2024年4月5日
妊娠から授乳までの母マウスの自律神経活動と詳細な母体行動の同時記録をテレメトリーシステムを用いて達成した。この方法は、妊娠から離乳までの母親の生理学的および行動的特性のダイナミクスを理解するのに役立ちます。
私たちの研究は、妊娠から授乳までの母親の生理的変化と、それが母親の行動や子犬の発育にどのような影響を与えるかに焦点を当てています。私たちは、母親の生理機能が子孫の健全な成長と発達をサポートするためにどのように適応するかを判断しようとしています。妊娠中のマウスに領域を実装することで、妊娠から授乳までの継続的な心電図追跡が可能になり、生殖イベント中の自動活動に関する洞察が得られます。この方法により、より自然な行動観察が得られ、同時心電図記録により、母親の生理機能の変化を明確に理解できます。
私たちの研究により、手術方法やマウスの観察方法が改良され、マウスの長期モニタリングが可能になりました。
私たちの研究は、妊娠中および授乳中の母親の身体的反応が自動活動の観点からどのように行われるかを理解するのに役立ちます。私たちの研究は、母性ケアの改善と子犬の発育支援につながり、動物だけでなく人間の生殖を研究するための新しいアプローチにインスピレーションを与える可能性があります。
今後は、自然環境において乳児殺しやネグレクトを犯した母親が、妊娠から授乳までの自律神経活動や母性行動において、正常な母親とどのような違いがあるのかを調査する予定です。このプロトコルは、ネグレクトと乳児殺害の背後にある要因を理解するのにも役立つと信じています。
[講師]まず、麻酔をかけたマウスをパネルヒーターの上に腹臥位に置きます。はさみを使って耳の間に皮膚を切開し、鉗子を切開部に挿入して首と腹側の周りの皮膚と筋肉を分離し、テレメーターを配置するためのスペースを作ります。次に、耳の間の切開部からテレメーターを挿入し、腹側に作成されたスペースに配置します。鉗子を使用して、テレメーターのプラスとマイナスのリード線を転がして束ね、これらのリード線を首のスペースに配置します。切開部を閉じるには、13 ミリメートルの針と 20 センチメートルの縫合糸を使用します。次に、マウスを仰臥位に置きます。はさみを使用して、鎖骨の皮膚の周りに小さな切開を行い、筋肉を首の皮膚から分離します。鉗子を使用して、首の後ろからプラスとマイナスのリードを抽出します。次に、唾液腺をそっと分離して、胸鎖乳突筋のV字型の外観を露出させます。その後、鎖骨近くの胸鎖乳突筋に到達するようにマイナスリードの長さを調整し、マイナスリードからリードチューブを慎重に取り外します。次に、胸鎖乳突筋のV字型の曲がりに10センチメートルの縫合糸を通し、ループを作成します。マイナスリードからステンレス鋼の電極をこのループに通し、鎖骨近くの筋肉の下に配置します。ループを軽く結んで、胸鎖乳突筋を損傷することなくステンレス鋼の電極を固定します。さらに、筋肉の頭蓋側に2番目の縫合糸を配置し、ネガティブリードのチューブの周りに結び付けて固定します。その後、剣状突起の周りを切片し、剣状突起から鎖骨までの筋肉から皮膚を慎重に分離します。次に、正のリードを伸ばして剣状突起に到達します。プラスのリード線からリードチューブを取り外し、内部のコイル状のステンレス鋼電極が細いピンセットで引き伸ばされていることを確認します。次に、18ゲージの針を使用して、剣状突起の周りの筋肉の下にトンネルを作成します。次に、ステンレス鋼の電極を針に入れ、剣状突起の周りの筋肉に通します。針を抜いた後、10センチメートルの縫合糸が付いた縫合針を使用して、コイル状のステンレス鋼電極を剣状突起の周りの筋肉に軽く縫合します。正のリードをさらに固定するには、剣状突起の頭蓋側に2番目の縫合糸を配置し、正のリードのチューブに結び付けます。20センチメートルの縫合糸が付いたステッチ針を使用して、すべての切開部を閉じます。移植後、マウスを清潔なケージに入れます。まず、テレメーター付きのマウスをケージに置き、マウステレメトリの受信機として機能するTベースにケージを配置します。記録可能なコンピューターの電源を入れ、インストールされているデータ分析ソフトウェアアプリケーションを使用して、マウスから心電図データを収集します。次に、記録可能なコンピューター上のラボチャートアプリケーションを使用して、心電図を記録します。心電図データを解析するには、LabChartを起動し、記録期間のデータファイルを開きます。HRV ボタンをクリックし、それに応じて心拍検出設定を調整して心拍変動を分析します。次に、[HRV] ボタンをクリックし、[ビート分類器] ビューを選択します。Beat Classifierビューですべてのビートを選択し、HRVボタンからレポートビューを選択します。レポート ビューからデータをコピーし、Excel に貼り付けて、さらに分析します。心電図分析では、心拍数は徐々に低下し、呼吸数間隔は GD 17 から PD 21 まで徐々に増加することが示されました。HRV 分析により、低周波と高周波の比率が PD 0 から PD 21 まで急激に増加することが示されました。
本研究では、妊娠期から授乳期にかけての母マウスにおける生理学的変化と、それが母性行動および幼マウスの発達に及ぼす影響について調査します。テレメトリーシステムを用いた連続的なECGモニタリングにより、この重要な期間における母体生理のダイナミクスに関する知見を提供します。
妊娠から授乳期にかけてのマウスにおける連続的なECGおよび行動モニタリングにより、母親としての移行期における自律神経系および生理学的適応の精密なマッピングが可能になります。このアプローチは、母親の行動および神経生理学の前臨床モデルにおいて、メカニズム的なリスク低減と予測的な信頼性を裏付けるものです。本手法は、母親と子の健康に関連する神経発達および自律神経経路を標的とした研究において、トランスレーショナルな連続性を高めます。
このテレメトリーベースのワークフローは、初期のメカニズム研究から、母体および神経発達ターゲットの前臨床検証に至るまでの創薬研究の連続的なプロセスに統合されます。