール吸盤によるドレナージ。スケールバー= 2 cm。略語:IVC =下大静脈。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig05.jpg"> 図5:膵臓全摘術。 (A)灌流中に内臓が薄くなる。(B)隔離された膵管。(C)摘出されたブタの膵臓。スケールバー= 2 cm。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig06.jpg"> 図6:膵島の分離と精製。 酵素溶液の注入、ブタ膵臓の消化、組織採取、Cell Processorによる細胞洗浄、細胞培養と分析の概略図。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig06large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66350/66350fig07.jpg"> 図7:精製後の代表的な膵島の生存率と収量(A)拡大明視野イメージングと生/死染色後のブタ島。緑は生細胞を示しています。赤は死んだ細胞を示します。スケールバー = 100μm (B) 精製後のブタ島のヒストグラム分布。(C)3つのブタ膵臓膵島分離株からの膵島の純度と収量を示す表。略語:IEQ=島等価、島定量化の標準単位。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66350/66350fig07large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

Pancreatic islet transplantation is an emerging treatment for type I diabetes; however, it is limited by donor matching and availability. Porcine islet ...

surgical-perfusion-isolation-porcine-pancreas-for-islet

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

ヒト膵島の高品質と適切な量を達成することが成功した膵島移植のための著名な前提条件の一つです。このビデオでは、我々は段階的に説明し、人間の膵島を分離するための手順：変更された自動化法を用いて（パートI消化および膵組織のコレクション）。...

人間の膵島単離：パートI：膵組織の消化とコレクション

研究のための2型糖尿病膵島の供給が不十分です。ここでは、膵部分切除を受けた患者からの膵島を単離するための我々のプロトコルを共有しています。このアプローチは、2型糖尿病と基礎および臨床研究のための十分な数の臨床的にマッチした非糖尿病患者からの膵島を得るためのユニークな会場を表します。...

部分的に膵臓を摘出された患者からのヒト膵島の単離

膵島は、ランゲルハンス島とも呼ばれ、グルコース調節やその他の重要な生物学的機能のためのホルモンを産生する内分泌細胞のクラスターです。このプロトコルでは、最初にAmpulla of...

コラゲナーゼ灌流による膵島単離:膵島細胞を単離するための酵素的方法

我々は、新生児マウスから無傷の膵島を単離するために、本明細書のプロトコルを記述します。膵臓は、部分的に洗浄し、ハンドピッキング続いて、コラゲナーゼで消化しました。 20から80膵島クラスタは、いくつかの島の研究に適しており、新たに生まれたマウスから膵臓ごとに取得することができます。...

新生児マウスの膵臓からの機能性膵島の効果的な分離

この島分離プロトコルは、外分泌組織を消化するコラゲナーゼ注射の新しい経路と、マウスから島を精製するための簡略化された勾配手順を説明した。これは、酵素消化、勾配分離/精製、およびアイレット手摘みを含みます。分離に成功すると、マウスあたり250~350の高品質で完全に機能する島が生じます。...

マウスからの膵島分離のための簡単な高効率プロトコル

全体膵臓の組織工学は、外分泌と内分泌機能のための挑戦です。そのままブタ膵臓と界面活性剤 Triton X-100 の灌流成功 decellularization のプロセス、デオキシ コール酸ナトリウム、デオキシリボヌクレアーゼの解剖のための手法を示す.

分離と全体ブタ膵臓の Decellularization

ビデオ記事は、ブタの3日間の生存モデルにおける膵切除術と膵臓同種移植の技術を要約し、方法の段階的な説明と、不安定で繊細なブタの内臓解剖学的構造に対処するための外科的ヒントとコツに重点を置いています。...

ブタ膵臓移植を行うための外科的ヒントとコツ

ここでは、交絡因子の可能性を減らしながら内分泌膵臓機能を評価するための追加技術として、無傷の膵臓を持つマウス血管系を通る灌流を介してグルコース刺激インスリン分泌 (GSIS)...

無傷の膵臓を持つマウス血管系を介した灌流によるグルコース刺激インスリン分泌

本研究は、マウス膵臓から機能的な一次膵島および腺皮細胞を効率的に抽出する簡略化された方法を開発し、急性膵炎誘発性糖尿病の病因における細胞間コミュニケーションの研究に貴重なツールを提供しました。...

マウスから一次膵島および一次膵臓細胞を同時に分離するための簡単かつ迅速な方法

このプロトコルは、ルイスラット膵島の外科的収穫、酵素的消化、密度勾配精製のための標準化された方法を説明し、移植や in vitro...

酵素による消化および密度-勾配分離を用いたルイスラットからの膵島の分離と精製

学ぶブタ膵臓の外科的灌流と膵島隔離法。温虚血や機械的損傷を最小限に抑え、高収率・高純度の膵島を分離する技術を解説。異種移植研究への応用に役立つ。

膵島隔離のためのブタ膵臓の外科的灌流と隔離

さらに動画を探す