Isolation and Cryopreservation of Highly Viable Human Peripheral Blood Mononuclear Cells From Whole Blood: A Guide for Beginners

Brian Dinh; Marten A. Hoeksema; Nathanael J. Spann; Jacob Rendler; Isidoro Cobo; Christopher K. Glass; Calvin Yeang

doi:10.3791/66794

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Isolation and Cryopreservation of Highly Viable Human Peripheral Blood Mononuclear Cells From Whole Blood: A Guide for Beginners

全血からの生存率の高いヒト末梢血単核細胞の単離と凍結保存:初心者向けガイド

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10:48 min

October 25, 2024

DOI: 10.3791/66794-v

Brian Dinh¹, Marten A. Hoeksema², Nathanael J. Spann³, Jacob Rendler¹, Isidoro Cobo^4,5, Christopher K. Glass^3,6, Calvin Yeang¹

¹Division of Cardiology, Department of Medicine,University of California San Diego, ²Department of Medical Biochemistry, Amsterdam Immunity and Infection: Inflammatory diseases; Amsterdam Cardiovascular Sciences: Atherosclerosis and Ischemic Syndrome,Amsterdam UMC location University of Amsterdam, ³Department of Cellular and Molecular Medicine,University of California San Diego, ⁴Division of Clinical Immunology & Rheumatology, Department of Medicine, Heersink School of Medicine,University of Alabama at Birmingham, ⁵Comprehensive Arthritis, Musculoskeletal, Bone and Autoimmunity Center, Heersink School of Medicine,University of Alabama at Birmingham, ⁶Department of Medicine,University of California San Diego

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコールは、末梢血単核細胞の収集、保存、融解のためのアクセス可能なガイドを提供し、フローサイトメトリーやRNAシーケンシングなどのダウンストリーム分析やワークフローに適しています。プラズマとバフィーコートのコレクションも実演されます。

このプロトコルでは、全血から高生存率の末梢血および単核細胞(PBMC)を収集し保存する方法について、わかりやすいステップバイステップのチュートリアルを提供することを目指しています。PBMCには、リンパ球、樹状細胞、および単球が含まれます。バルクPBMCは、個々の細胞タイプを分離するために処理することができ、RNAシーケンシングやフローサイトメトリーなど、さまざまな実験やアッセイで一般的に使用されています。

PBMCに加えて、EDTAプラズマとバフィーコート全体の収集方法も示します。このプロトコールを開始する前に、表2に記載されている材料と試薬を準備してください。このプロトコルは、6本の密度勾配遠心分離チューブからPBMCを採取するために設計されており、各チューブは約1,200万個の細胞を生成します。

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